光活性荧光团和体内标记方法技术

本发明专利技术提供了光活性荧光团、光活性配体和光活性复合体。光活性荧光团包括含氮杂环丁烷的Janelia‑Fluor染料的可光活化衍生物。光活性配体包括光活性荧光团和蛋白标签。光活性复合体包括与蛋白缀合的光活性配体。本发明专利技术还提供了用光活性荧光团、光活性配体和光活性复合体进行体内标记和光活化光活性荧光团、光活性配体和光活性复合体的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】光活性荧光团和体内标记方法相关申请本申请要求2016年5月20日提交的第62/339,643号美国临时专利申请的优先权，其全部公开内容通过引用整体并入本文。
本专利技术的主题一般性地涉及光活性荧光团和体内标记方法。更具体地，本专利技术的主题涉及小分子光活性荧光团，用小分子光活性荧光团在体内标记的方法，以及荧光化合物的体内光活化方法。
技术介绍
小分子荧光团是用于高级成像实验的重要工具。这些比荧光蛋白更亮的荧光团，是现代显微镜检查的关键要素。最近，新的蛋白特异性标记策略的开发，例如Johnsson倡导的自我标记标签概念，已经能够在活细胞内形成荧光生物缀合物：可透过膜的合成染料“配体”被动地扩散到细胞中，在细胞中与它们的同源蛋白“标签”形成共价键。这种类型的自我标记标签将遗传编码(荧光蛋白的主要优点之一)与有机荧光团的有利光物理学结合在一起。基于这些复杂的连接技术，本专利技术人最近报道了掺入四元氮杂环丁烷环可以显著改善小的、可渗透细胞的荧光团的亮度和光稳定性。这些“JaneliaFluor”(JF)染料是用于活细胞成像的优秀标记，特别是在单分子跟踪实验中，它们可以实现更长时间的观察和更好本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种光活性荧光团，其包括含氮杂环丁烷的Janelia‑Fluor染料的可光活化衍生物。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.05.20 US 62/339,6431.一种光活性荧光团，其包括含氮杂环丁烷的Janelia-Fluor染料的可光活化衍生物。2.根据权利要求1所述的光活性荧光团，其中所述荧光团通过光诱导脱羧。3.根据权利要求1所述的光活性荧光团，其中所述可光活化衍生物为可光活化的Janelia-Fluor549。4.根据权利要求1所述的光活性荧光团，其中所述可光活化衍生物为可光活化的Janelia-Fluor646。5.一种形成光活性荧光团的方法，所述方法包括笼化Janelia-Fluor染料。6.根据权利要求5所述的方法，其中，所述笼化包括：将草酰氯加入到Janelia-Fluor染料的溶液中，形成第一混合物；将三乙胺和(三甲基甲硅烷基)重氮甲烷依次加入至所述第一混合物中，形成第二混合物；浓缩所述第二混合物，形成浓缩物；纯化所述浓缩物，以提供所述光活性荧光团。7.根据权利要求6所述的方法，其中所述Janelia-Fluor染料包含Si-罗丹明。8.一种光活性配体，其包括光活性荧光团和蛋白标签。9.根据权利要求8所述的光活性配体，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：卢克·D·拉维斯，乔纳森·B·格林，
申请(专利权)人：霍华德休斯医学研究所，
类型：发明
国别省市：美国,US