特异性结合HIV上包膜糖蛋白gp120的多肽及其应用制造技术

一种特异性结合HIV病毒上蛋白gp120的多肽及其应用。HIV病毒侵染T细胞的第一步是病毒表面的gp120与T细胞表面的CD4等分子结合，发明专利技术合成gp120结合剂可以有效阻断病毒的侵染，从而保护T细胞，因此具有重要意义。本发明专利技术核心多肽：Gln‑Ile‑Lys‑Ile‑Leu‑Gly‑Asn‑Gln‑Gly‑Ser‑Phe‑Leu‑Thr‑Asp‑Gly‑Pro，其分子量为1687.91。此种多肽可以特异性结合gp120，并有很小的解离常数（10‑9M），对于控制艾滋病病情的发展具有潜在的应用价值。

Polypeptide specifically binding HIV coated glycoprotein gp120 and its application

A polypeptide that specifically combines HIV virus protein gp120 and its application. The first step for HIV to infect T cells is to combine gp120 on the surface of the virus with CD4 and other molecules on the surface of T cells. The invention of gp120 binder can effectively block the infection of the virus, thereby protecting T cells, so it is of great significance. The core polypeptide of the present invention is Gln_Ile_Lys_Ile_Leu_Gly_Asn_Gly_Ser_Phe_Leu_Thr_Asp_Gly_Pro with molecular weight of 1687.91. The peptide can specifically bind to gp120 and has a small dissociation constant (10_9M), which has potential application value in controlling the development of AIDS.

【技术实现步骤摘要】
特异性结合HIV上包膜糖蛋白gp120的多肽及其应用
本专利技术涉及一种特异性结合HIV病毒上蛋白gp120的多肽及其应用。
技术介绍
HIV病毒的复制大概可以分为以下六个步骤：1）HIV病毒通过包膜糖蛋白gp120和靶细胞上的CD4等受体结合进入细胞；2）病毒自身的逆转录酶逆转录合成的DNA整合到宿主细胞的基因组上；3）开始转录的过程合成新的mRNA；4）转录mRNA合成新的病毒蛋白；5）组装新的病毒颗粒；6）释放新组装的蛋白和颗粒成熟。切断以上六个步骤中的一个都可以控制病毒的侵染，从而降低体内病毒含量，控制艾滋病病情的发展。目前的药物的设计主要有抑制逆转录酶（步骤2）、抑制整合酶（步骤2）和抑制蛋白酶（步骤4）等几种方法。但是这几种方法在临床上容易诱导HIV耐药性突变，而且对人体有较大副作用，从而限制了他们在临床上的使用。因此研发新的抗HIV的药物，尤其是切断病毒侵入途径（步骤1）尤为重要。多肽药物具有作用位点专一、疗效确切、低毒和易制备等优点。T-20是目前唯一上市的抗HIV膜融合的多肽药物，但是此药物存在溶解度低、价格昂贵等问题。因此发展一种更加简单，溶解度好，特异性强的多肽类抗HIV多肽类药物很是必要。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种特异性结合HIV病毒上蛋白gp120的多肽。一种多肽，其特征在于该多肽为A）或B）所述的任一多肽：A）为SEQIDNO.1所示的氨基酸序列的多肽；B）SEQIDNO.1所示的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加和/或延长且具有抗HIV活性的由A）衍生的多肽。一种上述的多肽在制备抗HIV-1的药物中的应用；一种上述的多肽制备治疗或预防由HIV-1引起的艾滋病的药物中的应用。本专利技术中的多肽是由多肽公司合成，并无其他特殊要求。本专利技术所述多肽包含有序列1所示的多肽序列：Gln-Ile-Lys-Ile-Leu-Gly-Asn-Gln-Gly-Ser-Phe-Leu-Thr-Asp-Gly-Pro，其分子量为1687.91。合成多肽后，经高效液相色谱和质谱技术验证后，表明合成的底物是完整的序列1多肽。通过表面等离子共振技术（SPR，BiacoreT200）检测本专利技术中的多肽与gp120蛋白、BSA蛋白和CD4蛋白的结合作用，证明本专利技术中的多肽只对gp120有特异性识别作用，见附图1。使用表面等离子共振技术（SPR，BiacoreT200）检测本专利技术中的多肽与gp120蛋白的结合和解离动力学，见附图2，两者的解离常数为7.50×10-9M。本专利技术所提供多肽的生物学特性能预见其许多应用。最主要的是通过多肽与HIV病毒上gp120结合而阻止gp120与靶细胞上的CD4结合，从而控制艾滋病病情的发展，具有潜在的应用价值。附图说明图1为本专利技术所提供多肽与蛋白质gp120特异性结合性能。图2为本专利技术所提供多肽与蛋白质gp120结合的动力学性能。具体实施方式下面给出实施例以对本专利技术作进一步说明。有必要在此指出的是以下实施例不能理解为对本专利技术保护范围的限制，如果该领域的技术熟练人员根据上述本
技术实现思路
对本专利技术做出一些非本质的改进和调整，例如对设计的多肽部分氨基酸序列进行微小的突变，仍属于本专利技术保护范围。实施例1：1、本专利技术中多肽的制备多肽的氨基酸序列如序列表中SEQIDNO.1所示，通过多肽合成公司合成。2、本专利技术中多肽与蛋白质gp120特异性结合性能为了证明本专利技术中所设计的多肽与蛋白质gp120的特异性结合性能，使用表面等离子共振技术（SPR，BiacoreT200）检测本专利技术中的多肽与gp120蛋白、BSA蛋白和CD4蛋白的结合作用。此三种蛋白被偶联在SPR芯片的不同通道，浓度为1μM的本专利技术中多肽流经此三个通道，结果表明本专利技术中的多肽只对gp120有特异性识别结合作用，见附图1。3、本专利技术中多肽与蛋白质gp120结合力测定为了证明本专利技术中的多肽与蛋白质gp120有很强的结合能力，使用表面等离子共振技术（SPR，BiacoreT200）检测本专利技术中的多肽与gp120蛋白的结合和解离动力学，多肽的浓度梯度设置为50nM，250nM，500nM，1000nM。结果表明，两者的解离常数为7.50×10-9M，表明多肽与蛋白gp120有很强的结合力，见附图2。序列表<110>上海大学<120>特异性结合HIV上包膜糖蛋白gp120的多肽及其应用<160>1<170>SIPOSequenceListing1.0<210>1<211>48<212>RNA<213>人工序列()<400>1本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种多肽，其特征在于该多肽为A）或B）所述的任一多肽：A）为SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的多肽；B）SEQ ID NO.1所示的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加和/或延长且具有抗HIV活性的由A）衍生的多肽。

【技术特征摘要】
1.一种多肽，其特征在于该多肽为A）或B）所述的任一多肽：A）为SEQIDNO.1所示的氨基酸序列的多肽；B）SEQIDNO.1所示的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加...

【专利技术属性】
技术研发人员：曹傲能，陈静奇，倪睿，王海芳，
申请(专利权)人：上海大学，
类型：发明
国别省市：上海,31