将腺病毒和化学治疗剂组合用于治疗癌症制造技术

本发明专利技术涉及溶瘤腺病毒载体和化学治疗剂。更具体地，本发明专利技术涉及溶瘤腺病毒载体和化学治疗剂用于癌症治疗。如本文所述的联合疗法具有优异的安全性，并且具有有效的治疗活性。

Combination of adenovirus and chemotherapeutic agents for the treatment of cancer

The invention relates to an oncolytic adenovirus vector and a chemotherapeutic agent. More specifically, the present invention relates to oncolytic adenovirus vectors and chemotherapeutic agents for cancer therapy. The combined therapy described in this paper has excellent safety and effective therapeutic activity.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】将腺病毒和化学治疗剂组合用于治疗癌症专利
本专利技术涉及医学领域。具体地，本专利技术涉及使用ONCOS-102腺病毒与两种化学治疗剂联合治疗人癌症的新策略。还公开了使用病毒和化学治疗剂的这种联合治疗恶性间皮瘤的方法。除了病毒和两种化学治疗剂以外，其他药物也可以包括在所述治疗方案中。专利技术背景恶性间皮瘤(malignantmesothelioma,MM)是一种从间皮发展而来的侵袭性和罕见的癌症形式。MM主要是由于暴露于石棉造成的，表现出较长的潜伏期，通常>30年。间皮瘤患者诊断后的中位存活时间通常仅为9-12个月。MM在85.5％的MM病例中影响胸膜(肺和内胸壁的外衬层)，在13.2％的MM病例中影响腹膜(腹腔内衬层)，在0.5％的MM病例中影响心包(包围心脏的囊)，以及在0.8％的MM病例中影响鞘膜(包围睾丸的囊)。MM肿瘤通常对标准疗法反应不佳，并且发病率在世界范围内不断增加。MM的低发病率长期以来限制了新药的发现，因此非常需要新的治疗方式。通常，癌症用常规治疗方案诸如例如手术、激素疗法、化学疗法、放射疗法和/或其他疗法进行治疗。然而，在许多情况下，通常以晚期为特征的癌症不能用现有疗法治愈。病毒疗法是一种相对新颖的治疗方法，其利用了一些病毒杀伤它们在其中增殖的细胞的天然能力和扩散到相邻细胞(从而放大初始输入剂量的治疗效果)的能力。在病毒疗法中，通过病毒基因组的基因工程小心控制癌细胞转导和病毒复制，以获得有效和安全的肿瘤根除。安全的肿瘤根除需要将各种遗传修饰引入腺病毒基因组，从而将复制仅限制在肿瘤细胞中，并最终获得肿瘤的选择性根除，而对健康组织没有副作用。腺病毒关键调控基因的特定缺失可用于产生功能失调的蛋白质或其表达的缺乏，这导致对靶细胞中存在的特定遗传特征的依赖。E1A的部分缺失导致在正常细胞中的复制受限，但允许在靶细胞诸如癌细胞中复制。已经产生了特征在于CR2(恒定区2)中的24个碱基对缺失的条件性复制病毒，显示其在治疗神经胶质瘤和乳腺癌异种移植物方面是有效的和选择性的(Fueyo等，2000；Heise等2000)。其癌症特异性源于功能失调的E1A不能释放E2F1转录因子，这导致对游离E2F1的需要。E2F1在癌细胞中很丰富，其中pRb途径最常被破坏(Hanahan和Weinberg2000)。临床和临床前结果表明，利用非武装性溶瘤病毒的治疗的免疫刺激性不足以导致持续的抗肿瘤治疗性免疫反应。在这一点上，溶瘤病毒已被武装成更具免疫刺激性。可将病毒工程化以表达高度免疫原性的蛋白质，诸如粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)。当免疫原性蛋白在肿瘤微环境内表达时，它们是特异性和长效的抗肿瘤免疫力的强效刺激剂。将免疫治疗性基因引入肿瘤细胞中并进一步将其翻译成蛋白质导致了免疫反应的激活和对肿瘤细胞的更高效破坏。在这一点上，最相关的免疫细胞是天然杀伤细胞(NK)和细胞毒性CD8+T细胞。ONCOS-102(Ad5/3-D24-GM-CSF；在WO2010/072900中公开的)是血清型5腺病毒，其包含用于增强向癌细胞递送基因的嵌合衣壳和用于癌细胞局限性复制的E1A区域的Rb结合部位中的24bp缺失。ONCOS-102装备有粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)以增强免疫刺激作用。ONCOS-102的安全性和免疫学活性已在I期临床研究(NCT01598129)中得到证明。在该I期研究中，用ONCOS-102局部治疗胸膜间皮瘤诱导了全身性抗肿瘤CD8+T细胞反应，并且CD8+T细胞浸润到最后一线难治性恶性胸膜间皮瘤患者的肿瘤中。Koski等(2010)公开了用ONCOS-102治疗总共21名患有标准疗法难治的晚期实体瘤的患者。根据这些研究，ONCOS-102在治疗癌症患者中似乎是安全的。还看到了令人期待的功效迹象。公开文本WO99/59604公开了一种治疗鳞状细胞癌的方法，该方法由将腺病毒直接注射到癌中并施用两种化学治疗剂顺铂和5-氟尿嘧啶组成。Siurala等(2015)公开了衣壳经修饰的溶瘤腺病毒CGTG-102(与ONCOS-102相同)与多柔比星(含有或不含异环磷酰胺)的组合。当在具有完全免疫能力的叙利亚仓鼠体内对建立的软组织肉瘤肿瘤进行体内测试时，发现该组合是有效的。公开文本US7393478B2公开了用于抑制受试者中肿瘤生长的方法，其包括向受试者施用有效量的包含顺铂和治疗剂的胶束。该方法中的治疗剂可以是例如GM-CSF。在实践中，恶性间皮瘤(MM)的治疗自2003年以来保持不变。最常用的MM一线化学疗法是用化学治疗剂培美曲塞(PemetrexedDisosium,Alimta)、顺铂(Platinol)、卡铂(Paraplatin)及其组合进行的。尽管在常规癌症治疗方案中取得了进展，但人间皮瘤仍然无法治愈，迫切需要新的治疗方案。专利技术概述本专利技术的目的是提供溶瘤腺病毒和化学治疗剂的新组合，使用溶瘤腺病毒和化学治疗剂治疗患者癌症的新型联合疗法，并且还解决与常规癌症疗法相关的问题。本专利技术的一个方面是用于治疗人癌症，优选用于治疗人恶性间皮瘤的ONCOS-102腺病毒，其中将向有此需要的人患者施用该病毒与施用两种化学治疗剂相组合来进行。本专利技术的另一方面是用于在患者中治疗人癌症，优选人恶性间皮瘤的方法，其包括向所述患者施用ONCOS-102腺病毒和两种化学治疗剂的步骤。本专利技术的又一方面是ONCOS-102腺病毒在治疗人恶性间皮瘤中的用途，其中将所述病毒与两种化学治疗剂组合向患者施用。附图简述包括以下附图来进一步说明本专利技术的某些方面和特征。参照这些附图中的一个或多个并结合具体实施方案(包括实施例)的详细描述，可以更好地理解本专利技术。图1.在体外功效研究中利用培美曲塞和顺铂或培美曲塞和卡铂单独地或与ONCOS-102(10VP/细胞)组合地，或利用ONCOS-102单独地进行人间皮瘤细胞JL-1、MSTO-211H和H226的治疗。a)通过MTS细胞活力测定法测量抗肿瘤功效。治疗后72小时相对于未治疗的细胞(模拟)测定细胞活力。通过流式细胞术分析处理后48小时的b)坏死细胞(PI)和c)早期凋亡细胞(FITC标记的膜联蛋白-V)的量。误差棒，平均值±SEM：*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001。图2.利用培美曲塞和顺铂或培美曲塞和卡铂单独地或与ONCOS-102(10VP/细胞)组合地进行人间皮瘤细胞JL-1、MSTO-211H和H226的联合治疗，或利用ONCOS-102单独地进行治疗-体外免疫原性肿瘤细胞死亡。a)使用ATP测定试剂盒处理后48小时(J1-1，MSTO-211H)和72小时(H226)从上清液测量细胞外ATP。b)使用ELISA测定处理后3天测量细胞外HMGB1向上清液中的分泌。c)在通过流式细胞术处理后24小时(H226，J1-1)和48小时(MSTO-211H)测量经测试的人间皮瘤细胞的外细胞表面上的钙网蛋白暴露。误差棒，平均值±SEM：*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001。图3.在三种间皮瘤细胞系(J1-1、MSTO-211H，H226)中测量本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.ONCOS‑102腺病毒用于治疗人恶性间皮瘤，其中向患者联合施用所述病毒与两种化学治疗剂。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.01.15 FI 201650261.ONCOS-102腺病毒用于治疗人恶性间皮瘤，其中向患者联合施用所述病毒与两种化学治疗剂。2.根据权利要求1所述的ONCOS-102腺病毒用于治疗人恶性间皮瘤，其中所述两种化学治疗剂是培美曲塞和顺铂或培美曲塞和卡铂。3.根据权利要求2所述的ONCOS-102腺病毒用于治疗人恶性间皮瘤，其中培美曲塞与顺铂之间的摩尔比为10:0.75至10:3。4.根据权利要求3所述的ONCOS-102腺病毒用于治疗人恶性间皮瘤，其中培美曲塞与顺铂之间的摩尔比为10:1.5。5.根据权利要求2所述的ONCOS-102腺病毒用于治疗人恶性间皮瘤，其中培美曲塞与卡铂之间的摩尔比为5:8至5:2。6.根据权利要求5所述的ONCOS-102腺病毒用于治疗人恶性间皮瘤，其中培美曲塞与卡铂之间的摩尔比为5:4。7.根据权利要求1至6中任一项所述的ONCOS-102腺病毒用于治疗人恶性间皮瘤，其中所述病毒的量为5x1010至5x1011VP。8.根据权利要求7所述的ONCOS-102腺病毒用于治疗人恶性间皮瘤，其中所述病毒以3x1011VP/5ml的量施用。9.根据权利要求1-8中任一项所述的ONCOS-102腺病毒用于治疗人恶性间皮瘤，其中所述化学治疗剂和所述病毒以有效量施用。10.根据权利要求1-9中任一项所述的ONCOS-102腺病毒用于治疗人恶性间皮瘤，其中所述病毒通过腹膜内施用或通过直接注射入肿瘤施用，并且所述两种化学治疗剂通过静脉内或腹膜内施用。11.根据权利要求1至10中任一项所述的ONCOS-102腺病毒用于治疗人恶性间皮瘤，其中在施用所述两种化学治疗剂之前并且还在所述化学治疗剂的施用期期间施用所述病毒。12.根据权利要求1至10中任一项所述的ONCOS-102腺病毒用于治疗人恶性...

【专利技术属性】
技术研发人员：L·库尔克，T·兰基，S·佩索宁，E·哈维斯托，A·沃兰托，L·瓦西莱夫，
申请(专利权)人：塔格瓦克斯有限公司，
类型：发明
国别省市：芬兰,FI