一株嗜热链球菌及在生产搅拌型酸奶中的应用制造技术

本发明专利技术涉及一株嗜热链球菌及其应用，本发明专利技术提供了一株在传统腌制韭菜中分离到的嗜热链球菌LSE‑2014ZA001‑C198‑B‑03，它的保藏编号为CGMCC No.13624。本发明专利技术菌株个有以下有益效果：菌株在3h就可以凝乳，凝乳酸度为46oT，发酵121h极限酸值为85oT；胞外多糖含量高于发酵乳生产中常用的商业菌种；菌株通过特异性引物扩增、测序表明能够表达谷氨酸脱羧酶，菌株可以合成γ‑氨基丁酸，发酵37℃发酵24h产量为2.01g/L；本发明专利技术菌株和保加利亚乳杆菌LSR‑L‑L1组合制备搅拌型酸奶，发酵的酸奶状态细腻、粘稠度高、拉丝性好、具有很好的酸香风味。

【技术实现步骤摘要】
一株嗜热链球菌及在生产搅拌型酸奶中的应用
本专利技术属于微生的
，尤其涉及一株嗜热链球菌及在生产搅拌型酸奶中的应用。
技术介绍
嗜热链球菌（Streptococcusthermophilus）作为一种重要的发酵剂，发酵的酸乳能产生独特的风味，酸乳已成为遍布世界各地的产业化健康美食。发酵乳制品的产业化，使得人们对发酵剂菌种（主要是嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌）提出更高的要求。目前我们国家大多数发酵乳生产企业使用的发酵剂主要依赖进口，因此通过企业自己不断筛选出候选菌株及全面了解菌株的多方面特性，以满足发酵乳生产，是我国发酵乳制品产业噬待解决的问题。胞外多糖是乳酸菌在生长过程中分泌到细胞壁外的糖类化合物，有的依附于细胞壁形成荚膜多糖，有的进入培养基形成粘液多糖。胞外多糖特殊的物理特性及流变特性对于改善酸奶的质构具有关键作用，可以作为酸奶天然的粘稠剂、稳定剂、凝胶剂及乳化剂，为发酵乳提供黏性、稳定性和保水性。因此筛选具有能高产胞外多糖的菌株对满足当代消费者零添加剂或少添加的发酵乳制品具有重要意义。γ-氨基丁酸（γ-aminobutyricacid,GABA）是一种泛分布于自然界的非蛋白质氨基酸。在生物体内由谷氨酸经谷氨酸脱羧酶催化转化而来，是一种重要的抑制性神经传递物质，参与很多代谢活动，如降血压、改善脑功能、镇静、增强长期记忆及肝、肾机能等功能。含有谷氨酸脱羧酶的乳酸菌也能将谷氨酸转化为γ-氨基丁酸，是GABA生产的一个重要途径。
技术实现思路
针对现有技术存在的上述不足，本专利技术的目的是提供一株凝乳速度快、高产胞外多糖、具有γ-氨基丁酸的合成性能的嗜热链球菌。本专利技术的另一目的是提供嗜热链球菌LSE-2014ZA001-C198-B-03在生产搅拌型酸奶上的应用。为实现上述专利技术目的，本专利技术采用下述技术方案：一株嗜热链球菌LSE-2014ZA001-C198-B-03，它的保藏编号为CGMCCNo.14751，保藏日期为2017年01月13日。与现有技术相比，本专利技术的有益效果有：1、本专利技术菌株LSE-2014ZA001-C198-B-03的凝乳时间很快，菌株在3h就可以凝乳，凝乳酸度为46oT，发酵121h极限酸值为85oT，说明菌株的后酸较低，有利于在货架期内风味的维持。2、本专利技术菌株LSE-2014ZA001-C198-B-03的胞外多糖含量高于发酵乳生产中常用的商业菌种。通过粘度的测定，其发酵的脱脂乳粘度明显高于对照菌种，同时发酵的脱脂乳更加粘稠。所以本专利技术菌株应用于酸奶生产能够明显提高酸奶的粘度，改善酸奶质地，减少添加剂的使用。3、本专利技术菌株LSE-2014ZA001-C198-B-03，采用HPLC法对发酵液中的γ-氨基丁酸进行定量检测，本专利技术菌株可以合成γ-氨基丁酸，发酵37℃发酵24h产量为：2.01g/L，本专利技术菌株能够高产γ-氨基丁酸，所以能够用于食品或保健药品中。4、本专利技术菌株LSE-2014ZA001-C198-B-03和保加利亚乳杆菌LSR-L-L1组合制备搅拌型酸奶，发酵的酸奶状态细腻、粘稠度高、拉丝性好、具有很好的酸香风味。本专利技术保藏说明：分类命名：嗜热链球菌；拉丁名：（Streptococcusthermophilus）；参椐的生物材料：LSE-2014ZA001-C198-B-03；保藏机构：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏机构简称：CGMCC；地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。保藏日期：2017年01月13日保藏中心登记入册编号：CGMCCNo.14751。附图说明图1为本专利技术所述的嗜热链球菌LSE-2014ZA001-C198-B-03的镜检照片。图2为本专利技术所述的嗜热链球菌LSE-2014ZA001-C198-B-03的产酸曲线图。图3为本专利技术所述的嗜热链球菌LSE-2014ZA001-C198-B-03的生长曲线图。图4为本专利技术所述的嗜热链球菌LSE-2014ZA001-C198-B-03的γ-氨基丁酸的标准品色谱图。图5为本专利技术所述接种嗜热链球菌LSE-2014ZA001-C198-B-03发酵液中γ-氨基丁酸的色谱图。图6为本专利技术在未接种LSE-2014ZA001-C198-B-03发酵液的阴性对照色谱图。具体实施方式下面结合实施例，进一步阐述本专利技术，但不限于实施例。下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。实施例1：菌种的分离纯化鉴定1．菌种的分离纯化将采集到的传统腌制韭菜样品剪碎称取10g，加入到100mLMC液体培养基中42℃恒温培养18h。取培养液1mL用生理盐加入到9mL生理盐水中，充分震荡30s，依次进行梯度稀释，最高稀释度为108。采用MC固体培养基进行分离，取5、6、7、8四个梯度的稀释样品进倒板（37℃,48h）。初步根据菌落形态、大小、溶钙圈大小、颜色、培养基中生长位置（表面、内部、及底部）挑取不同表观特征且溶钙圈较大的菌落平板划线培养，进行纯化。再用同样的方法反复划线纯化数次，使最终平板上为同一形态菌落为止。挑取单菌落接菌于MRS液体培养基中37℃培养18h，以备保藏和鉴定使用。2.菌种的鉴定2.1菌种的形态学特征LSE-2014ZA001-C198-B-03的菌落在MC固体培养基上的菌落为紫红色，周围有溶钙圈。显微镜下为椭球形成对呈长链，见图1LSE-2014ZA001-C198-B-03的镜检照片。2.2菌种的分子生物学鉴定将初步获得革兰氏阳性、过氧化氢酶阴性的菌株暂定为乳酸菌，然后根据UNI-Q柱式细菌DNA抽提试剂盒的实验步骤提取细菌基因组，用0.8%的琼脂糖凝胶电泳观察提取到的基因组。以提取到的菌株的基因组为模板，采用细菌通用引物：27F(5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3')和1541R(5'-TAAGGAGGTGATCCAGCC-3')为上、下游引物，采用PCR扩增试剂盒，50µL的反应体系进行PCR反应。反应参数为：95℃预变性5min，35个循环的参数设置为94℃30s，55℃30s，72℃90s，72℃延伸10min。用0.8%琼脂糖凝胶电泳检测扩增DNA片段的大小，测序由上海生物工程技术服务有限公司完成。将经过测序所得到的序列用Blast软件在Genebank中搜索相似序列。据设计的引物进行16SrDNA扩增，电泳显示在1500bp左右有阳性条带，与目的片段大小一致，将PCR产物送至测序公司进行测序。测序结果通过Blasten比对，与嗜热链球菌具有99%的相似性,16SrDNA全长序列如SEQIDNO.1所示。结合菌株的生理生化特征和分子生物学16SrDNA鉴定结果，本专利技术菌株LSE-2014ZA001-C198-B-03鉴定为嗜热链球菌，并将其命名为嗜热链球菌LSE-2014ZA001-C198-B-03，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为:CGMCCNo14751。3.LSE-2014ZA001-C198-B-03的产酸性能测定。将在MC液体培养基中活化三代的种子液按2%的接种量接种蛋白含量为3.5%的脱脂复原乳中，38℃恒温培养120h，12h之前酸度上升较快，每隔2h滴本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一株嗜热链球菌（Streptococcus thermophilus）LSE‑2014ZA001‑C198‑B‑03，其特征在于：它的保藏编号为CGMCC No.13624。

【技术特征摘要】
1.一株嗜热链球菌（Streptococcusthermophilus）LSE-2014ZA001-C198-B-03，其特征在于：它的保藏编...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨子燕，赵世伟，杨绍芬，陈敏，李福美，宋运永，马万平，
申请(专利权)人：云南皇氏来思尔乳业有限公司，
类型：发明
国别省市：云南,53