一类具有苯甲酰胺母核结构的Grp94抑制剂及其用途制造技术

本发明专利技术涉及药物化学领域，具体涉及一类具有Grp94抑制活性的苯甲酰胺类化合物(I)及其制备方法，药效学试验证明，本发明专利技术化合物具有治疗由Grp94介导的疾病的功效。

A class of Grp94 inhibitors with benzamide core structure and their uses

The invention relates to the field of drug chemistry, in particular to a class of benzamide compounds (I) with Grp94 inhibitory activity and the preparation methods. The pharmacodynamic test shows that the compound has the efficacy of treating the disease mediated by Grp94.

【技术实现步骤摘要】
一类具有苯甲酰胺母核结构的Grp94抑制剂及其用途
本专利技术涉及药物化学领域，具体涉及一类具有Grp94抑制活性的苯甲酰胺类化合物及其在治疗由Grp94介导的疾病中的用途。
技术介绍
热休克蛋白Hsp90是细胞内高度保守的一类蛋白，其主要功能是辅助细胞内其他蛋白(客户蛋白)的成熟。Hsp90包括四个亚型，分别是细胞质中的Hsp90α/β，线粒体中的TRAP1和内质网中的Grp94。作为Hsp90的内质网亚型，Grp94的客户蛋白广泛参与炎症相关性疾病的发生发展中。Grp94的客户蛋白Toll样受体和整合素Integrins在炎症的发生发展中有很重要的作用。Toll样受体属于病原相关分子模式识别受体，其广泛表达于T细胞、B细胞、DC细胞等各类免疫细胞，在天然免疫及获得性免疫中起重要作用。Toll样受体激活可以诱导TNF-α、IL-6、IL-8、IL-12、IFN等炎症因子的表达。(LeoA.B.Joosten等，Nat.Rev.Rheumatol.,2016,12(6):344)Integrins是细胞粘附分子的一类，广泛表达于细胞表面，介导细胞与细胞、细胞与细胞外基质、细胞与病原体的相互作用。Grp94可以通过调控Toll样受体、整合素来调节炎症的发生发展。在炎症相关性巨噬细胞中敲除Grp94，可以抑制DSS诱导的结肠炎发生，同时也可以减少AOM/DSS诱导的结肠炎向结肠癌的转化。(CrystalMorales等，CancerRes.,2014,74(2):446–459.)因此，Grp94抑制剂在结肠炎、炎癌转化预防、哮喘、风湿、糖尿病等炎症相关性疾病中有很大的应用前景。目前已经有多个Grp94选择性抑制剂被开发。如，PU-WS13对Grp94的抑制活性为0.22μM，对Hsp90α的抑制活性为27.3μM；(HardikJ.Patel等，J.Med.Chem.,2015,58(9):3922-43.)KUNG-94对Grp94的亲和力为0.44μM，对Hsp90α的亲和力超过100μM。(ACSChem.Biol.2017,12(1):244-253.)这些抑制剂分子的Grp94抑制活性和选择性较弱，同时这些抑制剂在炎症相关性疾病中的治疗作用尚未研究。
技术实现思路
本专利技术采用基于结构的药物设计方法，设计并合成得到一类具有强效、强选择性的Grp94抑制剂分子。其结构通式如(I)所示：其中R代表芳香环或乙炔基，所述芳香环选自苯环、萘环、五元或六元含氮芳杂环，所述芳香环或乙炔基被一个或多个取代基取代，取代基选自卤素、氰基、硝基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟烷基、C3-6环烷基、C3-6含氮或含氧杂环基、苯环、五元或六元含氮芳杂环、-OR2、-C(O)R2、-C(O)OR2、-S(O)mR2、-NR3R4、-C(O)NR3R4、-C(O)NHR3、-NR3C(O)R4和-NR3S(O)mR4，其中所述取代基独立选自一个或多个，多个取代基也可以连接成环；R1代表C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟烷基、C3-6环烷基、C3-6含氮或含氧杂环基、苯环、五元或六元含氮芳杂环，以上所述基因各自任选被选自C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟烷基、C3-6环烷基、C3-6含氮或含氧杂环基、苯环、五元或六元含氮芳杂环、-OR2、-C(O)R2、-C(O)OR2、-S(O)mR2、-NR3R4、-C(O)NR3R4、-C(O)NHR3、-NR3C(O)R4和-NR3S(O)mR4中的一个或多个取代基所取代；R2、R3、R4各自独立地选自氢、C1-6烷基、C3-6环烷基、C3-6含氮或含氧杂环基，以上所述的取代基各自任选被选自C1-6烷基、卤素、羟基、C1-6羧酸酯基、氨基、硝基、氰基、C1-6烷氧基、C1-6羟烷基、C3-6环烷基、C3-6含氮或含氧杂环基中的一个或多个取代基所取代；m为0、1或2。R优选代表苯环、取代苯环、乙炔基或取代的乙炔基，取代基选自C1-6烷基、C3-6环烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基或卤素。R更优选代表4-甲基苯基、4-乙基苯基、4-异丙基苯基、4-正丙基苯基、4-叔丁基苯基、4-氯苯基、4-甲氧基苯基、4-乙氧基苯基、2,3-二甲基苯基、3,4-二甲基苯基、2,3-二氯苯基、2,6-二氯苯基、3,3-二甲基-2-丁炔基、1-己炔基、5-甲基-1-己炔基。R1优选代表其中R5代表C1-6烷基、C3-6环烷基、C3-6含氮或含氧杂环基，所述C1-6烷基、C3-6环烷基、C3-6含氮或含氧杂环基被一个或多个卤素、氨基或羟基取代。R1更优选代表本专利技术部分化合物可用下列方法1进行制备：方法1：由原料1-1与不同取代的芳香卤代物在Pd(PPh3)4和CsCO3条件下偶联得到中间体1-2，再与各类胺、DIEA在DMSO中120℃下反应得到中间体1-3，进而在氢氧化钠溶液、30％H2O2和乙醇的混合溶液中发生氰基水解得到终产物。本专利技术部分化合物可用下列方法2进行制备：方法2：由原料2-1先与胺、DIEA在DMSO中120℃下反应得到中间体2-2。中间体2-2在氢氧化钠溶液、30％H2O2和乙醇的混合溶液中发生氰基水解得到中间体2-3，进而与取代的苯硼酸酯在Pd(PPh3)4和CsCO3条件下偶联得到终产物。本专利技术中部分R代表乙炔基或者取代乙炔基的化合物可用下列方法3进行制备：方法3：由原料3-1先与炔原料在CuI和(PPh3)2Cl2Pd催化下在三乙胺中反应得到中间体3-2，再与各类胺、DIEA在DMSO中120℃下反应得到中间体3-3。中间体3-3在氢氧化钠溶液、30％H2O2和乙醇的混合溶液中发生氰基水解得到目标产物。本专利技术所述化合物具有强效的Grp94选择性抑制活性，对Hsp90细胞质亚型Hsp90α没有任何抑制作用。在DSS诱导的结肠炎模型中，代表性化合物30可以显著抑制结肠炎的发展。此类Grp94抑制剂分子可以用于治疗/预防Grp94介导的炎症相关性疾病，如结肠炎、炎癌转化、哮喘、风湿、糖尿病、青光眼、自身免疫性疾病等。本专利技术还公开了一种药物组合物，通式(I)的化合物、药学上可接受的盐或溶剂化物可以添加药学上可接受的载体制成常见的药用制剂，如片剂、胶囊、粉剂、糖浆、液剂、悬浮剂、针剂，可以加入香料、甜味剂、液体或固体填充料或稀释剂等常用的药物辅料。本专利技术所述化合物和药学上可接受的载体在临床上可以采用口服、静脉注射等给药方式。在临床上可以用于单药治疗，也可以和其他临床上使用的药物组合使用。本专利技术的化合物临床所用剂量为0.01mg～1000mg/天，也可根据病情的轻重或剂型的不同偏离此范围。下面是本专利技术所述化合物的部分药理学实验及结果：一、化合物对Grp94和Hsp90α抑制活性采用荧光偏正的方法测试(FP实验)通过测试化合物与荧光基团标记的格尔德霉素(GM-FITC)竞争性结合重组Grp94和Hsp90α蛋白的能力，反应化合物对两个蛋白的抑制作用。测试中使用384孔黑板(型号为Corning#3575)，测试终体积选择60μL，所测试化合物和GM-FITC溶解于DMSO中备用。将化合物用assaybuffer倍比稀释12个浓度梯度后每个孔板加入20μL稀释好本文档来自技高网...

【技术保护点】
通式(I)的化合物或其药学上可接受的盐：

【技术特征摘要】
1.通式(I)的化合物或其药学上可接受的盐：其中R代表芳香环或乙炔基，所述芳香环选自苯环、萘环、五元或六元含氮芳杂环，所述芳香环或乙炔基被一个或多个取代基取代，取代基选自卤素、氰基、硝基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟烷基、C3-6环烷基、C3-6含氮或含氧杂环基、苯环、五元或六元含氮芳杂环、-OR2、-C(O)R2、-C(O)OR2、-S(O)mR2、-NR3R4、-C(O)NR3R4、-C(O)NHR3、-NR3C(O)R4和-NR3S(O)mR4，多个取代基还可以连接成环；R1代表C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟烷基、C3-6环烷基、C3-6含氮或含氧杂环基、苯环、五元或六元含氮芳杂环，以上所述基因各自任选被选自C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟烷基、C3-6环烷基、C3-6含氮或含氧杂环基、苯环、五元或六元含氮芳杂环、-OR2、-C(O)R2、-C(O)OR2、-S(O)mR2、-NR3R4、-C(O)NR3R4、-C(O)NHR3、-NR3C(O)R4和-NR3S(O)mR4中的一个或多个取代基所取代；R2、R3、R4各自独立地选自氢、C1-6烷基、C3-6环烷基、C3-...

【专利技术属性】
技术研发人员：尤启冬，徐晓莉，姜奋，郭安平，徐嘉辰，
申请(专利权)人：中国药科大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32