一株酿酒酵母及其培养物和在饲料中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)5‑1，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No:60243。本发明专利技术还公开了利用酿酒酵母5‑1制备的发酵液、培养物及培养物稀释液。本发明专利技术的酿酒酵母5‑1代谢产物对于病原细菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和肠炎沙门氏菌)具有极强的抑制作用，作为饲料添加剂添加到饲料中饲喂动物可有效地降低动物发病率，提高动物的生长性能，显著地改善动物肠道的微生物菌群，对养殖业的发展具有十分重要的意义。

【技术实现步骤摘要】
一株酿酒酵母及其培养物和在饲料中的应用
本专利技术涉及饲料
，尤其涉及一株酿酒酵母及其培养物在饲料中的应用。
技术介绍
随着畜牧业规模化、专业化程度的不断提高，在促进了畜牧业的快速发展的同时，畜禽疫病也越来越复杂，给养殖业造成很大损失。目前，在饲料中添加抗生素等药物是目前防治疾病的常用手段。但这不仅容易造成动物胃肠道正常菌群失调，使动物对药物产生耐药性，而且药物的残留也给动物和人类的健康带来严重的危害。其中，酵母培养物作为饲料添加剂，因具有无毒副作用、无残留污染、不产生耐药性且可部分替代抗生素等优点而引起人们广泛关注。它通过活酵母细胞或其他活性因子改善动物胃肠道微生态环境，促进微生物蛋白质合成，从而提高肠道内营养物质的消化与吸收。酵母培养物还可在肠道中竞争性抑制病原微生物生长，改善肠壁结构与形态，抑制霉菌毒素的危害。因此，酵母培养物在畜禽饲养与饲料工业上的应用具有重要意义。但是，目前常用的酵母培养物的固体发酵方法存在以下问题：酵母菌种活力低，酵母菌数量不达标，而且酵母不能充分利用固体发酵原料，导致发酵效果低，经济成本也较高，造成在动物饲喂当中效果并不显著。
技术实现思路
为克服上述技术缺陷，本专利技术公开了一株酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)5-1，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCCNo:60243。本专利技术还公开了一种酿酒酵母发酵液，由上述的酿酒酵母5-1发酵得到。本专利技术还公开了上述酿酒酵母发酵液的制备方法，包括如下步骤：(1)取酿酒酵母5-1，在酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基上用平板划线法划线，28-30℃培养24-48h，得到该菌株的单克隆；(2)挑取单克隆接种于酵母浸出粉胨葡萄糖液体培养基中，24-30℃培养12-24h得到种子液；(3)将种子液接种于酿酒酵母液体发酵培养基中，按体积算，接种量为0.5-5％，28-30℃培养15-36h。其中，所述酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基包括如下的配比组分：酵母浸粉10g/L，胰蛋白胨20g/L，葡萄糖20g/L，琼脂粉20g/L；其中，所述酵母浸出粉胨葡萄糖液体培养基包括如下的配比组分：酵母浸粉10g/L，胰蛋白胨20g/L，葡萄糖20g/L；其中，所述液体发酵培养基包括如下的配比组分：玉米浆干粉5～100g/L，柠檬酸铵10～100g/L，七水硫酸锌0.1～1g/L，无水硫酸镁0.5～5g/L，氯化钙0.1～5g/L，磷酸二氢钾0.1～5g/L，葡萄糖20～50g/L；进一步地，所述液体发酵培养基包括如下配比的组分：玉米浆干粉5～10g/L，柠檬酸铵15～20g/L，七水硫酸锌0.1～0.5g/L，无水硫酸镁0.5～2.5g/L，氯化钙0.1～2.5g/L，磷酸二氢钾0.1～2.5g/L，葡萄糖20～25g/L。本专利技术还公开了一种酿酒酵母培养物，将上述酿酒酵母5-1液体发酵后得到酿酒酵母发酵液，再将酿酒酵母发酵液接种到固体发酵底料中固体发酵，最后烘干粉碎得到。所述酿酒酵母培养物的制备方法为：将酿酒酵母发酵液按每克干物质含酵母菌10-20亿个的接种量接种到固体发酵底料，于30-40℃的条件下密闭发酵24-72小时，再将发酵产物于50-60℃通过管束干燥机和活态烘干塔两级低温干燥即可得到酿酒酵母培养物。所述固体发酵底料的配方为：以重量计，取玉米粉50-70％，麸皮5-15％，玉米蛋白粉5-20％，豆粕5-15％，酒糟15-35％，测出其中的含水量，计算出干物质的重量，将葡萄糖按照干物质重量的5-15％加入其中，最后加水调整含水量至40-60％。本专利技术还公开了一种酿酒酵母培养物稀释液，含有上述酿酒酵母培养物。所述酿酒酵母培养物稀释液的制备方法，包括如下步骤：(1)称取10-100g酵母培养物于150-500mL无菌锥形瓶中，加入20-200mL无菌生理盐水，150-200rpm振荡混匀20-40min，1500-3000r/min离心10-30min，得到上清液，即为酵母培养物原液；(2)将酵母培养物原液梯度稀释1-10倍，即为酵母培养物稀释液。本专利技术还公开了所述酿酒酵母5-1、酿酒酵母培养物、酿酒酵母培养物稀释液在制备饲料添加剂中的应用。本专利技术的有益效果(1)本专利技术公开的酿酒酵母5-1，菌体生长快、酶系丰富，其发酵代谢产物中富含小肽、氨基酸、维生素、有机酸和酵母细胞壁多糖，其含量远远高于已报道的同种菌株，能够有效地提高动物的生长性能，显著地改善动物肠道的微生物菌群，在饲料添加剂领域具有较好的应用前景。(2)本专利技术公开的酿酒酵母5-1，其代谢产物对于病原细菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和肠炎沙门氏菌)具有极强的抑制作用，因其特殊的抑菌作用，作为饲料添加剂添加到饲料中饲喂动物可有效地降低动物发病率，对养殖业的发展具有十分重要的意义。(3)本专利技术通过两级低温干燥，有效地保存酵母活菌数量和产品中富含的生物活性物质，同时有效地避免了饲料原料中营养成分的流失。(4)本专利技术有效利用酿酒的副产物酒糟，成本低廉，同时减少了环境污染。(5)本专利技术利用酿酒酵母充分发酵底料，不易被动物利用的营养成分被酿酒酵母充分吸收转化，转化为酵母菌细胞成分，增加了饲料营养价值。保藏信息本专利技术的酿酒酵母5-1，分类命名为酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)5-1，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏地址为：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏编号为GDMCCNo:60243，保藏日期为2017年9月13日。说明书附图图1为酿酒酵母5-1的18SrDNA系统发育进化树；图2为酿酒酵母5-1培养物稀释液对大肠杆菌的抑菌作用；图3为酿酒酵母5-1培养物稀释液对金黄色葡萄菌的抑菌作用；图4为酿酒酵母5-1培养物稀释液对肠炎沙门氏菌的抑菌作用。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术作进一步的说明，下述实施例中的试验方法如无特殊说明，均为常规方法，所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂市场购买得到。实施例1：酿酒酵母5-1的分离、筛选、鉴定及保存1、目标菌株的获得采集山东烟台市某苹果园地表土壤样品，称取10g样品，收集于150mL灭过菌三角瓶内，加入90mL无菌生理盐水，加入无菌玻璃珠30个，振荡培养3～5h后取1mL土壤悬浮液加至富集培养基(富集培养基：葡萄糖50g/L，(NH4)2SO42g/L，KH2PO42.5g/L，MgSO4·7H2O1g/L，FeSO4·7H2O0.1g/L，酵母膏0.5g/L，上述材料灭菌后加亚硫酸钠至30mg/L。)中，28℃恒温培养2d～3d，得到增殖培养液，将增殖培养液梯度稀释后吸取0.1mL加入到酵母浸出粉胨葡萄糖培养基中，28℃恒温培养2d～3d，待长出菌落后，选择具有典型酵母菌菌落特征的单菌落划线分离2～3次。经镜检为纯种，酵母浸出粉胨葡萄糖培养基培养后4℃保存，待用。2、菌株形态学特征鉴定取纯化菌株(命名为5-1)的单菌落，转接到酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂平板上，于28℃恒温培养箱中培养3d。菌落特征表现为中间凸起，表面光滑，不透明；细胞一端略小，近卵圆形或柠檬形，两端或多端出芽生殖。3、该株菌生理生化特征：对酵母菌进行生理生化试验。结果显示，美蓝染色为阳性；硝酸盐还原阴性；耐有机本文档来自技高网...

【技术保护点】
一株酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)5‑1，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No:60243。

【技术特征摘要】
1.一株酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)5-1，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCCNo:60243。2.一种酿酒酵母发酵液，其特征在于：由权利要求1所述的酿酒酵母5-1液体发酵得到。3.如权利要求2所述的酿酒酵母发酵液的制备方法，其特征在于包括如下步骤：(1)取酿酒酵母5-1，在酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基上用平板划线法划线，28-30℃培养24-48h，得到该菌株的单克隆；(2)挑取单克隆接种于酵母浸出粉胨葡萄糖液体培养基中，24-30℃培养12-24h得到种子液；(3)将种子液接种于酿酒酵母液体发酵培养基中，按体积算，接种量为0.5-5％，28-30℃培养15-36h。4.一种酿酒酵母培养物，其特征在于：将权利要求1所述的酿酒酵母5-1液体发酵后得到酿酒酵母发酵液，再将酿酒酵母发酵液接种到固体发酵底料中固体发酵，最后烘干粉碎得到。5.如权利要求4所述的酿酒酵母培养物的制备方法，其特征在于：所述固体发酵方法为：将酿酒酵母发酵液按每克干物质含酵母菌10-20亿个的接种量接种到固体发酵底料，于30-40℃的条件下密闭发酵24...

【专利技术属性】
技术研发人员：李莉玲，
申请(专利权)人：深圳市善成生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44