一种构建RIP3基因敲除小鼠的碱基序列、载体、方法及应用技术

本发明专利技术公开一种构建RIP3基因敲除小鼠的碱基序列、载体、方法及应用，通过CRISPR/Cas9系统靶向修饰RIP3基因的第3个外显子，使其发生序列缺失和移码突变，获得RIP3基因敲除小鼠模型，RIP3基因敲除小鼠模型可用于RIP3基因在结肠癌的发生、发展中的研究。

A sequence, vector, method and application of constructing RIP3 knockout mice

The invention discloses a base sequence, carrier, method and application of constructing RIP3 gene knockout mice. By targeting third exons of the RIP3 gene by targeting the CRISPR/Cas9 system, the CRISPR/Cas9 gene knockout mouse model can occur, and the RIP3 knockout mouse model is obtained. The RIP3 gene knockout mouse model can be used for the colon cancer in the colon cancer. The study of occurrence and development.

【技术实现步骤摘要】
一种构建RIP3基因敲除小鼠的碱基序列、载体、方法及应用
本专利技术涉及RIP3基因敲除小鼠模型的构建方法及应用，具体的为一种构建RIP3基因敲除小鼠的碱基序列、载体、方法及应用。
技术介绍
RIP3全称为受体相互作用丝氨酸-苏氨酸激酶3，共518个氨基酸，分子量为56.8kDa。在整个RIP3蛋白的518个氨基酸中，有两个功能结构域。N-末端包含一个RIPs家族都有的激酶结构域(21-287)，根据保守序列推断激酶结构域的活性中心为K50和D142。人源RIP3的激酶活性位点是Lys50，该位点对RIP3的激酶活性与ATP结合非常重要，如果该位点发生突变，其激酶活性会丧失。近年来，研究发现，RIP3参与肿瘤坏死因子TNF-α诱导的细胞程序性坏死，它是TNF-α的细胞凋亡与坏死不同死亡路径的关键转换分子。而由RIP3引发的下游信号通路与能量代谢相关的细胞程序性坏死，可能是机体在凋亡抑制下杀死病毒感染细胞、肿瘤细胞等异常细胞的重要保护机制。而且，已有研究发现，RIP3基因的变异体及其SNPs位点在非霍奇金淋巴瘤的发生发展中发挥重要作用。因此，对RIP3基因在肿瘤发生发展过程中的功能研究本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种构建RIP3基因敲除小鼠的碱基序列，其特征在于，该碱基序列为CAAGCCCTCTAACATTCTGC。

【技术特征摘要】
1.一种构建RIP3基因敲除小鼠的碱基序列，其特征在于，该碱基序列为CAAGCCCTCTAACATTCTGC。2.一种构建RIP3基因敲除小鼠的载体，其特征在于，该载体为连接有CAAGCCCTCTAACATTCTGC碱基序列的gRNA/Cas9表达载体。3.如权利要求2所述的构建RIP3基因敲除小鼠的载体，其特征在于，该载体为在gRNA/Cas9表达载体U6启动子下游插入CAAGCCCTCTAACATTCTGC碱基序列的gRNA/Cas9表达载体。4.如权利要求2所述的构建RIP3基因敲除小鼠的载体，其特征在于，针对小鼠RIP3基因第3外显子设计gRNA序列，将具有特异性结合功能的gRNA连接到gRNA/Cas9表达载体U6启动子下游，具有特异性结合功能的gRNA序列即为CAAGCCCTCTAACATTCTGC碱基序列。5.一种构建RIP3基因敲除小鼠的方法，其特征在于，该方法包括将权利要求1中的碱基序列或权利要求2、3或4中的载体用于构建RIP3基因敲除小鼠。6.如权利要求5所述的构建RIP3基因敲除小鼠的方法，其特征在于，该方法包括：针对小鼠RIP3基因第3外显子设计gRNA序列，将具有特异性结合功能的gRNA连接到gRNA/Cas9表达载体U6启动子下游得到连接有CAAGCCCTCTAACATTCTGC碱基序列的gRNA/Cas9表达载体，然后将连接有CAAGCCCTCTAACATTCTGC碱基序列的gRNA/Cas9表达载体注射到小鼠受精卵中产生RIP3基因敲除小鼠。7.如权利要求6所述的构建RIP3基因敲除小鼠的方法，其特征在于，产生RIP3基因敲除小鼠包括：...

【专利技术属性】
技术研发人员：唐娟，王建超，陈志南，
申请(专利权)人：中国人民解放军第四军医大学，
类型：发明
国别省市：陕西,61