一种乙型肝炎病毒核酸定量诊断试剂盒制造技术

本实用新型专利技术公开了一种乙型肝炎病毒核酸定量诊断试剂盒，包括核酸提取试剂盒和核酸扩增试剂盒，所述核酸提取试剂盒包括注有表面活性剂的第一灭菌试管体；注有调节pH的缓冲液的第二灭菌试管体；注有溶菌酶或蛋白酶的第三灭菌试管体；注有酚、氯仿和异戊醇混合液的第四灭菌试管体；注有超顺磁性氧化硅纳米磁珠液的第四灭菌试管体；注有去盐漂洗液的第五灭菌试管体；所述第一灭菌试管体至第五灭菌试管体均安装于管体摆放架；所述管体摆放架固定于内恒温盒体；本实用新型专利技术的乙型肝炎病毒核酸定量诊断试剂盒，步骤简单，各灭菌试管体之间不会交叉感染，另外，其能够很好地提取核酸；当需要外带时，直接将半导体温控器装入即可，使用简单方便。

A kit for quantitative detection of hepatitis B virus nucleic acid

The utility model discloses a quantitative diagnostic kit for hepatitis B virus nucleic acid, including a nucleic acid extraction kit and a nucleic acid amplification kit. The nucleic acid extraction kit includes a first sterilizing test tube with a surfactant, second sterilized test tube bodies with a buffer to regulate pH, and a part of the lysozyme or protease. Three sterilization test tube body; fourth sterilized test tube body with phenol, chloroform and isoamyl alcohol mixture; fourth sterilized test tube with superparamagnetic silica nanomagnetic bead liquid; fifth sterilized test tube with desalination rinse; the first sterilized test tube body to fifth sterilizing test tube body is installed on the tube placement frame; the tube body is used. The device is fixed to the inner constant temperature box body, and the utility model has a simple procedure for the diagnosis of hepatitis B virus nucleic acid, which can not cross infection among the sterilizing test tube bodies. In addition, it can extract nucleic acid well. When the outer band is needed, the semiconductor temperature controller can be directly installed and easy to use.

【技术实现步骤摘要】
一种乙型肝炎病毒核酸定量诊断试剂盒
本技术涉及一种检测试剂盒，具体涉及一种乙型肝炎病毒核酸定量诊断试剂盒，属于检测试剂盒

技术介绍
乙型肝炎仍是全球最严重的公共卫生问题之一，全球前10位疾病的死因，乙肝占第七位。据世界卫生组织的资料表明,全世界约30%的人口,即20亿人有感染乙型肝炎病毒的血清学证据,其中3.5亿人为慢性感染,每年至少有100万人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝硬化和肝细胞癌；而中国是世界公认的乙型肝炎大国，我国的乙肝病毒携带者达一亿二千万人，慢性乙肝肝炎患者有二千万，每年因此死亡的人数近50万；对于乙肝病毒的预防和诊疗是国家传染病控制的头等大事；目前，国内已有多种基于荧光定量PCR技术的乙肝定量检测试剂盒应用于临床检测中，这些试剂盒所提供的乙肝核酸提取方法主要是糖元沉淀法和离心柱法；该类试剂盒具有一定的优点，但是，存在很多不足之处；如糖元沉淀法虽然操作比较简单，但是无法有效去除复杂样本(如高血脂、高胆红素，溶血等样本)中的PCR扩增抑制物，容易导致出现检测假阴性，导致样本的漏检；离心柱法虽然无需高速离心，但是需频繁更换离心管，用时长，操作繁琐，容易导致核酸“气溶胶”污染；为此，中国专利申请号：201310689663.4，公开了一种应用于生物医学临床诊断领域中的乙型肝炎病毒（HBV）核酸定量检测试剂盒，试剂盒包括磁珠法核酸提取试剂盒和HBV核酸扩增试剂盒，其中磁珠法核酸提取试剂盒包括裂解结合液、漂洗液、洗脱液、磁珠液；HBV核酸扩增试剂盒包括HBV-PCR反应液、酶混合液、HBV-内标、HBV定量参考品1-4、阴性质控品、临界阳性质控品、强阳性质控品；该专利技术操作简便快速、成本低廉、检测灵敏度高、重复性好、引物和探针保守性高、特异性强、覆盖乙型肝炎病毒不同的亚型或变种、有利于提高乙肝检测的准确性和特异性、引入高效的内标系统、解决靶基因和内标同时扩增而导致的相互抑制和干扰等问题、能够高效的监控整个PCR扩增整个过程、避免出现假阴性结果；但其对于乙型肝炎病毒核酸前期处理效果一般，容易造成核酸获取量不够准确。
技术实现思路
为解决上述问题，本技术提出了一种乙型肝炎病毒核酸定量诊断试剂盒，步骤简单，各灭菌试管体之间不会交叉感染，另外，其能够很好地提取核酸；当需要外带时，直接将半导体温控器装入即可，使用简单方便。本技术的乙型肝炎病毒核酸定量诊断试剂盒，包括核酸提取试剂盒和核酸扩增试剂盒，所述核酸提取试剂盒包括注有表面活性剂的第一灭菌试管体；注有调节pH的缓冲液的第二灭菌试管体；注有溶菌酶或蛋白酶的第三灭菌试管体；注有超顺磁性氧化硅纳米磁珠液的第四灭菌试管体；注有去盐漂洗液的第五灭菌试管体；所述第一灭菌试管体至第五灭菌试管体均安装于管体摆放架；所述管体摆放架固定于内恒温盒体；所述内恒温盒体外侧底部设置有向内凹入的控温凹槽；所述控温凹槽内侧活动设置有半导体温控器；所述内恒温盒体外部设置有外包装箱体；所述内恒温盒体顶面一体制成有密封盖板，所述密封盖板上设置有试管体嵌出的通槽；通过第二灭菌试管体调节pH的缓冲液；调整pH环境；并通过第一灭菌试管体内侧的表面活性剂；在一定的pH环境下,表面活性剂可使病毒细胞裂解、蛋白质和多糖沉淀,缓冲液中的一些金属离子螯合剂(EDTA等)可螯合对核酸酶活性所必须的金属离子Mg2+、Ca2+,从而抑制核酸酶的活性,保护核酸不被降解；并通过第三灭菌试管体内侧的溶菌酶或蛋白酶促进细胞破裂；同时，在核酸提取过程中,通过加入适当的酶使不需要的物质降解,以利于核酸的分离与纯化；如在裂解液中加入蛋白酶可以降解蛋白质,灭活核酸酶；最后通过第四灭菌试管体内侧的超顺磁性氧化硅纳米磁珠液直接进行纯化，完成纯化后，通过第五灭菌试管体内侧的去盐漂洗液进行漂洗；完成漂洗后即可得到磁珠核酸混合物。作为优选的实施方案，所述内恒温盒体内侧底部设置有管座。作为优选的实施方案，所述管座底面为密封状。作为优选的实施方案，所述外包装箱体为底部中空的搭口纸箱。作为优选的实施方案，所述半导体温控器其电源线由内恒温盒体和外包装箱体之间的夹层引入。作为优选的实施方案，所述半导体温控器其电源线输入端电连接蓄电池或适配器。本技术与现有技术相比较，本技术的乙型肝炎病毒核酸定量诊断试剂盒，步骤简单，各灭菌试管体之间不会交叉感染，另外，其能够很好地提取核酸；当需要外带时，直接将半导体温控器装入即可，使用简单方便。附图说明图1为本技术的整体结构示意图。具体实施方式实施例1：如图1所示的乙型肝炎病毒核酸定量诊断试剂盒，包括核酸提取试剂盒和核酸扩增试剂盒1，所述核酸提取试剂盒包括注有表面活性剂的第一灭菌试管体2；注有调节pH的缓冲液的第二灭菌试管体3；注有溶菌酶或蛋白酶的第三灭菌试管体4；注有超顺磁性氧化硅纳米磁珠液的第四灭菌试管体5；注有去盐漂洗液的第五灭菌试管体6；所述第一灭菌试管体2至第五灭菌试管体6均安装于管体摆放架7；所述管体摆放架7固定于内恒温盒体8；所述内恒温盒体8外侧底部设置有向内凹入的控温凹槽9；所述控温凹槽9内侧活动设置有半导体温控器10；所述内恒温盒体10外部设置有外包装箱体11；所述内恒温盒体10顶面一体制成有密封盖板12，所述密封盖板12上设置有试管体嵌出的通槽13；通过第二灭菌试管体调节pH的缓冲液；调整pH环境；并通过第一灭菌试管体内侧的表面活性剂；在一定的pH环境下,表面活性剂可使病毒细胞裂解、蛋白质和多糖沉淀,缓冲液中的一些金属离子螯合剂(EDTA等)可螯合对核酸酶活性所必须的金属离子Mg2+、Ca2+,从而抑制核酸酶的活性,保护核酸不被降解；并通过第三灭菌试管体内侧的溶菌酶或蛋白酶促进细胞破裂；同时，在核酸提取过程中,通过加入适当的酶使不需要的物质降解,以利于核酸的分离与纯化；如在裂解液中加入蛋白酶可以降解蛋白质,灭活核酸酶；最后通过第四灭菌试管体内侧的超顺磁性氧化硅纳米磁珠液直接进行纯化，完成纯化后，通过第五灭菌试管体内侧的去盐漂洗液进行漂洗；完成漂洗后即可得到磁珠核酸混合物。再一实施例中，所述内恒温盒体8内侧底部设置有管座14。再一实施例中，所述管座14底面为密封状。再一实施例中，所述外包装箱体11为底部中空的搭口纸箱。再一实施例中，所述半导体温控器10其电源线由内恒温盒体和外包装箱体之间的夹层引入。再一实施例中，所述半导体温控器10其电源线输入端电连接蓄电池或适配器。上述实施例，仅是本技术的较佳实施方式，故凡依本技术专利申请范围所述的构造、特征及原理所做的等效变化或修饰，均包括于本技术专利申请范围内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种乙型肝炎病毒核酸定量诊断试剂盒，包括核酸提取试剂盒和核酸扩增试剂盒，其特征在于：所述核酸提取试剂盒包括注有表面活性剂的第一灭菌试管体；注有调节pH的缓冲液的第二灭菌试管体；注有溶菌酶或蛋白酶的第三灭菌试管体；注有酚、氯仿和异戊醇混合液的第四灭菌试管体；注有超顺磁性氧化硅纳米磁珠液的第四灭菌试管体；注有去盐漂洗液的第五灭菌试管体；所述第一灭菌试管体至第五灭菌试管体均安装于管体摆放架；所述管体摆放架固定于内恒温盒体；所述内恒温盒体外侧底部设置有向内凹入的控温凹槽；所述控温凹槽内侧活动设置有半导体温控器；所述内恒温盒体外部设置有外包装箱体；所述内恒温盒体顶面一体制成有密封盖板，所述密封盖板上设置有试管体嵌出的通槽。

【技术特征摘要】
1.一种乙型肝炎病毒核酸定量诊断试剂盒，包括核酸提取试剂盒和核酸扩增试剂盒，其特征在于：所述核酸提取试剂盒包括注有表面活性剂的第一灭菌试管体；注有调节pH的缓冲液的第二灭菌试管体；注有溶菌酶或蛋白酶的第三灭菌试管体；注有酚、氯仿和异戊醇混合液的第四灭菌试管体；注有超顺磁性氧化硅纳米磁珠液的第四灭菌试管体；注有去盐漂洗液的第五灭菌试管体；所述第一灭菌试管体至第五灭菌试管体均安装于管体摆放架；所述管体摆放架固定于内恒温盒体；所述内恒温盒体外侧底部设置有向内凹入的控温凹槽；所述控温凹槽内侧活动设置有半导体温控器；所述内恒温盒体外部设置有外包装箱体；所述内恒温盒体顶面一体制成有密封盖板，...

【专利技术属性】
技术研发人员：夏建平，
申请(专利权)人：山东博思源生物技术有限公司，
类型：新型
国别省市：山东,37