奶牛胚胎性别鉴定的方法和试剂盒技术

本发明专利技术为一种利用实时荧光ＰＣＲ进行奶牛胚胎性别鉴定的方法和试剂盒，它采用一对奶牛特异性引物扩增性别决定基因（ｓｒｙ）上的１８２ｂｐ区域，并用特异性ＴａｑＭａｎ水解探针法实时检测。试剂盒组分包括核酸浓缩液、核酸提取液、ＰＣＲ反应缓冲液、Ｔａｑ酶、阴性对照、阳性对照。试剂盒的使用包括样本处理和扩增检测两个步骤，本发明专利技术通过检测模板中ｓｒｙ基因片段的存在来判断样品个体的性别，试剂盒操作简便快速（１小时以内），并可避免因自身扩增产物、人以及其它动物来源核酸污染产生的假阳性，准确率达到１００％，可广泛应用于怀孕奶牛胎牛性别鉴定、奶牛胚胎移植性别鉴定以及科研奶牛ｓｒｙ基因检测中。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种实时荧光ＰＣＲ扩增检测奶牛性别决定基因（ｓｒｙ）上１８２ｂｐ区域的方法，碱基序列如下：　上游引物为５’ＡＣｇ　ＣＣＴ　ＴＣＡ　ＴＴｇ　ＴｇＴ　ｇｇＴ　３’　下游引物为５’Ｃｇｇ　ｇＴＡ　ＴＴＴ　ｇＴＣ　Ｔ Ｃｇ　ｇＴｇ　ＴＡ　３’　探针为５’ＦＡＭ－ＣＴＡ　ｇＴＡ　ｇＴＣ　ＴＣＴ　ｇＴｇ　ＣＣＴ　ＣＣＴ　ＣＡＡ－ＴＡＭＲＡ　３’（５’标记ＦＡＭ，３’标记ＴＡＭＲＡ）。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：吴大治，夏懿，
申请(专利权)人：上海复星医药集团股份有限公司，上海复星医学科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]