大麦SSR引物组及利用该引物组构建啤酒大麦品种指纹图谱的方法技术

本发明专利技术公开了大麦SSR引物组及利用该引物组构建啤酒大麦品种指纹图谱的方法。本发明专利技术大麦SSR引物组包括9对大麦SSR引物HVHVA1、HVM70、HVMLOH1A、GBM1008、HVCMA、WMS6、HVPLASC1B、HVM65和HVM6，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO:1～18所示。本发明专利技术通过大麦SSR引物组和啤酒大麦种子提取得到的DNA进行SSR‑PCR扩增反应，结合毛细管凝胶电泳检测，可构建得到啤酒大麦品种指纹图谱。本发明专利技术通过构建啤酒大麦品种指纹图谱，根据9对大麦SSR引物对不同大麦品种所得到的特异性位点之间的差异，可将不同品种的啤酒大麦全部分开，具有检测速度快、分离效率和灵敏度高、重复性好，多态性较高的优点，可满足口岸快速通关需要，具有良好的应用前景。

SSR primer group of barley and the method of using the primer group to construct the fingerprints of barley Barley Varieties

The invention discloses the SSR primer group of barley and the method of using the primer group to construct the fingerprints of the brewery barley variety. The invention of barley SSR primer set consists of 9 pairs of SSR primers HVHVA1, HVM70, barley HVMLOH1A, GBM1008, HVCMA, WMS6, HVPLASC1B, HVM65 and HVM6, the nucleotide sequence of ID SEQ respectively as shown in NO:1 ~ 18. The present invention by SSR primer set and barley beer barley seeds extracted DNA SSR PCR amplification reaction by capillary gel electrophoresis, can be constructed by the fingerprint of beer barley varieties. The present invention by constructing a variety of fingerprint barley beer, based on the difference between the specific sites of 9 barley SSR primers obtained in different barley cultivars, the different varieties of beer barley are separated, with high detection speed, separation efficiency and high sensitivity, good repeatability, has the advantages of high polymorphism, can meet the needs of the port customs clearance, has a good application prospect.

【技术实现步骤摘要】
大麦SSR引物组及利用该引物组构建啤酒大麦品种指纹图谱的方法
本专利技术属生物
，更具体地说，本专利技术涉及利用SSR技术并结合毛细管电泳技术构建主要进口啤酒大麦品种的SSR指纹图谱的方法。
技术介绍
啤酒大麦是啤酒生产的主要原料，大麦的质量直接影响啤酒的品质和口感；而大麦的质量受品种、产区、气候条件等因素的影响，大麦不同品种之间的淀粉、蛋白质、β-葡聚糖以及酶系活性等均存在一定差异，这些差异直接影响麦芽制造和啤酒酿造工艺。因此，大麦品种的真实性及纯度是啤酒酿造的关键。目前，中国已成为世界上最大的啤酒生产国(刘慧，薛凤蕊.中国大麦贸易现状及发展趋势[J].农业贸易展望，2015,8:66-69.)。随着我国啤酒产量的不断增长，国产大麦产量及质量难以满足市场需求，啤酒大麦的进口量迅猛增长，位列进口谷物前3位，2013-2014年度进口量达到历史最高的489.1万t(李先德，孙志胜，张京.2014年世界和中国大麦与贸易形势及2015年展望[J].农业生产展望，2015,2:43-47.)。近年来，我国啤酒大麦主要进口国主要为澳大利亚、加拿大和法国；在国际贸易中，大麦品种是优质优价的本文档来自技高网...

【技术保护点】
大麦SSR引物组，其特征在于，包括9对大麦SSR引物HVHVA1、HVM70、HVMLOH1A、GBM1008、HVCMA、WMS6、HVPLASC1B、HVM65和HVM6，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO:1～18所示。

【技术特征摘要】
1.大麦SSR引物组，其特征在于，包括9对大麦SSR引物HVHVA1、HVM70、HVMLOH1A、GBM1008、HVCMA、WMS6、HVPLASC1B、HVM65和HVM6，其核苷酸序列分别如SEQIDNO:1～18所示。2.权利要求1所述大麦SSR引物组在构建啤酒大麦品种指纹图谱中的应用。3.一种啤酒大麦品种指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、从啤酒大麦种子中提取DNA；S2、将大麦SSR引物组和S1提取得到的DNA分别进行SSR-PCR扩增反应，再将扩增得到的PCR产物进行毛细管凝胶电泳检测；S3、将所述毛细管凝胶电泳检测结果转化成啤酒大麦品种指纹图谱；所述大麦SSR引物组，包括9对大麦SSR引物HVHVA1、HVM70、HVMLOH1A、GBM1008、HVCMA、WMS6、HVPLASC1B、HVM65和HVM6，各引物的核苷酸序列分别如SEQIDNO:1～18所示。4.根据权利要求3所述的啤酒大麦品种指纹图谱的构建方法，其特征在于，S1中，所述啤酒大麦种子分别为：Scarlett、Bambina、Quench、Irina、Sebastian、Esterel、Cervoise、Prestige、Etincel、Metcalfe、Copeland、Hindmarsh、Baudin、Scope、Buloke、Traveler、Bass、Westminster、LaTrobeTrial、Vlamingh、Gairdner。5.根据权利要求3所述的啤酒大麦品种指纹图谱的构建方法，其特征在于，S2中，所述SSR-PCR扩增反应采用20μl反应体系，包括16μlmix、2μl引物、2μlDNA模板和6μl超纯水；所述引物是将所述大麦SSR引物组中的一组按照1:9的体积比加入超纯水稀释并正反混合得到；所述SSR-PCR扩增反应的程序为：4℃预变性5min；94℃变性30s，退火30s，72℃延伸45s，35个循环；72℃延伸7min，4℃保存；9对大麦SSR引物的退火温度分别为：HVHVA...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈萍，赵明，李盼畔，刘明航，高舟，陆永跃，何洪洲，赵淑嘉，吴小瑶，刘姣姣，
申请(专利权)人：中华人民共和国南沙出入境检验检疫局，
类型：发明
国别省市：广东,44