一种快速有序的基因表达差异显示法制造技术

本发明专利技术更快了一种经济、高效、快速的基因表达水平有序差异显示法。它主要用于系统地比较基因表达整体状况的差异，寻找差异基因。首先，双链ｃＤＮＡ的合成使用随机引物和配基标记的ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）引物；其次，具有配体涂层的薄壁管用于吸附标有配基的ｃＤＮＡ３′端酶切片段。吸附的双链ｃＤＮＡ酶切、洗脱后与接头连接。再经第一轮ＰＣＲ扩增和第二轮选择性ＰＣＲ扩增，从而获得清晰的３′ＥＳＴｓ离散图谱。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种显示基因表达水平有序差异的方法，其特征在于，它包括步骤：（ａ）对ｍＲＮＡ，使用随机引物和配基标记的ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）引物，合成双链ｃＤＮＡ；（ｂ）用具有配体的涂层的反应容器吸附标有生物素的ｃＤＮＡ扩增产物，其中该配体与步骤（ａ） 中配基特异性结合；（ｃ）用限制性内切酶消化ｃＤＮＡ扩增产物，产生吸附于反应容器的３′端酶切片段和未吸附的酶切片段；（ｄ）洗脱除去未吸附的酶切片段；（ｅ）将吸附于容器的３′端酶切片段与接头连接，形成连接产物，所述接头由长链和短链构 成；（ｆ）对连接产物进行第一轮ＰＣＲ扩增，形成第一轮ＰＣＲ扩增产物；（ｇ）对第一轮ＰＣＲ扩增产物进行第二轮ＰＣＲ扩增，形成第二轮ＰＣＲ扩增产物；（ｈ）对第二轮ＰＣＲ扩增产物进行凝胶电泳分离。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李荣秀，康建胜，王志平，
申请(专利权)人：中国科学院上海生物工程研究中心，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]