在生产胰酶制剂过程中减少或灭活病毒和微生物内容物的方法技术

公开了一种在胰酶制剂API制造中减少或灭活病毒和微生物内容物的方法。该方法包括用过乙酸处理动物衍生的组织，以在加工之前减少病毒活性和细菌载量。具体地说，该方法包括从经处理的腺体组织中提取胰酶制剂API之前用过乙酸处理猪胰腺。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】在生产胰酶制剂过程中减少或灭活病毒和微生物内容物的方法
本专利技术涉及胰酶制剂和在生产胰酶制剂过程中减少病毒感染性或灭活病毒和微生物内容物的方法。
技术介绍
胰酶制剂由在兽医检查后发现适合人类消费的动物的猪胰腺组织生产。胰酶制剂是消化酶的混合物，主要是从猪胰中提取的淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶。胰酶制剂由于其重要的治疗特性和高度的安全性，长期以来被用作酶替代疗法的药物制剂。多种胰酶制剂可作为消化酶补充剂商购获得，以帮助消化并增强营养物质的吸收。临床上胰酶替代疗法是治疗胰腺外分泌功能不全的主要手段，所述胰腺外分泌功能不全与囊性纤维化、慢性胰腺炎、胃肠道旁路手术术后(post-gastrointestinalbypasssurgery)、胰腺切除术术后等有关。得自任何动物或人源材料的所有生物制品的共同特征是病毒污染的风险。生物污染可能来自原料或在生产过程中引入的外来物质。病毒是仅在其他生物体的活细胞内复制的小的传染原。病毒由被蛋白质壳和脂质层(某些情况下)包围的核酸(RNA或DNA)组成。仅产生蛋白质壳的病毒通常称为无包膜病毒，壳中含有蛋白质和脂质成分的病毒通常称为包膜病毒。它们的尺寸范围从约15nm到约450nm，并且不能用光学显微镜看到。已经通过电子显微镜、NMR波谱和X射线晶体学研究了病毒的形状和结构。病毒可感染生命形式的所有类型，从动物和植物到细菌和古细菌。由于病毒不能独立复制，它们依赖于宿主。因此，它们几乎存在于世界上所有的生物体中。已知的病毒很少对人有致病性，因为它们具有很高的宿主特异性。几个国家主管部门已经敦促胰酶制剂生产商改善生产工艺的病毒灭活/去除能力；然而，由于大部分可去除或灭活病毒的条件也会导致失活产物(被破坏的酶活性)，所以改善的尝试取得有限的成功。规定和安全问题要求生物制药如胰酶制剂活性药物成分(API)中的病毒清除(病毒去除或灭活)。因此，生产来自生物组织的药物产品的公司正面临来自监管机构的额外压力，以通过将所有污染物降至可能的最低水平来提高其产品的安全水平。一些小的无包膜DNA病毒如猪细小病毒(PPV)和猪圆环病毒(PCV)很难灭活。在用于生产商业产品的条件下，PPV和PCV滴定可降低，但病毒可能不完全灭活。然而，尽管在人类中广泛使用这些猪源性商业产品，但因为暴露于商业产品的无包膜猪病毒如PPV和PCV的人类感染尚未见报道。例如，在猪源性商业产品如胃蛋白酶和因子VIII浓缩物中经常检测到PCVDNA；然而，被污染的产品在静脉施用给猪时不能引起任何感染[Fenaux等人(2004),"AChimericPorcineCircovirus(PCV)withtheImmunogenicCapsidGeneofthePathogenicPCVType2(PCV2)ClonedintotheGenomicBackboneoftheNonpathogenicPCV1InducesProtectiveImmunityagainstPCV2InfectioninPigs".J.Virology78:6297-6303]。尽管来自98个Hyate:C人类受者的血清样品均测试为PPV抗体阴性，但在22批Hyate:C猪因子VIII浓缩物中有21批检测到PPVDNA(Soucie等人"InvestigationofporcineparvovirusamongpersonswithhemophiliareceivingHyate:CporcinefactorVIIIconcentrate".Tranfusion(2000)40:708-711.)。Giangrande等人("ViralpharmacovigilancestudyofhaemophiliacsreceivingporcinefactorVIII".Haemophilia(2002)8:798-801.)也测试了来自81个猪因子III的过去受者和125个其他志愿者的血清样品，以获得针对一系列猪病毒包括PPV的抗体证据，结果是阴性的。因此，已发表的报道不支持由可能仍存在于商业产品中的PPV、PCV或其他无包膜猪病毒引起人感染风险，如果风险存在的话，是非常小的。本专利技术涉及用于在生产胰酶制剂的过程中减少或灭活病毒和微生物内容物的方法，而不损害通过酶活性或酶活性比例测量的纯度、组成或效价。迄今为止，还没有研发出可靠的方法去除或灭活胰酶制剂样品中的所有病毒污染物。这是由于胰酶制剂中的活性酶与许多已知的失活条件(包括加热、低pH、氧化和电离辐射)不相容。尽管如此，已经公布了几种灭活或减少病毒和微生物的方法。Tijsensen等人(US2014/0017223A1)公开了制备胰酶制剂(PEP)的方法，包括使β方丙内酯(BPL)与含有一种或多种胰酶的制剂反应足够的时间以降低制剂中的病毒感染性。等人(美国专利US2011/0268844A1)公开了用高压和/或筛选过滤处理胰酶制剂，然后在15℃用4000、5000或6000巴的高压处理5分钟。根据的说法，这适用于所有病毒形式，如DNA和RNA病毒，有包膜和无包膜病毒以及细菌和真菌，并且包含至少50％的生物活性。他还进一步公开了使用高压处理灭活某些病毒是否成功的不可预测性。由于样品的压缩性不同，必须根据样品是液体还是固体来选择不同的方法条件。Kurfurst等人(US2009/0233344A1)公开了一种通过处理具有0.5重量％或更少残留水分的样品来减少样品的病毒和微生物污染的方法，将胰酶制剂在84℃的温度(优选80℃及以下)热处理48小时或30小时，其中所得的胰酶制剂的活性为至少50％的生物活性。所公开的胰酶制剂病毒感染性降低了大于1log10的log10折减系数(reductionfactor)。Mann(US2009/6749851)公开了用于灭菌消化酶制剂的方法，以降低活性生物污染物如病毒、细菌、酵母、霉菌和真菌的水平。包含消化酶的组合物的处理包含通过(a)降低温度、(b)还原溶剂、或(c)向组合物中加入稳定剂，然后照射组合物来稳定组合物。Becher等人(US2009/0130063A1)公开了一种从胰酶制剂样品中分离感染性病毒载量、通过使用离心和超离心来定量测定胰酶制剂样品中的病毒载量的方法。该方法仅限于适于离心的液体样品。Braeuniger等人(Int.J.Hyg.Environ.Health(2000)203:71-75)公开了热灭活牛细小病毒(BPV)的用途。已经证明BPV可以由暴露于热和残留水分而被失活。然而Braeuniger等人没有公开加热对酶活性和组成变化的任何影响。Lewis(US1971/3,956,483)公开了胰酶制剂加工和细菌减少的同时保持淀粉分解、蛋白水解和脂肪分解活性的方法。该方法包括将胰酶制剂加热至49-82℃之间的足够高的温度。然而，Lewis没有提供灭活或减少病毒数量的方法。特别的挑战是灭活或减少来自活性物质是酶混合物的生物提取物基质的病毒，而在该过程中不破坏或改变蛋白质的酶活性或比例。需要一种方法，其中含有固体的生物提取物中的病毒和细菌内容物被最大可能程度地降低或最小化，并与保持所需的药物活性成分的纯度、组成和效价一致。该方法必须同样适用于固体和悬本文档来自技高网...

【技术保护点】
具有降低的病毒感染性的胰酶制剂制备物，包括一种或多种胰酶制剂酶和PAA。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.05.19 US 62/163,7791.具有降低的病毒感染性的胰酶制剂制备物，包括一种或多种胰酶制剂酶和PAA。2.权利要求0的胰酶制剂制备物，进一步包括一个或多个猪胰腺。3.权利要求1的胰酶制剂制备物，其中所述胰酶制剂制备物具有的脑心肌炎病毒(EMC)的病毒感染性比未用PAA处理的胰酶制剂对照样品的病毒感染性低至少1log10。4.权利要求1的胰酶制剂制备物，其中所述胰酶制剂制备物具有的鼠细小病毒(MMV)的病毒感染性比未用PAA处理的胰酶制剂对照样品的病毒感染性低至少1log10。5.权利要求1的胰酶制剂制备物，其中所述胰酶制剂制备物具有的猪细小病毒(PPV)的病毒感染性比未用PAA处理的胰酶制剂对照样品的病毒感染性低至少1log10。6.权利要求1的胰酶制剂制备物，其中所述胰酶制剂制备物具有的无包膜病毒的病毒感染性比未用PAA处理的胰酶制剂对照样品的病毒感染性低至少1log10。7.权利要求1的胰酶制剂制备物，其中至少一种胰酶制剂酶衍生自动物来源。8.权利要求1的胰酶制剂制备物，其中所述一种或多种胰酶制剂酶选自脂肪酶、蛋白酶和淀粉酶。9.权利要求1的胰酶制剂制备物，其中所述制备物包括胰酶制剂API。10.一种衍生自胰腺并且具有降低的病毒感染性和减少的细菌计数的胰酶制剂API，所述胰酶制剂API包括：至少2.0USP单位脂肪酶；至少25USP单位蛋白酶；和至少25USP单位淀粉酶，其中胰腺用PAA预处理，并且其中所述胰酶制剂API具有的PPV、EMC和MMV的病毒感染性比未用PAA处理的...

【专利技术属性】
技术研发人员：Y·王，K·S·曼宁，D·尼尔森，R·鲁夫，C·克劳利，J·雷斯蒂沃，D·斯潘根贝格，K·安哈尔特，M·罗米奇，A·阿库拉，C·弗里茨，
申请(专利权)人：科学蛋白实验室有限责任公司，
类型：发明
国别省市：美国,US