一种检测多种维生素制剂中维生素A杂质的方法技术

本发明专利技术公开了一种检测多种维生素制剂中维生素A杂质的方法，所述方法包括如下步骤，色谱条件：色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇‑无水乙醇为流动相；检测波长：300～350nm；柱温：20～50℃；流速：0.5～2.0mL/min；进样量：10～200µl；运行时间：50～150分钟。样品溶液制备：取本品内容物溶于二氯甲烷，洗涤，取层溶液，稀释，离心，续滤液作为供试品溶液，另取供试品溶液稀释作为对照溶液。测定：将上述溶液分别注入液相色谱仪，记录色谱图测定。本发明专利技术的检测成本低，流动相安全，且专属性强、操作方便，可快速高效的检测出含维生素A的多种维生素制剂中维生素A的含量及杂质，有效控制了多种维生素制剂的质量。

A method for the detection of vitamin A impurities in multivitamin preparations

The invention discloses a method for determination of vitamin A in multivitamin preparations of impurities, and the method comprises the following steps, the chromatographic conditions: column: Eighteen alkyl silane bonded silica as filler; methanol to ethanol as mobile phase; the detection wavelength: 300 ~ 350nm; column temperature: 20~50 C; flow rate: 0.5 ~ 2.0mL/min; sample size: 10~200 L; run time: 50~150 minutes. Sample solution preparation: take the content of the product dissolved in dichloromethane, wash, take layer solution, dilute and centrifuge, continue filtrate as the test solution, and dilute the sample solution as a contrast solution. Determination: the above solution was injected into the liquid chromatograph, and the chromatogram was recorded. The invention has the advantages of low detection cost, safe mobile phase, strong specificity and convenient operation, and can quickly and efficiently detect vitamin A content and impurities in various vitamin preparations containing vitamin A, and effectively control the quality of various vitamin preparations.

【技术实现步骤摘要】
一种检测多种维生素制剂中维生素A杂质的方法
本专利技术涉及药物分析领域中一种检测多种维生素制剂中维生素A杂质的方法。
技术介绍
维生素A是脂溶性的醇类物质，是最早被发现的维生素，维生素A有多种分子形式，其化学名为视黄醇，它的主要生理功能有(1)维持正常视觉功能；(2)维护上皮组织细胞的健康和促进免疫球蛋白的合成；(3)维持骨骼正常生长发育；(4)促进生长与生殖；(5)抑制肿瘤生长；(6)营养增补剂。此外，维生素A还有助于对粉刺、脓包、疖疮，皮肤表面溃疡等症的治疗；有助于对肺气肿、甲状腺机能亢进症的治疗；有助于治疗脱发以及有助于祛除老年斑。因此，当人体缺乏维生素A时，眼部症状有：夜盲症、毕脱氏斑、结膜干燥；皮肤症状为：皮肤容易干燥，角化增生、脱屑。鉴于维生素A的众多功能，多种维生素制剂中维生素A的质量研究至关重要，维生素A包括维生素A棕榈酸酯和维生素A醋酸酯。由于维生素A棕榈酸酯化学性质稳定且不易分解，因此本专利技术制剂中选用维生素A棕榈酸酯作为原料。虽有文献报道维生素A棕榈酸酯杂质的测定方法，但目前尚未有文献及专利针对由多种维生素组成的复方制剂中维生素A杂质检测方法的报道，本方法在供试品溶液制备、实验操作等方面更加灵敏便捷，填补了多种维生素组成的复方制剂中维生素A杂质检测方法的空白，本方法专属性、重现性良好，能够快速有效的分离测定出多种维生素制剂中维生素A杂质，可有效控制多种维生素制剂的质量。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种操作更简捷、灵敏度更高、重现性好的多种维生素制剂中维生素A含量及杂质的检测方法。所述方法包括：将含维生素A的多种维生素制剂经过前处理配制成检测溶液，以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱，采用甲醇-无水乙醇流动相，记录HPLC图。优选的，所述检测溶液制备方法为：取本品内容物适量，加入二氯甲烷5～30ml溶解，加水洗涤1～5次，弃去水层，取二氯甲烷层溶液，加无水乙醇稀释至每毫升溶液中约含维生素A为1～100μg的溶液，离心，续滤液作为供试品溶液。另取供试品溶液，无水乙醇稀释100倍，作为对照溶液。优选的，所述供试品溶液制备中的萃取溶剂为二氯甲烷；对照品溶液制备中的稀释剂为无水乙醇。优选的，所述流动相为甲醇-无水乙醇的配比溶液。优选的，所述柱温为20～50℃；优选的，所述流动相的流速为0.5～2.0mL/min。优选的，所述色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶。优选的，所述检测波长为300～350nm。本专利技术的要点在于我们独特的样品试制方法并采用HPLC法高效快速测定多种维生素制剂中维生素A的含量及杂质。本方法专属性强，重现性好、灵敏度高，且本专利技术中流动相简单无毒，检测成本低、安全可靠，可广泛地应用于药物分析领域中，从而更好地确保含维生素A的多种维生素制剂的质量及有效性。附图说明图1：实施例1中多种维生素制剂中维生素A杂质测定的阴性样品图谱图2：实施例1中多种维生素制剂中维生素A杂质测定的对照品图谱图3：实施例1中多种维生素制剂中维生素A杂质测定的供试品图谱图4：实施例2中多种维生素制剂中维生素A杂质测定图谱图5：实施例3中多种维生素制剂中维生素A杂质测定图谱图6：实施例4中多种维生素制剂中维生素A杂质测定图谱具体实施方式下面将结合本专利技术实施例，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例11、色谱条件仪器：高效液相色谱仪；色谱柱：DiKMAC18柱(型号：Diamonsil，250×4.6mm，5μm)；流动相：甲醇-无水乙醇(52:48)；检测波长：324nm；柱温：20℃；流速：1.0ml/min；运行时间：约70分钟2、样品制备(1)流动相的制备精密量取甲醇520ml和无水乙醇480ml，混匀，即得1000ml配比为52:48的甲醇-无水乙醇流动相。(2)供试品溶液制备称取本品内容物适量(约相当于维生素5000单位)，精密称定，置分液漏斗中，精密加入二氯甲烷10ml溶解，加水洗涤2次，每次10ml，弃去水层，精密量取二氯甲烷层溶液2ml，置25ml量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，离心(每分钟3000转)10分钟，取上清液，滤过，取续滤液作为供试品溶液。(3)对照品溶液制备精密量取供试品溶液1ml，置100ml量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，作为对照溶液。(5)实验结果供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，扣除相对保留时间0.55之前的阴性峰(辅料峰与其他药物成分峰)及溶剂峰来进行计算。该方法能有效检出含维生素A的多种维生素制剂中维生素A含量。图谱见说明书附图的图1、2、3。实施例2仪器：高效液相色谱仪；色谱柱：DiKMAC18柱(型号：Diamonsil，250×4.6mm，5μm)；流动相：甲醇-无水乙醇(52:48)；检测波长：315nm；柱温：30℃；流速：1.5ml/min；运行时间：约70分钟溶液配制方法及测定方法照实施例1中“样品溶液配制”的方法进行，结果见图4。实施例3仪器：高效液相色谱仪；色谱柱：DiKMAC18柱(型号：Diamonsil，250×4.6mm，5μm)；流动相：甲醇-无水乙醇(50:50)；检测波长：330nm；柱温：25℃；流速：0.8ml/min；运行时间：约70分钟溶液配制方法及测定方法照实施例1中“样品溶液配制”的方法进行，结果见图5。实施例4仪器：高效液相色谱仪；色谱柱：DiKMAC18柱(型号：Diamonsil，250×4.6mm，5μm)；流动相：甲醇-无水乙醇(54:46)；检测波长：325nm；柱温：35℃；流速：1.2ml/min；运行时间：约70分钟溶液配制方法及测定方法照实施例1中“样品溶液配制”的方法进行，结果见图6。实施例5①原料溶液：取维生素A原料约10mg，用二氯甲烷溶解，无水乙醇稀释制成每1ml含0.02mg的溶液，摇匀，过滤，即得。②供试品溶液：取本品内容物约2.0g，按照“实施例1”项下的供试品溶液制备方法制备，即得。③阴性溶液：取维生素A阴性样品(不含维生素A的部分)约2g，同供试品溶液配制，即得。④辅料溶液：取辅料适量，同供试品溶液配制，即得。⑤对照溶液：精密量取1ml供试品溶液，置100ml容量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。分别精密量取上述供试品、相应的阴性样品溶液、对照溶液和空白辅料溶液各100μl，注入液相色谱仪，分析结果。表1样品专属性试验结果表2峰纯度试验结果结果表明：供试品在各破坏条件下均未产生其它新杂质，表明维生素A较稳定。在本色谱条件下，供试品中维生素A主峰与强制降解后产生杂质均能有效分离，色谱峰纯度高，未检测到不纯物质，可用于本品维生素A有关物质检查。由图可知，在该色谱条件下，空白辅料及阴性样品溶液对本品维生素A有关物质的测定均无干扰，只是在计算供试品有关物质时应扣除相对保留时间0.55之前的阴性峰(辅料峰与其他药物成分峰)及溶剂峰。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测多种维生素制剂中维生素A杂质的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：（1）色谱条件：以C18为色谱柱；以甲醇‑无水乙醇为流动相；检测波长：300～350nm；柱温：20～50℃；流速：0.5～2.0mL/min；进样量：10～200µl，运行时间50～150分钟；（2）样品溶液的配制：取本品内容物适量，加入二氯甲烷5～30ml溶解，加水洗涤1～5次，每次5～50ml，弃去水层，取二氯甲烷层溶液，加无水乙醇稀释至每毫升溶液中约含维生素A为1～100µg的溶液，离心，续滤液作为供试品溶液；另取供试品溶液，无水乙醇稀释100倍，作为对照溶液；（3）测定：将上述溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图并进行分析。

【技术特征摘要】
1.一种检测多种维生素制剂中维生素A杂质的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：（1）色谱条件：以C18为色谱柱；以甲醇-无水乙醇为流动相；检测波长：300～350nm；柱温：20～50℃；流速：0.5～2.0mL/min；进样量：10～200µl，运行时间50～150分钟；（2）样品溶液的配制：取本品内容物适量，加入二氯甲烷5～30ml溶解，加水洗涤1～5次，每次5～50ml，弃去水层，取二氯甲烷层溶液，加无水乙醇稀释至每毫升溶液中约含维生素A为1～100µg的溶液，离心，续滤液作为供试品溶液；另取供试品溶液，无水乙醇稀释100倍，作为对照溶液；（3）测定：将上述溶液注入高效液相色谱仪，记录...

【专利技术属性】
技术研发人员：邵爱霞，解洪福，孟祥娟，
申请(专利权)人：济南维瑞医药科技开发有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37