一种中风回春丸的质量检测方法技术

本发明专利技术公开了一种中风回春丸的质量检测方法，包括以下步骤：采用高效液相色谱法同时对中风回春丸中的丹参、桃仁和川牛膝进行鉴别，其中，丹参以丹参素钠为对照，桃仁以苦杏仁苷为对照，川牛膝以杯苋甾酮为对照。本发明专利技术在中风回春丸原质量标准的基础上，增加方中桃仁、川牛膝两味药材的检测方法，能更好地控制产品质量；本发明专利技术的检测方法能在同一色谱条件下对丹参、桃仁和川牛膝3味药材同时进行HPLC定性鉴别的方法，其操作简便、可操作性强、专属性好，符合中药质量标准研究的技术要求。

A method for detecting quality of zhongfenghuichun pill

【技术实现步骤摘要】
一种中风回春丸的质量检测方法
本专利技术涉及药物质量检测方法
，尤其是一种中风回春丸的质量检测方法。
技术介绍
中风是急性脑血管病的统称。根据各种急性脑血管疾病发生的病因、病理及不同表现，一般把中风分为两大类：一类为出血性中风，也称出血性脑血管病，包括脑出血及蛛网膜下腔出血；另一类为缺血性中风，也称缺血性脑血管病，包括短暂性脑缺血发作(也叫一过性脑缺血发作)、脑血栓、脑栓塞及腔隙脑梗塞等。祖国医学认为，中风是指患者真阴素亏，正气不足，或五志过极，或膏粱厚味，或尺牍思劳太过，以致心肝火炽，内风旋动，气逆血菀于上，痰浊蒙蔽脑神，表现以猝然昏仆，不省人事，口眼歪斜，半身不遂，言语謇涩或失语，舌红苔厚腻，脉弦滑数或细涩为主要症状的一种脑病。发病率较高，一般常见于中老年人。罹病之后，极易死亡或致残。中风回春丸是用于中风病恢复期及后遗症期治疗的纯中药制剂，选用优质纯正中草药，科学配方，熔古今工艺于一体精制而成。中风回春丸收载于《中国药典》(2015年版)一部，其处方为：酒当归30g、酒川芎30g、红花10g、桃仁30g、丹参100g、鸡血藤100g、忍冬藤100g、络石藤60g、地龙(炒)90g、土鳖虫(炒)30g、伸筋草60g、川牛膝100g、蜈蚣5g、炒茺蔚子30g、全蝎10g、威灵仙(酒制)30g、炒僵蚕30g、木瓜50g、金钱白花蛇6g，制法为：以上十九味，酒当归、酒川芎、地龙、土鳖虫、蜈蚣、金钱白花蛇、全蝎、炒僵蚕以及丹参50g粉碎成细粉，其余红花等十味和丹参的剩余部分加水煎煮二次，第一次2小时，第二次1.5小时，合并煎液，滤过，静置24小时，倾取上清液，浓缩至适量，与上述药材细粉混匀，制丸，包衣，干燥，即得。本品活血化瘀，舒筋通络。用于痰淤阻络所致的中风，症见半身不遂、肢体麻木、言语謇涩、口舌歪斜。目前《中国药典》(2015年版)一部收载的中风回春丸质量标准仅对处方中忍冬藤、当归、川芎和丹参四味药材进行了检测，对于由十九味药材组成的中药复方制剂来说，在产品质量可控性方面还有待提高。此外，通过相关文献检索，虽也有报道中风回春丸处方中相关单味药材的检测方法，但这些方法也均不适用于中风回春丸及其相关中风治疗药物的质量检测。在另一篇现有技术【1】中只测定了单个药材成分的含量。在现有技术3：《中国药典》(2015年版)一部中，记载了桃仁中苦杏仁苷的含量测定，只能测定单个药材成分的含量。中风回春丸作为十九味药材组合而成的中药复方制剂，其效用的发挥是多个药味之间相辅相成、共同作用的结果，而非单个药味的简单加合。现有《中国药典》(2015年版)一部收载的中风回春丸质量标准仅对处方中忍冬藤、当归、川芎和丹参四味药材进行了检测，仍有多味药材未进行检测，缺乏全面性，不能很好反映药品内在质量。参考文献：1、马英，车镇涛.HPLC法测定川牛膝中杯苋甾酮的含量.中草药,2000,31(6):427-428。
技术实现思路
基于此，本专利技术的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种更全面地检测中风回春丸质量的方法，其检测结果更准确可靠。为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为：一种中风回春丸的质量检测方法，所述质量检测方法包括以下步骤：采用高效液相色谱法同时对中风回春丸中的丹参、桃仁和川牛膝进行鉴别，其中，所述丹参以丹参素钠为对照，所述桃仁以苦杏仁苷为对照，所述川牛膝以杯苋甾酮为对照。优选地，所述质量检测方法包括以下步骤：(1)供试品溶液的制备：称取中风回春丸，粉碎，置容器中并加入醇溶液，超声提取，冷却，滤过，滤液通过挥发除去醇液，剩余水溶液加入乙酸乙酯萃取多次，合并各次的乙酸乙酯层，于水浴上浓缩，滤过，取续滤液，即得待检测的中风回春丸溶液，其中所述醇溶液与中风回春丸的体积质量比为25～35:1(ml/g)；(2)对照品溶液的制备：取对照品丹参素钠、苦杏仁苷和杯苋甾酮适量，加入一定量的与步骤(1)相同的醇溶液制成丹参素钠、苦杏仁苷和杯苋甾酮的混合溶液，即为所需的对照品溶液；(3)色谱条件与系统适用性试验：色谱柱采用以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的C18柱；采用梯度洗脱，流动相A为乙腈，流动相B为酸水溶液；检测波长为210nm～220nm；柱温为20℃～30℃；理论板数按丹参素钠峰计算应不低于3000；(4)测定：分别定量吸取所述对照品溶液和所述待检测的中风回春丸溶液，注入液相色谱仪测得各自的色谱图，并进行分析。应当说明的是，在系统适用性试验中，只要满足理论板数按丹参素钠峰计算应不低于3000的条件即可。优选地，所述丹参素钠浓度为100～200μg/ml、所述苦杏仁苷浓度为50～100μg/ml、所述杯苋甾酮浓度为50～100μg/ml。优选地，所述步骤(3)中的梯度洗脱程序为：0～5分钟，流动相A为5％→7％，流动相B为95％→93％；5～10分钟，流动相A为7％→15％，流动相B为93％→85％；10～15分钟，流动相A为15％→20％，流动相B为85％→80％；15～25分钟，流动相A为20％→30％，流动相B为80％→70％；其中，所述流动相A、B的比例均为体积百分比。优选地，所述步骤(1)中醇溶液为50～70％的甲醇溶液。应当说明的是，甲醇溶液浓度为体积百分比。优选地，所述步骤(1)中醇溶液为60％的甲醇溶液，所述超声处理时间为60～120分钟。优选地，所述流动相B为冰醋酸、磷酸或甲酸的水溶液。优选地，所述流动相B的浓度为0.05～0.4％。应当说明的是，流动相B的浓度为体积百分比。优选地，所述流动相B为磷酸水溶液，所述流动相B中磷酸的体积百分数为0.2％。优选地，所述步骤(3)中的检测波长为215nm，柱温为25℃。综上所述，本专利技术的有益效果为：1、本专利技术在中风回春丸原质量标准的基础上，增加方中桃仁、川牛膝两味药材的检测方法，能更好地控制产品质量；2、中风回春丸是中药复方制剂，其成分复杂，专利技术人通过大量研究得到本专利技术所述的在同一色谱条件下对丹参、桃仁和川牛膝3味药材同时进行HPLC定性鉴别的方法，并进行了方法学验证，实验结果表明本专利技术的检测方法操作简便、可操作性强、专属性好，符合中药质量标准研究的技术要求。附图说明图1是丹参素钠、苦杏仁苷和杯苋甾酮混合对照品HPLC色谱图；图2是中风回春丸供试品HPLC色谱图；图3是缺少丹参、桃仁、川牛膝的阴性样品HPLC色谱图；图4～图8是不同比例流动相条件下中风回春丸供试品HPLC色谱图。具体实施方式本专利技术旨在提供一种全面、可靠的中风回春丸的质量检测方法。中风回春丸处方共十九味药材，而质量标准中仅对忍冬藤、当归、川芎和丹参这四味药材进行质量控制，不能很好反映药品的内在质量。因此，本专利技术增加处方中桃仁和川牛膝这两味药材的检测方法，以更好地对中风回春丸的质量进行控制。具体为：利用高效液相色谱法对中风回春丸中的丹参(以活性成分丹参素钠为对照)、桃仁(以活性成分苦杏仁苷为对照)和川牛膝(以活性成分杯苋甾酮为对照)在同一色谱条件下进行定性鉴别。另外，现有技术只涉及到单味药材或单个复方制剂中单一成分的检测，而中风回春丸处方中药味多，成分复杂，影响测定的干扰因素较多，采用现有技术无法使该中药复方制剂中的活性成分(或指标成分)丹参素钠、苦杏仁苷和杯苋甾酮得到有效分离。因此，为了实现在同一本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种中风回春丸的质量检测方法，其特征在于，所述质量检测方法包括以下步骤：采用高效液相色谱法同时对中风回春丸中的丹参、桃仁和川牛膝进行鉴别，其中，所述丹参以丹参素钠为对照，所述桃仁以苦杏仁苷为对照，所述川牛膝以杯苋甾酮为对照。

【技术特征摘要】
1.一种中风回春丸的质量检测方法，其特征在于，所述质量检测方法包括以下步骤：采用高效液相色谱法同时对中风回春丸中的丹参、桃仁和川牛膝进行鉴别，其中，所述丹参以丹参素钠为对照，所述桃仁以苦杏仁苷为对照，所述川牛膝以杯苋甾酮为对照。2.根据权利要求1所述的质量检测方法，其特征在于，所述质量检测方法包括以下步骤：(1)供试品溶液的制备：称取中风回春丸，粉碎，置容器中并加入醇溶液，超声提取，冷却，滤过，滤液通过挥发除去醇液，剩余水溶液加入乙酸乙酯萃取多次，合并各次的乙酸乙酯层，于水浴上浓缩，滤过，取续滤液，即得待检测的中风回春丸溶液，其中所述醇溶液与中风回春丸的体积质量比为25～35:1(ml/g)；(2)对照品溶液的制备：取对照品丹参素钠、苦杏仁苷和杯苋甾酮适量，加入一定量的与步骤(1)相同的醇溶液制成丹参素钠、苦杏仁苷和杯苋甾酮的混合溶液，即为所需的对照品溶液；(3)色谱条件与系统适用性试验：色谱柱采用以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的C18柱；采用梯度洗脱，流动相A为乙腈，流动相B为酸水溶液；检测波长为210nm～220nm；柱温为20℃～30℃；理论板数按丹参素钠峰计算应不低于3000；(4)测定：分别定量吸取所述对照品溶液和所述待检测的中风回春丸溶...

【专利技术属性】
技术研发人员：江涛，杨滨宾，彭红英，陈晓坚，刘敏珊，曾利杰，陈丽斯，苏锐辉，
申请(专利权)人：广州白云山敬修堂药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44