一种测定样品中香茅醛的方法、试剂盒及其应用技术

本发明专利技术属于检测分析领域，具体涉及一种测定样品中香茅醛的方法，包括如下步骤：(1)采用适宜溶剂浸渍样品，固液分离，得到提取液；(2)采用液相色谱‑串联质谱检测步骤(1)得到的提取液，获得检测结果；(3)根据步骤(2)获得的检测结果定性分析和/或定量计算出样品中的香茅醛；步骤(2)中，所述液相色谱的检测条件中，流动相由流动相A和流动相B组成，其中，流动相A为乙腈，流动相B为含有乙酸的乙酸铵溶液，并且，流动相B中乙酸铵的摩尔浓度为1‑10mmoL/L。在此基础上，本发明专利技术还提供了一种试剂盒。本发明专利技术的测定方法能快速、准确测定出香精香料样品中香茅醛的含量，回收率高，重现性好。

A method, kit and application for the determination of citronella in samples

The invention belongs to the field of detection, and particularly relates to a method for the determination of citronellal in the sample, which comprises the following steps: (1) using a suitable solvent impregnated samples, solid-liquid separation, extracting liquid; (2) by liquid chromatography tandem mass spectrometry step (1) to get the extract, get the test results; (3) according to the steps (2) the detection results obtained qualitative and / or quantitative samples were calculated in citronellal; step (2), the detection conditions of HPLC, the mobile phase by mobile phase A and the composition of mobile phase B, the mobile phase A was mobile phase. B ammonium acetate solution, containing acetic acid and ammonium acetate, the molar concentration of the mobile phase B was 1 in the 10mmoL/L. On this basis, the invention also provides a reagent box. The determination method of the invention can quickly and accurately determine the content of citronella in the flavor and perfume samples with high recovery and good reproducibility.

【技术实现步骤摘要】
一种测定样品中香茅醛的方法、试剂盒及其应用
本专利技术属于检测分析领域，具体涉及一种测定样品中香茅醛的方法，还涉及一种试剂盒及其应用。
技术介绍
香茅醛(Citronellal)别名为雄刈萱醛，化学名称为3，7-二甲基-6-辛烯醛，其存在于香茅油及桉叶的桉叶油中，可用于调配食用香精(例如柑橘和樱桃类香精)，也可用于调制皂用香精及合成薄荷醇。香茅醛广泛应用于医药、烟草、食品等领域，尤其在烟草香味中起重要作用，是烟用香精香料的常用成分。目前，检测香茅醛主要采用气质联用法(GC-MS)，但由于香精香料样品成分复杂，采用气质联用法(GC-MS)检测需经过较为繁琐的前处理过程(例如衍生化处理)，并且，气质联用法还需耗费较长的分析时间才能将目标物与干扰物基线分离开。基于这种情况，目前亟需一种简便、快速的检测方法来分析香精香料中的香茅醛。液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)是近年发展起来的分析检测方法。迄今为止，还未发现用LC-MS/MS检测香精香料中香茅醛的技术。
技术实现思路
本专利技术提供了一种测定样品中香茅醛的方法，该方法能快速、准确测定出香精香料样品中香茅醛的含量，重现性好，回收率高，操作简便。在此基础上，本专利技术还提供了一种试剂盒及其在测定样品的香茅醛中的应用。本专利技术第一方面涉及一种测定样品中香茅醛的方法，包括如下步骤：(1)采用适宜溶剂浸渍样品，固液分离，得到提取液；(2)采用液相色谱-串联质谱检测步骤(1)得到的提取液，获得检测结果；(3)根据步骤(2)获得的检测结果定性分析和/或定量计算出样品中的香茅醛；步骤(2)中，所述液相色谱的检测条件中，流动相由流动相A和流动相B组成，其中，流动相A为乙腈，流动相B为含有乙酸的乙酸铵溶液，并且，流动相B中乙酸铵的摩尔浓度为1-10mmoL/L。本专利技术第一方面的某些实施方式中，步骤(1)中固液分离得到的液体即为步骤(1)得到的提取液。本专利技术第一方面的某些实施方式中，步骤(2)中，所述液相色谱的检测条件中，流动相B中乙酸铵的摩尔浓度为2-8mmoL/L，例如3mmoL/L、4mmoL/L、5mmoL/L、6mmoL/L、7mmoL/L或9mmoL/L。本专利技术第一方面的某些实施方式中，步骤(2)中，所述液相色谱的检测条件中，流动相B中乙酸的体积百分含量为0.05％(v/v)-0.5％(v/v)，优选为0.08％(v/v)-0.4％(v/v)，例如0.06％(v/v)、0.1％(v/v)、0.2％(v/v)、0.3％(v/v)、0.45％(v/v)。本专利技术第一方面的某些实施方式中，步骤(2)中，液相色谱的检测条件中，洗脱程序如下面的表1所示：表1本专利技术第一方面的某些实施方式中，步骤(2)中，所述串联质谱的检测条件中，香茅醛的定性离子对为155.0>81.1和/或155.0>137.2。本专利技术第一方面的某些实施方式中，步骤(2)中，所述串联质谱的检测条件中，香茅醛的定量离子对为155.0>81.1。本专利技术第一方面的某些实施方式中，其中，步骤(2)还包括如下a)至m)中的一项或者多项：a)所述液相色谱为高效液相色谱；b)所述液相色谱的检测条件中，色谱柱为C18色谱柱，优选为菲罗门C18色谱柱，规格为50mm×2.1mmi.d.，2.6μm粒径；c)所述液相色谱的检测条件中，色谱柱温度为20℃-40℃，优选为28℃-32℃，例如22℃、23℃、25℃、27℃、29℃、30℃或31℃；d)所述液相色谱的检测条件中，流速为0.1-1mL/min，优选为0.1-0.5mL/min，例如0.2mL/min、0.3mL/min、0.4mL/min、0.6mL/min、0.8mL/min或0.9mL/min；e)所述串联质谱为三重四级杆质谱；f)所述串联质谱的检测条件中，离子源为电喷雾电离源；g)所述串联质谱的检测条件中，扫描方式为正离子扫描；h)所述串联质谱的检测条件中，检测方式为多反应监测；i)所述串联质谱的检测条件中，电喷雾电压为3500-4500V，优选为4000V；j)所述串联质谱的检测条件中，离子源温度为300℃-500℃，优选为400℃；k)所述串联质谱的检测条件中，辅助气压力为50-60psi，例如50psi或60psi；l)所述串联质谱的检测条件中，去簇电压为30-50V，优选为40V；m)所述串联质谱的检测条件中，碰撞能为10-20V，优选为15V。本专利技术第一方面的某些实施方式中，所述方法包括如下A)至G)中的一项或者多项：A)所述样品为香精香料样品，优选为烟用香精香料样品；B)步骤(1)中，所述适宜溶剂为无水甲醇；C)步骤(1)中，浸渍的料液比为1-30mg/mL，优选为4-20mg/mL，例如8mg/mL、10mg/mL、15mg/mL或25mg/mL；D)步骤(1)中，所述浸渍在超声条件下进行，浸渍的时间为15-60分钟；优选地，浸渍的时间为20-50分钟，例如30分钟、40分钟或45分钟；E)步骤(1)中，浸渍的温度为常温，例如20℃-45℃、25℃、30℃、35℃；F)步骤(1)中，固液分离的方式为过滤；优选地，采用有机滤膜进行过滤；更优选地，有机滤膜的孔径为0.1-0.5μm，例如0.22μm；G)步骤(3)中，采用外标法定量。本专利技术第二方面涉及一种试剂盒，其包含：无水甲醇、有机滤膜、C18色谱柱、乙腈和含有乙酸的乙酸铵溶液。本专利技术第二方面的某些实施方式中，所述试剂盒还包含香茅醛标准品。本专利技术第二方面的某些实施方式中，所述试剂盒包括如下1)至5)中的一项或多项：1)所述有机滤膜的孔径为0.1-0.5μm，例如0.2-0.3μm；2)所述C18色谱柱为菲罗门C18色谱柱，规格为50mm×2.1mmi.d.，2.6μm粒径；3)所述乙酸铵溶液中乙酸铵的摩尔浓度为1-10mmoL/L，优选为2-8mmoL/L，例如3mmoL/L、4mmoL/L、5mmoL/L、6mmoL/L、7mmoL/L或9mmoL/L；4)所述乙酸铵溶液中乙酸的体积百分含量为0.05％(v/v)-0.5％(v/v)，优选为0.1％(v/v)-0.4％(v/v)，例如0.06％(v/v)、0.1％(v/v)、0.2％(v/v)、0.3％(v/v)、0.45％(v/v)；5)所述香茅醛标准品为分析纯以上等级。本专利技术第三方面涉及本专利技术第二方面任一所述的试剂盒在测定样品中香茅醛中的应用。本专利技术第三方面的某些实施方式中，所述样品为香精香料样品，优选为烟用香精香料样品。如无特别说明，本专利技术的术语定义如下：术语“浸提”是指溶剂进入原料的组织细胞，溶解或分散其中的待提取成分而变成浸出液的全部过程。术语“浸渍”属于常用浸提方法中的一种，是指用溶剂浸泡原料，使原料中的待提取成分溶解进溶剂的操作；其中“浸提”的定义如上所述。术语“烟用香精香料”包括烟用香料和烟用香精。其中，烟用香料是指单独或调配后能改善或增强烟草制品香气或吃味的香料；烟用香精是指由两种以上的烟用香料按一定配比并加入辅料和溶剂组成的一种烟草制品的添加剂，专供各种烟草制品加香矫味使用，使之在燃吸时能产生香气和吃味。按烟草制品的类型分，烟用香精香料包括但不限于嚼烟用香精香料、鼻烟用香精香料、雪茄烟用香本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种测定样品中香茅醛的方法，包括如下步骤：(1)采用适宜溶剂浸渍样品，固液分离，得到提取液；(2)采用液相色谱‑串联质谱检测步骤(1)得到的提取液，获得检测结果；(3)根据步骤(2)获得的检测结果定性分析和/或定量计算出样品中的香茅醛；步骤(2)中，所述液相色谱的检测条件中，流动相由流动相A和流动相B组成，其中，流动相A为乙腈，流动相B为含有乙酸的乙酸铵溶液，并且，流动相B中乙酸铵的摩尔浓度为1‑10mmoL/L。

【技术特征摘要】
1.一种测定样品中香茅醛的方法，包括如下步骤：(1)采用适宜溶剂浸渍样品，固液分离，得到提取液；(2)采用液相色谱-串联质谱检测步骤(1)得到的提取液，获得检测结果；(3)根据步骤(2)获得的检测结果定性分析和/或定量计算出样品中的香茅醛；步骤(2)中，所述液相色谱的检测条件中，流动相由流动相A和流动相B组成，其中，流动相A为乙腈，流动相B为含有乙酸的乙酸铵溶液，并且，流动相B中乙酸铵的摩尔浓度为1-10mmoL/L。2.根据权利要求1所述的方法，其中，步骤(2)中，所述液相色谱的检测条件中，流动相B中乙酸铵的摩尔浓度为2-8mmoL/L；优选地，流动相B中乙酸的体积百分含量为0.05％(v/v)-0.5％(v/v)，更优选为0.08％(v/v)-0.4％(v/v)。3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，步骤(2)中，所述液相色谱的检测条件中，洗脱程序如下面的表1：表14.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中，步骤(2)中，所述串联质谱的检测条件中，香茅醛的定性离子对为155.0>81.1和/或155.0>137.2。5.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中，步骤(2)中，所述串联质谱的检测条件中，香茅醛的定量离子对为155.0>81.1。6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中，步骤(2)还包括如下a)至m)中的一项或者多项：a)所述液相色谱为高效液相色谱；b)所述液相色谱的检测条件中，色谱柱为C18色谱柱，优选为菲罗门C18色谱柱，规格为50mm×2.1mmi.d.，2.6μm粒径；c)所述液相色谱的检测条件中，色谱柱温度为20℃-40℃，优选为28℃-32℃；d)所述液相色谱的检测条件中，流速为0.1-1mL/min，优选为0.1-0.5mL/min；e)所述串联质谱为三重四级杆质谱；f)所述串联质谱的检测条件中，离子源为电喷雾电离源；g)所述串联质谱的检测条件中，扫...

【专利技术属性】
技术研发人员：邓其馨，周培琛，苏明亮，刘江生，黄延俊，叶仲力，刘泽春，谢卫，
申请(专利权)人：福建中烟工业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：福建,35