一种提取酱类产品中微生物宏基因组的方法技术
A method for extracting microorganism macrogenome in soy sauce products
The invention discloses a method for extracting microorganism macrogenome in soy sauce products, which belongs to the field of molecular biology technology. The invention uses salt solution to treat the sauce products after demulsification, and then carries out the extraction of DNA, which is beneficial to minimize the influence of paste sample on the extraction and separation. Metagenomic purity by the method of the invention to extract is 7~9 times higher than the traditional method, the molecular size is adequate to meet the needs of the subsequent experiments, and from the operation, the method is simple and easy to implement, the required reagents are relatively common, can save the laboratory cost.
【技术实现步骤摘要】
一种提取酱类产品中微生物宏基因组的方法
本专利技术涉及一种提取酱类产品中微生物宏基因组的方法，属于分子生物学
技术介绍
酱类产品，如沙拉酱、榴莲酱、芥末酱等，是我们生活中常用的调味品。随着经济发展，人民生活水平的提高，我们对食物的味道要求更高，酱类产品成为日常生活中重要的调味品。日常生活中，市面上销售的酱类产品(例如沙拉酱、榴莲酱、芥末酱等)主要是植物油、鸡蛋、白砂糖、再加上调味料等调制而成。市售酱类产品保质期短，并且在保质期内还经常会发生胀袋等变质现象。这些现象主要是由产品中的某些微生物大量生长繁殖造成的。为了找出导致酱类产品变质的微生物，通常采用微生物的分离和筛选技术，然而，传统的实验室分离培养技术有一定局限性，因为许多微生物是不可培养的，无法通过传统的分离和筛选手段有效获得目的微生物。随着宏基因组测序技术的发展，可以快速方便的鉴定出产品中微生物的多样性，以便分析导致变质的微生物。宏基因组测序需要符合测定要求的质和量的DNA，但由于酱类产品通常是质地浓厚粘稠，从酱类产品中提取微生物的总DNA存在以下两个难点。首先，酱类产品主要就是大量油和蛋打发乳化形...
【技术保护点】
一种提取酱类产品基因组DNA的方法，其特征在于，将酱类产品和氯化钠溶液混合进行破乳化，再进行基因组DNA的提取。
【技术特征摘要】
1.一种提取酱类产品基因组DNA的方法，其特征在于，将酱类产品和氯化钠溶液混合进行破乳化，再进行基因组DNA的提取。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述氯化钠溶液的浓度为60～260g/L。3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：将酱类样品与氯化钠溶液按1g：(1～2)mL的比例混匀；采用机械破碎法震荡、离心、取上清；加入2～3倍体积的苯酚-氯仿-异戊醇混合溶液，摇匀，取上清；先后用盐溶液、乙醇溶液洗涤；用洗脱液洗脱，离心，获得基因组DNA。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，具体包括以下步骤：(1)将待提取的酱类样品与氯化钠溶液按1g：(1-2)mL的比例混合，漩涡震荡1～5min；(2)将步骤(1)得到的混合液在60～65℃超声0.5～1.5h；(3)将超声后的混合液与抽提液按体积比1：1.5～3混合；(4)加入石英砂，采用机械破碎法震荡1～2min，重复3～4次，室温8000～10000r/min离心8～15min中后取上清；(5)向上清加2～3倍体积的体积比为24～25：24～25：1的苯酚-氯仿-异戊醇混合溶液，摇匀，8000～10000r/min...
【专利技术属性】
技术研发人员：方芳，王志海，李兆雯，徐洁，吴新，
申请(专利权)人：珠海天禾食品有限公司，江南大学，
类型：发明
国别省市：广东,44
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