The invention provides a DNA extraction method, including: rice rice leaves cut in 2ml centrifuge tube, to extract, 65 degrees in the oven in about 30min, the supernatant after centrifugation at 96 alcohol Youyi Sheng Kong Banzhong, standing around 30min, the centrifugal white solid is DNA. Compared with the traditional DNA extraction technology, the invention is simple and fast, with fewer reagents, low cost, no need for phenol and chloroform extraction, and friendly environment, without liquid nitrogen or frozen samples. The DNA extracted by the invention has the characteristics of high yield, good quality, high success rate of PCR amplification, low cost, good generality, strong molecular stability and so on.
【技术实现步骤摘要】
一种简单快速的水稻DNA提取方法
本专利技术涉及生物
,尤其涉及一种基于PCR的简单快速提取水稻DNA的方法。
技术介绍
水稻是世界上最主要的三大粮食作物之一,有着丰富和深入的基因组研究基础,其中DNA的制备是深入进行分子生物学研究的基础。基于PCR分子标记技术已经广泛应用于基因定位、基因克隆、转基因植株检测及分子标记辅助育种等方面,这些研究都需要进行大量DNA提取工作。然而,DNA提取是一项耗费人力、物力的繁琐工作。因此,建立适合PCR分析的简便、高效、低成本的DNA提取方法是非常必要的。前人已就植物基因组DNA的提取总结了一系列的方法,如SDS法和CTAB法,虽然这些方法抽提的DNA质量较好,但过程费力且繁琐,需要使用氯仿、异戊醇等有毒化学试剂,难以适用于大量植物叶片基因组DNA提取的需要。相应地,一些生物公司也开了一些基因组DNA提取试剂盒,但试剂盒往往成本较高,也不适用于大量样品DNA的提取。
技术实现思路
为了解决上述问题,实现高通量提取水稻DNA,满足各种PCR分子标记技术的要求,本专利技术提供了一种简单、快速的提取植物DNA的方法。本专利技术提供了 ...
【技术保护点】
一种简单快速的水稻DNA提取方法,其特征在于:按如下步骤进行步骤1)取5‑10mg水稻叶片,将其尽量剪碎,长度小于1cm,置于2ml离心管中;步骤2)向离心管中加入200‑500µl提取液,在烘箱中65℃处理30min,在此期间每隔10‑20min轻摇一次;步骤3)再将上述离心管在10000rpm条件下,离心5min,并将上清液转入装有异丙醇的96孔板中,转移至‑20℃冰箱或室温静置30min‑1h;步骤4)在6000rpm离心3min,弃上清液;用排枪加入70%的无水乙醇200µl清洗,吹干;步骤5)加入灭菌的双蒸水或TE溶液溶解,即可提取DNA;所述提取液为:12.11 ...
【技术特征摘要】
1.一种简单快速的水稻DNA提取方法,其特征在于:按如下步骤进行步骤1)取5-10mg水稻叶片,将其尽量剪碎,长度小于1cm,置于2ml离心管中;步骤2)向离心管中加入200-500µl提取液,在烘箱中65℃处理30min,在此期间每隔10-20min轻摇一次;步骤3)再将上述离心管在10000rpm条件下,离心5min,并将上清液转入装有...
【专利技术属性】
技术研发人员:何弯弯,王健康,丁成伟,郭荣良,吴玉玲,徐家安,王友霜,胡婷婷,赵轶鹏,
申请(专利权)人:江苏徐淮地区徐州农业科学研究所江苏徐州甘薯研究中心,
类型:发明
国别省市:江苏,32
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