一种甲钴胺及其衍生物的纯化方法技术

本发明专利技术提供了一种甲钴胺及其衍生物的纯化方法，以甲钴胺及其衍生物(包括氰钴胺，羟钴胺，腺苷钴胺)粗品为原料，加入一定比例的纯化水或水与有机溶剂的混合溶剂，控制温度为25～80℃，加入一定比例的季铵盐，溶解。加酸调节pH值，再加入活性炭搅拌吸附30min，过滤脱色得澄清料液。控制温度为25～60℃，搅拌下向澄清料液中加入有机溶剂，降温至0～10℃析晶，过滤或离心，干燥获得高纯度的甲钴胺及其衍生物。本发明专利技术在甲钴胺及其衍生物纯化过程中，加入一定比例的季铵盐。杂质去除效果好，加入的季铵盐容易去除，一次纯化操作可以获得纯度大于99.6％甲钴胺纯品，与现有技术相比，本发明专利技术方案具有工艺简单，生产效率高，成本低，适合工业化生产等优势。

Purification method of mecobalamin and its derivatives

The present invention provides a method for purification of mecobalamin and its derivatives, and its derivatives with Mecobalamin (including cyanocobalamin and hydroxocobalamin, cyanocobalamine) crude as raw material, purified water or mixed solvent of water and organic solvent by adding a certain proportion of the control, the temperature is 25~80 DEG C, adding a certain proportion of Quaternary ammonium salt, dissolved. Adding acid to adjust the pH value and adding activated carbon to stir and adsorb 30min, the filtrate decolorizing the clarification solution. To control the temperature of 25~60 DEG C, stirring to clarify the organic solvent is added in the feed liquid cooling to 0~10 DEG C, crystallization, filtration or centrifugation, drying to obtain high purity of mecobalamin and its derivatives. The present invention in the purification of mecobalamin and its derivatives in the process of adding a certain proportion of the quaternary ammonium salt. Impurity removal and quaternary ammonium salt added easily removed, a purification operation can be obtained with purity of more than 99.6% Mecobalamin pure, compared with the existing technology, the scheme of the invention has the advantages of simple process, high production efficiency, low cost, suitable for industrial production and other advantages.

【技术实现步骤摘要】
一种甲钴胺及其衍生物的纯化方法
本专利技术属于药物化学领域，尤其涉及一种药物新的提纯方法，具体涉及一种新的甲钴胺及其衍生物的纯化方法。
技术介绍
甲钴胺(Methylcobalamin)，化学名：钴-α-[α-5，6-二甲基苯并咪唑基]-钴-β-甲基钴胺酰胺，结构式如式(I)所示：甲钴胺是日本卫材株式会社开发的一种辅酶型维生素B12，临床上主要用于治疗周围神经疾病及缺乏维生素B12引起的巨幼红细胞性贫血，与其他辅酶型维生素B12类药物相比，本品比氰钴胺易于进入神经元细胞器，参与脑细胞和脊髓神经元胸腺嘧啶核苷的合成，促进叶酸的利用和核酸代谢，且促进核酸和蛋白质合成作用较氰钴胺强；能促进轴突运输功能和轴突再生修复受损的神经，是一种治疗周围神经疾病比较有效的药物。式I甲钴胺是一种深红色结晶或结晶性粉末，无臭、无味，吸湿性强，遇强光或紫外线易被破坏，强酸强碱条件下亦不稳定。甲钴胺是由原料氰钴胺经还原甲基化制备所得，自然界中的维生素B12都是微生物合成的，高等动植物不能制造维生素B12。维生素B12的结构极为复杂，著名有机化学家Woodward最杰出的成就，就是组织了14个国家的110位化学家，协同攻关，历时11年，终于在他谢世前几年实现了，完成了复杂的维生素B12的合成工作。目前市场上供应的维生素B12主要通过微生物发酵制备。文献报道的甲钴胺的制备方法，以氰钴胺(维生素B12)，羟钴胺，腺苷钴胺为原料，经使用硼氢化钠还原后，然后使用甲基化试剂进行甲基化制备获得。使用的甲基化试剂主要有碘甲烷，硫(碳)酸二甲酯，三甲基卤化亚砜等。目前文献报道的甲钴胺或其衍生物的纯化方法，归纳起来主要有以下几种：1、层析法：文献[1]_CN103113443A、[2]_CN102391340A、[3]_WO2006100059A1、[4]_、赵春山.甲钴胺的合成研究.哈尔滨理工大学学报[J].9(5)：2004，104-105.、[5]_MartinTollinger，TomasDkrer，RobertKonrat，etal.Anefficientmethodforthepreparationofmethylcobalamin，nature’sorganometallicmethyltransfercatalyst.JournalofMolecularCatalysisA[J]：Chemical116(1997)147-155、[6]_JPH06279484A报道的方法为采用层析的方法精制纯化甲钴胺及其衍生物。根据层析分离过程中使用吸附剂的不同，又可以分为大孔吸附树脂分离及硅胶或氧化铝吸附分离方法。其中文献[1]、[2]和[3]为采用大孔吸附树脂分离，而文献[4]、[5]和[6]为采用硅胶或氧化铝吸附分离。两种分离方法的共同点是，洗脱时采用的溶剂体系为丙酮/甲醇/乙醇与水的混合体系进行洗脱，然后浓缩，结晶获得甲钴胺及其衍生物。该分离纯化方法的缺陷主要体现在以下几个方面：一是分离纯化过程中需要使用价格较贵的吸附材料(大孔吸附树脂分离/硅胶或氧化铝)，不但有机溶剂使用量大，且分离纯化耗时，只适于试验室制备少量样品采用。因而不适于大规模工业化生产；二是分离洗脱完毕后，需对大量洗脱液进行浓缩处理，由于甲钴胺及其衍生物在高温下不稳定，容易降解。因而浓缩过程中温度高或时间过长都会造成产品杂质增大。2、丙酮/水结晶法：文献[7]_CN1524086A、[8]_US20020183511A1报道的方法为采用丙酮/水体系进行结晶，收率较高。但文献并未提供纯度或含量数据。本专利技术人在实施文献报道的方法制备甲钴胺时，发现丙酮/水结晶体系对甲钴胺的精制纯化效果有限，采用此方法制备甲钴胺对原料氰钴胺或羟钴胺的纯度要求较高，否则因原料引入的杂质带入后续反应产生的新杂质，采用丙酮/水体系进行纯化，难于获得预期效果；3、盐析法：文献[9]_EP0976757A2报道的方法为采用水对甲钴胺及其衍生物进行纯化，但在纯化过程中，在水中加入了大量的诸如氯化铵，溴化钠，氯化钙，氯化铜，磷酸二氢钠，氯化铁等无机盐。该方法虽可以避免使用有机溶剂，但缺陷也比较明显。一是加入的一些重金属盐，有些价格昂贵，有些毒性较大，因而不适用于制备药物。二是加入的无机盐的量较大，残留的盐后续去除较困难。甚至仍需要进行层析除盐。综上，目前使用上述方法制备分离提纯式(I)化合物，由于理论及大生产实践的限制，虽可以对部分参数进行优化及进行溶剂筛选替代，但仍然无法克服溶剂使用量大，精制纯化效果不理想，产品质量无法提高等缺陷。这些大量繁琐及耗时的工艺操作，不但降低生产效率，也不能保证获得高收率及高质量的产品，因而造成的浪费是惊人的。为此亟待一种新的技术方案，以提供更优的工艺条件，提高产品的质量，提高劳动生产率，最大限度的降低生产成本，使其更有利于大规模工业化分离提纯式(I)。
技术实现思路
为克服现有技术缺陷，本专利技术的目的在于提供一种简便有效、能有效除去甲钴胺及其衍生物原料中的杂质的纯化方法。为了实现以上目的，本专利技术采用以下技术方案：一种甲钴胺及其衍生物的纯化方法，其特征在于：以甲钴胺及其衍生物(包括氰钴胺，羟钴胺，腺苷钴胺)粗品为原料，加入一定比例的纯化水或水与有机溶剂的混合溶剂，控制温度为25～80℃，加入一定比例的季铵盐，溶解。加酸调节pH值，再加入活性炭搅拌吸附30min，过滤脱色得澄清料液。控制温度为25～60℃，搅拌下向澄清料液中加入有机溶剂，降温至0～10℃析晶，过滤或离心，干燥得高纯度的甲钴胺及其衍生物。所述的甲钴胺及其衍生物粗品纯度一般大于80％，优选的大于90％，更优选的大于95％。所述的甲钴胺及其衍生物粗品溶解后的溶液浓度为0.01～0.2/mL。所述的水与有机溶剂的混合溶剂中水与有机溶剂的体积比为1∶0.5～1.0。所述溶解温度一般为25～80℃，优选的30～60℃，更优选的30～40℃。所述的季铵盐通式为R4NX，其中四个烃基R可以相同，也可不同。X多是卤素负离子(F、Cl、Br、I)，也可是酸根(如HSO4、RCOO等)，其中最常用的有十二烷基三甲基氯(溴)化铵、十四烷基三甲基氯(溴)化铵、十六烷基三甲基氯(溴)化铵、四丁基氯(溴)化铵、四丁基硫酸氢铵，苄基三乙基氯化铵三丁基甲基氯化铵。优选的季铵盐为四丁基溴化铵。所述的季铵盐与甲钴胺及其衍生物粗品质量之比为0.01～0.1∶1。所述的酸包括无机酸如盐酸、硫酸、硝酸和硫酸等和有机酸如甲酸、乙酸和三氟乙酸等，优选的为盐酸。所述pH值一般为4.0～7.0，优选的5.0～7.0，更优选的为5.5～6.5。所述的有机溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇和丙酮，优选的为丙酮。所述加入的有机溶剂的比例为甲钴胺或其衍生物粗品的40～80倍(V/m，ml/g)。所述的活性炭与甲钴胺及其衍生物粗品质量之比为0.01～0.05∶1。与现有技术相比，本专利技术方案的技术优点体现在以下几个方面：(1)本专利技术的关键之一在于纯化过程中不需要使用柱层析，不需要加入难以去除的诸如氯化铵，溴化钠，氯化钙，氯化铜，磷酸二氢钠，氯化铁等无机盐，与现有技术相比本专利技术方案更省时省物料，具有工艺简单，生产效率高，成本低，适合工业化生产等特点。(2)本专利技术的关键之二在于精制过程中使用本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种甲钴胺及其衍生物的纯化方法，其特征在于：以甲钴胺及其衍生物(包括氰钴胺，羟钴胺，腺苷钴胺)粗品为原料，加入一定比例的纯化水或水与有机溶剂的混合溶剂，控制温度为25～80℃，加入一定比例的季铵盐，溶解。加酸调节pH值，再加入活性炭搅拌吸附30min，过滤脱色得澄清料液。控制温度为25～60℃，搅拌下向澄清料液中加入有机溶剂，降温至0～10℃析晶，过滤或离心，干燥得高纯度的甲钴胺及其衍生物。

【技术特征摘要】
1.一种甲钴胺及其衍生物的纯化方法，其特征在于：以甲钴胺及其衍生物(包括氰钴胺，羟钴胺，腺苷钴胺)粗品为原料，加入一定比例的纯化水或水与有机溶剂的混合溶剂，控制温度为25～80℃，加入一定比例的季铵盐，溶解。加酸调节pH值，再加入活性炭搅拌吸附30min，过滤脱色得澄清料液。控制温度为25～60℃，搅拌下向澄清料液中加入有机溶剂，降温至0～10℃析晶，过滤或离心，干燥得高纯度的甲钴胺及其衍生物。2.如权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，所述的甲钴胺及其衍生物粗品纯度一般大于80％，优选的大于90％，更优选的大于95％。3.如权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，所述的甲钴胺及其衍生物粗品溶解后的溶液浓度为0.01～0.2/mL。4.如权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，所述的水与有机溶剂的混合溶剂中水与有机溶剂的体积比为1∶0.5～1.0。5.如权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，所述溶解温度一般为25～80℃，优选的30～60℃，更优选的30～40℃。6.如权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，所述的季铵盐通式为R4NX，其中四个烃基R可以相同，也可不同。X多...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄文峰，黄雄鸠，李胜伟，马缙，周和平，
申请(专利权)人：重庆莱美隆宇药业有限公司，
类型：发明
国别省市：重庆,50