一种腺苷钴胺晶型及其制备方法与应用技术

本发明专利技术涉及一种腺苷钴胺晶型及其制备方法与应用，采用Cu‑Kα靶辐射，其X‑射线粉末衍射在衍射角2θ＝5.1±0.1，6.3±0.1，7.0±0.1，7.6±0.1，8.0±0.1，8.6±0.1，9.4±0.1，13.2±0.1，13.8±0.1，15.0±0.1，17.5±0.1，19.1±0.1，21.4±0.1，23.5±0.1，25.3±0.1处有特征峰。本发明专利技术采用潜溶剂溶解腺苷钴胺粗品；采用反溶剂重结晶法得到腺苷钴胺精制品；制备过程降低杂质效果明显；操作简便，能耗低，产品纯度高于99.5％，总杂小于0.5％，收率大于98.0％，产品对光、热、高湿的稳定性显著增强；可工业化生产。

Adenosine cobalt amide crystal form, preparation method and application thereof

The invention relates to a cobamamide crystal and preparation method and application thereof, using Cu K target alpha radiation, the X X-ray powder diffraction in the diffraction angle 2 theta = 5.1 + 0.1, 6.3 + 0.1, 7 + 0.1, 7.6 + 0.1, 8 + 0.1, 8.6 + 0.1, 9.4 + 0.1 13.2, + 0.1, 13.8 + 0.1, 15 + 0.1, 17.5 + 0.1, 19.1 + 0.1, 21.4 + 0.1, 23.5 + 0.1, 25.3 + 0.1 characteristic peaks. The invention adopts the latent solvent cobamamide crude; by antisolvent crystallization method of cobamamide product preparation process to reduce impurities; effect; simple operation, low energy consumption, the product purity is higher than 99.5%, the total impurity is less than 0.5%, the yield is higher than 98%, the product stability to light and heat, high humidity increased significantly industrial production.

【技术实现步骤摘要】
一种腺苷钴胺晶型及其制备方法与应用
本专利技术涉及一种腺苷钴胺晶型及其制备方法与应用，属于结晶

技术介绍
腺苷钴胺(Cobamamide也称为Adocbl或CoenzymeB12，又称脱氧腺苷钴胺素)，为暗红色结晶或粉末，极具引湿性，见光极易分解。略溶于水，在乙醇中几乎不溶，在丙酮或乙醚中不溶。其化学名称为5,6-二甲基苯并咪唑基-5`-脱氧腺嘌呤核苷基钴胺，分子式为C72H100CoN18O17P，结构式如式1所示。目前，腺苷钴胺在国际上用作生化试剂和实验试剂，只在我国用作药品，已应用多年，腺苷钴胺原料药和片剂收载于中国药典2010版和2015版。腺苷钴胺早期主要用于治疗恶性贫血，亦可与叶酸合用，用于治疗各种巨幼细胞贫血，抗叶酸药引起的贫血等。近年来，腺苷钴胺适应范围不断扩展，被用于包括神经根炎，多发性神经炎、末梢神经炎、眼肌麻痹，肝病，癌症，慢性萎缩性胃炎，生殖系统疾病治疗等领域，在临床应用过程中展现了显著的治疗效果(①刘澜波.临床合理用药杂志,2017,10(2C):43-44.②鄂瑞芳.现代药物与临床,2017,32(1):46-50.)，是极具前景的多种疾病的治疗药物。腺苷钴胺在制备和存储过程中，易产生氰钴胺、羟钴胺等杂质(①杨洪淼.中国生化药物杂志,2015,35(6):157-164.②晏敏红.海峡药学,2013,25(8):62-65)，这些杂质与腺苷钴胺结构类似，同属于钴胺素类化合物。钴胺素类化合物易于形成类质同晶物(GruberGK.VitaminB12andB12-Proteins,Wiley-VCH,Wein-heim,1998,p335ff.)，也就是说杂质易于与腺苷钴胺共同结晶析出而难以除去。目前，有关腺苷钴胺的精制方法多采用树脂吸附的方法，而通过重结晶过程除去腺苷钴胺杂质具有极大的技术难度。我国药典2015版列出的腺苷钴胺原料药的要求是杂质含量不得高于1％，该杂质含量用于注射剂制备时，明显偏高，在我国对药品质量评价体系不断完善、评价标准不断提高的大背景下，寻找能够降低杂质的、操作简便的、符合绿色化学理念的精制方法具有重要的价值。围绕着降低腺苷钴胺杂质的目的，我们考察了不同的重结晶条件对降低杂质的影响，研究过程中发现了新的腺苷钴胺晶型，而且，发现该晶型的制备条件具有有效降低杂质的作用。腺苷钴胺具强的引湿性，因此，其与水分子的结合情况是需要首先考虑的问题。文献调研(①SavageH.ActaCrystallographica,1984,40(a1):C24-C24.②BouquiereJP.ActaCrystallographica,1993,49(1):79-89.③BouquiereJP.ActaCrystallographica,SectionB:structurescience,1994,B50(5):566-578.)证实，从丙酮-水混合溶剂中析出的腺苷钴胺以水合物的形式存在，1分子腺苷钴胺可结合17个水分子，这些水分子以两种形式存在，一种形式是有序水，这部分水分子有序排列于溶剂口袋中，另一种形式是无序水，这部分水分子无序排列于溶剂通道中(图1所示)。两种结合形式的水分子与腺苷钴胺的化学键的结合方式不同，因此，腺苷钴胺存在着分两次脱水的化学结构基础。通过实验和TG-DSC检测，发现腺苷钴胺在100℃以下脱去无序水，200℃以上脱去有序水，随后发生完全分解(图例可参看附图5)。有关腺苷钴胺晶体结构及晶型的研究现状如下：文献(MatternCFT.JournalofBiologicalChemistry,1960,235(2):489-491)报道了腺苷钴胺的单晶结构，该检测用的单晶的制备条件为：4℃，为含87.5％(体积)丙酮的水溶液。由于在X-射线下，光敏感的腺苷钴胺发生部分分解，因此所获得的数据需要较多的数学处理，获得的单晶为正交晶系P212121。然后，文献(OuyangL.InorganicChemistry2004,43,1235-1241)重新确定了从水与丙酮混合溶剂中得到的腺苷钴胺的单晶结构，其晶体为正交晶系P212121，但是，该文献未提供粉末衍射数据。我们重复该实验过程获得的腺苷钴胺晶体，其粉末衍射(P-XRD)图谱见图2，该晶体的X-射线粉末衍射在衍射角2θ＝6.9±0.1，7.9±0.1，9.8±0.1，13.2±0.1，14.3±0.1，16.2±0.1，18.1±0.1，19.0±0.1，20.1±0.1，21.2±0.1处有特征峰。为叙述方便，我们将其定义为A晶型腺苷钴胺。专利JP47022716公布于1972年，该专利公布了在17℃以上和17℃以下水中重结晶获得的腺苷钴胺的2个晶型。该专利提供了两个晶型和丙酮-水混合体系中获得的晶型的X-粉末衍射图谱，但是，图谱质量较差，仅能看出较强峰的特征。从该专利附图中可以看出，丙酮-水中结晶所获得结晶的粉末衍射主峰2θ＝6.9(强度100)，与晶型A最强峰一致，17℃以上结晶获得的晶型的粉末衍射主峰2θ＝9.1，17.0，17℃以下结晶获得的晶型的粉末衍射主峰2θ＝6.6，13.0。两个从单一溶剂水中析出的晶型的粉末衍射特征峰与本专利技术区别明显，且未涉及降低杂质的作用，故不再赘述。专利ZL104130303有关腺苷钴胺化合物及其药物组合物，提及一种从异丙醇、吡啶和乙醚的混合溶剂中获得的腺苷钴胺晶体，该专利说明书附上了粉末衍射图谱，同样采用Cu-Kα靶辐射，其衍射角2θ＝6.1±0.1，11.2±0.1，17.0±0.1，19.1±0.1，21.0±0.1，22.2±0.1，23.5±0.1处有特征峰。为叙述方便，我们将其定义为B晶型腺苷钴胺。综上所述，目前，已经报道了从混合溶剂中析出了两种腺苷钴胺晶型，晶型A从丙酮-水混合溶剂中析出，该晶型为人们认识已久，但是对光、热、酸碱均不稳定。晶型B的稳定性较晶型A得到了提高，但其制备过程(ZL104130303)存在着三个不足之处：(1)采用吡啶和乙醚做溶剂，吡啶气味浓烈，有强烈刺激性，能麻醉中枢神经系统，高浓度吸入后，对人体产生严重危害，且吡啶沸点较高，为115℃，难以除去，会带来溶剂残留问题。另一溶剂乙醚极易挥发，存放时易产生过氧化物，使用时易导致操作人员产生麻醉症状，安全隐患问题严重。(2)制备过程需要3～6分钟降温至-15～-10℃，在-15℃静置10～12小时。需要降温和低温操作。(3)在重复该专利方法时，发现腺苷钴胺原料并未完全溶解，实验过程几乎无降低杂质的作用。杂质的研究及控制是确保药品安全的关键要素之一，是药品研发中尤其是注射剂研发过程中风险控制意识的重要体现，目前，我国2015版药典规定的腺苷钴胺原料药杂质含量不超过1％，市售腺苷钴胺的杂质含量普遍大于0.7％，存着在通过进一步的精制，达到降低杂质的空间。我们通过重结晶技术的研究，获得了一种以较高收率获得新的晶型且进一步降低腺苷钴胺杂质的方法，目前，尚未有类似方法的报道。
技术实现思路
为了解决现有技术的问题，本专利技术的第一个目的提供一种腺苷钴胺新晶型，所获得的新晶型稳定性得到提高，更有利于产品的存贮和降低后续的制剂难度。本专利技术的第二个目的是在于提供一种有较高收率的、条件温和的新本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种腺苷钴胺晶型，其特征是单晶结构为单斜晶系P21；X‑射线粉末衍射在衍射角2θ＝5.1±0.1，6.3±0.1，7.0±0.1，7.6±0.1，8.0±0.1，8.6±0.1，9.4±0.1，13.2±0.1，13.8±0.1，15.0±0.1，17.5±0.1，19.1±0.1，21.4±0.1，23.5±0.1，25.3±0.1处有特征峰。

【技术特征摘要】
1.一种腺苷钴胺晶型，其特征是单晶结构为单斜晶系P21；X-射线粉末衍射在衍射角2θ＝5.1±0.1，6.3±0.1，7.0±0.1，7.6±0.1，8.0±0.1，8.6±0.1，9.4±0.1，13.2±0.1，13.8±0.1，15.0±0.1，17.5±0.1，19.1±0.1，21.4±0.1，23.5±0.1，25.3±0.1处有特征峰。2.如权利要求1所述的晶型，其特征是DSC图谱分析结果显示，在210±2℃出现特征吸热峰。3.如权利要求1所述的腺苷钴胺晶型的制备方法，其特征在于，采用潜溶剂-反溶剂重结晶法，步骤如下：(1)采用潜溶剂溶解腺苷钴胺粗品；红灯照明条件下；室温，将腺苷钴胺粗品加入到5-7倍质量的水中，搅拌5-30分钟至糊状，保持搅拌，向上述糊状物中加入潜溶剂，观察到10min内，腺苷钴胺完全溶解，得到澄清溶液；...

【专利技术属性】
技术研发人员：李雯，刘宏民，郭姗姗，施秀芳，可钰，杨晨，周照青，李鹏坤，李宏，
申请(专利权)人：郑州大学，江苏九旭药业有限公司，
类型：发明
国别省市：河南,41