本发明专利技术公开了环孢菌素类似物ＩＳＡ２４７的分离的代谢物及其体外制备方法。所述代谢物含有对ＩＳＡ２４７的化学修饰，其中该修饰为选自以下的至少一个反应：羟基化、Ｎ－脱甲基化、二醇形成、环氧化物形成和分子内环化、磷酸化、硫酸化、葡糖苷酸形成和糖基化。制备方法包括半合成方法，其中ＩＳＡ２４７代谢物从动物肝细胞微粒体提取物制造或从使用微生物的培养物制造，以及还包括完全合成法，例如使用有机合成方法化学修饰母体化合物或分离的代谢物。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及ISA247或ISATx247 (环孢菌素A的衍生物)的分离的代 谢物。本专利技术还涉及制造和分析分离的ISA247代谢物的方法。参考文献美国专利号No. 6，605，593 美国专利号No. 6，613，739 美国2003/0212249。 国际公开号WO 99/18120 国际公开号WO 03/033527 国际公开号WO 2003/033526 国际公开号WO 2003/033527Brown, H.C等，爿附.CTiem. 5bc. vol 110， p 1535 (1988).Christians,等"Cyclosporine Metabolism in Transplant Patients;"尸Aarmac. L vol 57, pp 291-345 (簡).Eberle M.K.禾卩F. Nuninger, "Synthesis of the main metabolite (OL-17) of cyclosporin A," Og. CA缀Vol. 57, No. 9， pp. 2689-2691 (1992).Hartman, N. R.禾口 I. Jardine "Mass Spectrometric Analysis of Cyclosporine Metabolites," J5/ome<i. ￡"wvz>ow. Maw 5^e"ro附.Vol. 13, pp. 361-372 (1986). Hu等，J. Org. Chem. vol 63, p 8843 (1998).Johnson, R.A.,禾B Sharpless, K.B; Catalytic Asymmetric Synthesis: Edited by I. Ojima; VCH Publishers: New York; 1993; p. 103Keown, P.A.， "Molecular and Clinical Therapeutics of Cyclosporine in Transplantation" in /mwww(ww/ presw'ow z>z 7Va w/7/aw^zriow (Blackwell Science, Maiden MA, 1999), pp. 1-12.Marshall, J.A. C/zem i ev. vol 96, p 31(1996).Barrett, A.G.M.等，J Og. CTjem. vol 56, p 5243 (1991).Sharpless， K.B.等，J. Og. CAe肌vol 57, p 2768 (1992).Wenger, KM. "Synthesis of Cyclosporine and Analogs: Structural Requirements for Immunosuppressive Activity," CAem嵐￡"<i. ￡Vzg7.Vol. 24, No. 2， pp. 77-138. (1985).
技术介绍
环孢菌素是具有有效免疫抑制剂活性的环多肽家族的一个成员。至少 部分这类化合物(如环孢菌素A)是由物种ro/y/ oc/aAMmZw/7^wm Gams作为次级代谢物产生的。作为一种免疫抑制剂，环孢菌素被证明能抑制体 液免疫和细胞介导的免疫反应，如同种异体移植物排斥、迟发型超敏反 应、实验性变应性脑脊髓炎、Freund，s佐剂关节炎和移植物抗宿主疾病。 其被用于在器官移植中预防器官排斥；以及用于治疗类风湿性关节炎和用 于治疗银屑病。尽管环孢菌素家族中大量化合物是已知的，环孢菌素A可能是医学应 用最为广泛的。环孢菌素A的免疫抑制效应涉及对T细胞介导的激活作用 的抑制。免疫抑制通过环孢菌素与被称为亲环蛋白的普遍存在的细胞内蛋白结合来完成。该复合物依次抑制钙依赖磷酸酶的钙和钙调蛋白依赖性丝 氨酸-苏氨酸磷酸酶活性。对钙依赖磷酸酶的抑制阻止转录因子如NFATp/c和NF-kB的激活，所述转录因子对于T细胞激活中细胞因子基因(/丄-入 /F,7、 /￡-4f/7GM-CSF)的诱导是必需的。环孢菌素还抑制T辅助细胞体外对淋巴因子的生产，并阻止胸腺中成 熟CD8和CD4细胞的发育。环孢菌素的其它体外特性包括抑制产生IL-2 的T淋巴细胞和细胞毒性T细胞，抑制由激活的T细胞释放的IL-2，抑制 应答异型抗原和外源淋巴因子的静止(resting) T淋巴细胞，抑制IL-1产 生和抑制产生IL-2的T淋巴细胞的促分裂原激活。尽管环孢菌素具有有利的免疫抑制、抗炎症和抗寄生虫效应，环孢菌 素A治疗涉及到大量不良作用。这些作用包括肾毒性、肝毒性、致白内 障、多毛症、pamthesis和牙龈增生(仅列出部分)。其中，肾毒性是由环 孢菌素给药引起的最为严重的剂量相关副作用之一。立即释放环孢菌素A 药物产品(例如Neoral⑧和Sandimmune )可引起肾毒性和其它毒性副作 用，因为它们快速释放进血流中，并产生快速释放的后果一一高浓度。尽 管环孢菌素A引起肾损伤的精确机制是未知的，但已提出提高肾中血管 收縮物质的水平引起传入血管小球微动脉的收縮。这可引起肾缺血、肾小 球滤过率的降低和长时间时引起间质纤维化。因此，需要这样一种免疫抑制剂其药理学效力与天然存在的环孢菌 素A化合物相当，但是具有降低的毒性副作用。自从最初发现环孢菌素以来，已经分离和鉴定了大量天然存在的环孢 菌素。另外，已经通过部分或完全合成手段和应用改造的细胞培养技术制 备了许多并非天然存在的环孢菌素。因此，该分类包含实质上的环孢菌 素，并包括例如天然存在的环孢菌素A到Z;多种非天然存在环孢菌素衍 生物；人工的或合成的环孢菌素，包括二氢环孢菌素和异环孢菌素；衍生的环孢菌素(例如MeBmt残基的3'-0-原子可被酰化，或3-位置上十二烷 基肌氨酸钠残基上可引入其它取代基)；其中MeBmt残基以异构形式存 在的环孢菌素(例如其中MeBmt残基位置6'和7'间的构型为顺式而非反 式)；和其中肽序列中特定位置上并入变异氨基酸的环孢菌素。在位置1含有修饰的氨基酸的环孢菌素类似物公开于WO 99/18120和 WO03/033527中，其被转让给本申请的受让人，其整体通过引用并入本 文。这些申请文件描述了称为"ISATX247"或"ISA247"或"ISA"的环 孢菌素衍生物。该类似物除了氨基酸-l残基上的修饰外，结构上与环孢菌 素A相同。申请人先前发现ISA247的顺式和反式异构体的某些混合物(包括主要包含反式ISA247的混合物)与天然存在和目前已知的环孢菌 素相比，显示组合了加强的效力和降低的毒性。也已公开ISA247某些垸 基化的、芳基化的和気化的衍生物。已经研究了环孢菌素A的代谢物，并在一些情况下发现其具有与母体 药物同样有力的效用。另外，已使用代谢物制造识别这些代谢物的抗体。 这些抗体可用于监测患者血(治疗药物监测或TDM)中的药物数量。特 异识别代谢物的抗体可通过结合代谢物用于进行这些TDM检测，所述代 谢物可以其它方式引起患者血中药物数量的错误高计算。因此，本领域需 要鉴定和分离ISA247代谢物，以及用于制备本文档来自技高网...
【技术保护点】
由下式代表的分离的化合物及其药学可接受盐和溶剂化物，＊＊＊其中：各Ｒ↑［２］独立地为－Ｈ或－ＣＨ↓［３］；各Ｒ↑［１０］独立地为－Ｈ、－ＯＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ、－ＣＮ、－ＮＯ↓［２］、－ＯＲ↑［ａ］、－Ｃ（Ｏ）Ｒ↑［ａ］、－ＯＣ（Ｏ）Ｒ↑［ａ］、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ↑［ａ］、－Ｓ（Ｏ）Ｒ↑［ａ］、－ＳＯ↓［２］Ｒ↑［ａ］、－ＳＯ↓［３］Ｒ↑［ａ］、－ＯＳＯ↓［２］Ｒ↑［ａ］、－ＯＳＯ↓［３］Ｒ↑［ａ］、－ＰＯ↓［２］Ｒ↑［ａ］Ｒ↑［ｂ］、－ＯＰＯ↓［２］Ｒ↑［ａ］Ｒ↑［ｂ］、－ＰＯ↓［３］Ｒ↑［ａ］Ｒ↑［ｂ］、－ＯＰＯ↓［３］Ｒ↑［ａ］Ｒ↑［ｂ］、－Ｎ（Ｒ↑［ａ］Ｒ↑［ｂ］）、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ↑［ａ］Ｒ↑［ｂ］）、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ↑［ａ］ＮＲ↑［ｂ］ＳＯ↓［２］Ｒ↑［ｃ］、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ↑［ａ］ＳＯ↓［２］Ｒ↑［ｃ］、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ↑［ａ］ＣＮ、－ＳＯ↓［２］Ｎ（Ｒ↑［ａ］Ｒ↑［ｂ］）、－ＳＯ↓［２］Ｎ（Ｒ↑［ａ］Ｒ↑［ｂ］）、－ＮＲ↑［ｃ］Ｃ（Ｏ）Ｒ↑［ａ］、－ＮＲ↑［ｃ］Ｃ（Ｏ）ＯＲ↑［ａ］或－ＮＲ↑［ｃ］Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ↑［ａ］Ｒ↑［ｂ］）；Ｒ↑［５］、Ｒ↑［６］、Ｒ↑［７］、Ｒ↑［８］和Ｒ↑［９］独立地为－Ｈ、－ＯＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ、－ＣＮ、－ＮＯ↓［２］、－ＯＲ↑［ａ］、－Ｃ（Ｏ）Ｒ↑［ａ］、－ＯＣ（Ｏ）Ｒ↑［ａ］、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ↑［ａ］、－Ｓ（Ｏ）Ｒ↑［ａ］、－ＳＯ↓［２］Ｒ↑［ａ］、－ＳＯ↓［３］Ｒ↑［ａ］、－ＯＳＯ↓［２］Ｒ↑［ａ］、－ＯＳＯ↓［３］Ｒ↑［ａ］、－ＰＯ↓［２］Ｒ↑［ａ］Ｒ↑［ｂ］、－ＯＰＯ↓［２］Ｒ↑［ａ］Ｒ↑［ｂ］、－ＰＯ↓［３］Ｒ↑［ａ］Ｒ↑［ｂ］、－ＯＰＯ↓［３］Ｒ↑［ａ］Ｒ↑［ｂ］、－Ｎ（Ｒ↑［ａ］Ｒ↑［ｂ］）、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ↑［ａ］Ｒ↑［ｂ］）、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ↑［ａ］ＮＲ↑［ｂ］ＳＯ↓［２］Ｒ↑［ｃ］、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ↑［ａ］ＳＯ↓［２］Ｒ↑［ｃ］、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ↑［ａ］ＣＮ、－ＳＯ↓［２］Ｎ（Ｒ↑［ａ］Ｒ↑［ｂ］）、－ＳＯ↓［２］Ｎ（Ｒ↑［ａ］Ｒ↑［ｂ］）、－ＮＲ↑［ｃ］Ｃ（Ｏ）Ｒ↑［ａ］、－ＮＲ↑［ｃ］Ｃ（Ｏ）ＯＲ↑［ａ］或－ＮＲ↑［ｃ］Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ↑［ａ］Ｒ↑［ｂ］）；或Ｒ↑［６］和Ｒ↑［７］一起为－Ｏ－；或Ｒ↑［５］和Ｒ↑［６］一起或Ｒ↑［７］和Ｒ↑［８］一起，为独立的－Ｏ－；或Ｒ↑［８］和Ｒ↑［９］一起为－Ｏ－；或Ｒ↑［５］、与其结合的碳一起为－...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：马克D亚伯，罗伯特T福斯特，迪瑞克G弗瑞塔格，丹尼尔J特拉帕尼尔，信苏基亚玛，斯塔尔曼加亚拉曼，兰德尔W亚特斯科夫，
申请(专利权)人：伊素制药公司，
类型：发明
国别省市：CA[加拿大]
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。