畜禽用三元活性微生态制剂制造技术

一种用作饲料添加剂的畜禽用三元活性微生态制剂，其重量份组成是：活菌制剂９４％－９８％、低聚寡糖０．１％－１％、卵黄免疫球蛋白１％－５％；所述活菌制剂由植物乳杆菌液、酵母菌液、芽孢杆菌液按１∶０．９－１．１∶０．９－１．１之重量比组成，且每克植物乳杆菌液中含植物乳杆菌≥８×１０↑［８］个，每克酵母菌液中含酵母菌≥７×１０↑［８］个，每克芽孢杆菌液中含芽孢杆菌≥４×１０↑［８］个。本发明专利技术充分发挥了抗体球蛋白的特异性免疫功能和活菌剂、低聚寡糖的非特异性免疫功能，提高了制剂的针对性；还使活菌处于休眠状态，提高了制剂的稳定性；并采用微胶囊包埋技术，延长了制剂的货架期。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及畜禽用饲料添加剂，进一步是指用做所述添加剂的畜禽用三元活性微生态制剂。
技术介绍
抗生素在畜禽养殖业的应用，为世界畜牧业的发展做出了巨大的贡献，然而也带来了极大的隐患第一，引起内源性感染和二重感染；第二，使畜禽机体免疫力下降，细胞产生耐药性，并通过质粒发生传递，可转移到人体，威胁人类身体健康；第三，化学残留会污染肉、蛋、奶，降低畜禽产品的质量。因此，世界发达国家已于1989年开始全面禁止抗生素在饲料中的应用。为了克服抗生素的各种弊端，世界各国先后开展了无毒副作用、无残留的绿色饲料添加剂的研究，而在其研究与开发过程中，首选研究的是微生态制剂。微生态制剂是一种含有大量有益菌及其代谢产物和生长促进因子，并且有维持肠道微生态平衡、提高机体健康水平的活菌制剂。免疫球蛋白是动物机体产生的抗感染物质，近年来，国外研究证明，在日粮中添加多克隆抗体，可以预防仔猪和牛犊的大肠杆菌腹泻症。美国食品和药品管理局于1996年将卵黄免疫球蛋白(Igy)列入“一般公认安全物质”范畴，德国于1995年批准将其用于饲料添加剂。微生态制剂这种新型的生物产品，虽然正在以其独特的功能影响日益发展的畜牧业，但还存在许多有待进一步研究问题第一，针对性不强，不如抗生素那样可针对某种肠道疾病而采用相应的产品，针对性很强地进行治疗；第二，微生态制剂菌株的稳定性不高，如活菌剂的抗热性、耐酸性等抵抗外界不良环境的能力低；第三，微生态制剂产品的货架期不长，随着贮存期的增加，活菌数量逐步降低。从国外开发和使用效果看，复合菌制剂较单一菌剂作用效果更好，复合菌制剂一般都具有协同作用。为了提高微生态制剂的有效性，人们正着力于微生态制剂辅助剂的研制与开发。如对低聚寡糖与活菌制剂复合添加的试验，取得一定效果；同时也在开发和研究活菌剂与其他制剂间的联合作用。目前国外还在研究通过基因工程技术，把一些有用的外源基因导入活菌制剂的菌种中，扩大其生物学特殊功能，从而达到一种制剂多种功能的目的。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是，针对现有技术存在的不足，提出一种畜禽用三元活性微生态制剂，它将活菌制剂、低聚寡糖、抗体球蛋白有机地结合起来，以充分发挥抗体球蛋白的特异性免疫功能和活菌剂、低聚寡糖的非特异性免疫功能，以提高了微生态制剂的针对性；还可采用低温真空冷冻干燥技术，将活菌剂制成干粉，使活菌处于休眠状态，以提高微生态制剂的稳定性；还可采用微胶囊包埋技术，将三元活性制剂包埋起来，以延长微生态制剂的货架期。本专利技术的技术解决方案是，所述畜禽用三元活性微生态制剂的重量份组成是活菌制剂 94％-98％；低聚寡糖 0.1％-1％；卵黄免疫球蛋白 1％-5％； 其中，所述活菌制剂由植物乳杆菌液、酵母菌液、芽孢杆菌液按1∶0.9-1.1∶0.9-1.1之重量比组成，且每克植物乳杆菌液中含植物乳杆菌≥8×108个，每克酵母菌液中含酵母菌≥7×108个，每克芽孢杆菌液中含芽孢杆菌≥4×108个。以下对本专利技术做出进一步说明。所述低聚寡糖可以是低聚木糖、低聚果糖、低聚甘露中的一种，也可以是其它低聚寡糖。本专利技术可以上述三元活性微生态制剂的有效成份为芯材，以下述重量份成分的均匀混合物为壁材变性淀粉35％-45％；阿拉伯胶10％-20％；麦芽糊精20％-30％；玉米糖桨15％-25％；将上述芯材与壁材按1∶0.9-1.1之重量比混合均质后，经常规低温喷雾工艺制成微胶囊状态产品。本专利技术中，所述活菌制剂可采用如下重量份组分的培养基主体碳源 5％-9％； 葡萄糖 1％-3％；蛋白胨 0.4-0.6％； 植物油 0.2-0.4％；K2HPO40.1-0.3％； CaCo31％-3％；MgSO40.05-0.07％； MnSO40.02-0.03％；水 84％-90％；其中，所述主体碳源为土豆粉、大豆粉、玉米粉中的一种，并植入相应菌种，每克菌液中的菌种含量是植物乳杆菌≥8×108个、酵母菌≥7×108个、芽孢杆菌≥4×108个。本专利技术中，猪用三元活性微生态制剂主体碳源可采用土豆粉，鸡用三元活性微生态制剂主体碳源可采用大豆粉，反刍动物三元活性微生态制剂主体碳源可采用玉米粉。本专利技术对所述植物乳杆菌(PC0586-2)、枯草芽孢杆菌(BL0067)、产朊假丝酵母菌(2.120)进行了单一菌株培养温度、培养时间、培养初始PH值、需氧量、培养基组成等生产工艺参数进行了研究，并且对它们的复合培养进行工艺参数的修正。结果表明三种菌达到产量最高值的时间是48-54小时，酵母菌的发酵最适温度为32℃，芽孢杆菌为38℃，乳酸菌为36℃，最适温度各不相同，因此，复合培养时，分两阶段进行，第一阶段温度32℃，第二阶段温度31℃，时间各半(28小时)。三种菌的最初培养PH值分别为乳酸菌5.6，酵母菌5.8，芽孢杆菌6.0。因此，复合发酵时PH值要控制在6.0左右。三种菌发酵过程的需氧量各不相同，乳酸菌是以厌氧呼吸为主的兼性菌，酵母菌和芽孢杆菌是好氧呼吸的菌种。因此，复合培养分两步进行，第一阶段(前28小时)培养时，通气1小时停2小时，第二阶段通气2小时停1小时。本专利技术中，所述植物乳杆菌、酵母菌、芽孢杆菌可采用标准菌株，也可通过以下菌种分离筛选获得取畜禽肠道或土壤样品，稀释后通过富集驯化培养、选择培养、平板(划线)分离培养、菌落采集、纯化继代分离培养、生产试验培养、定性定量分析等步骤，从126份猪肠、鸡肠、牛瘤胃样品，近2万株菌株中，分离筛选出一株高产乳酸的植物乳杆菌(暂编号为PC0586)乳酸产量90.7g/L，比标准菌株(中国科学院微生物菌种保存中心提供，乳酸产量为78g/L)乳酸产量高16％。从27份土壤样品，近4000株菌株中，分离筛选出一株抑菌能力很强的枯草芽孢杆菌变异株，暂编号为BL0067。与标准菌株(中国科学院微生物菌种保存中提供)比较，抑菌能力提高31％。本专利技术还可采用紫外对上述育出的植物乳杆菌PC0586进行诱变处理，处理剂量为成活率1％以下。紫外线波长为260nm左右，紫外灯功率为15W，距离固定在样品30nm高处。诱变时间0-72h。从2000余份材料中，选育出一株高产乳酸的植物乳杆菌，乳酸产量达到了130g/L，对糖的转化率为86％-90％，而且表现较好的遗传稳定性。该菌株暂定名为PC0586-1。本专利技术还可用基因工程对所述菌种进行遗传改良。其中，转体高产赖氨酸的棒杆菌(AS1.536)由中国科学院微生物研究所菌种保存中心提供，各种DNA的内切酶、赖氨酸合成途径中的关键酶基因二氢吡啶二羧酸合成酶基因(dapA)由湖南农业科学院生物研究室提供；受体可采用诱变育种选育出的植物乳杆菌PC0586-1。载体大肠杆菌。利用重组DNA的基因工程技术将棒杆菌(AS1.563)赖氨酸合成途径中的关键酶基因-二氢吡啶二羧酸合成酶基因(dapA)，采用随机整合法，以大肠杆菌作为载体，成功地导入了目标菌株植物乳杆菌PC0586-1，培养出一株基因工程菌株，暂编号为PC0586-2。结果表明，外源质粒转化率高，能在目标菌中长期保存，且高水平表达。使无蛋白质分解酶的植物乳杆菌能合成赖氨酸，并且产量达到了27g/L，应用到生产中，起到了既高产乳酸，又能产生赖氨酸的双重作用。微生态制剂是近十年本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种畜禽用三元活性微生态制剂，其特征是，它的重量份组成是：活菌制剂９４％－９８％；低聚寡糖０．１％－１％；卵黄免疫球蛋白１％－５％；其中，所述活菌制剂由植物乳杆菌液、酵母菌液、芽孢杆菌液按１∶０． ９－１．１∶０．９－１．１之重量比组成，且每克植物乳杆菌液中含植物乳杆菌≥８×１０↑［８］个，每克酵母菌液中含酵母菌≥７×１０↑［８］个，每克芽孢杆菌液中含芽孢杆菌≥４×１０↑［８］个。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：罗赫荣，龚章霞，张秋胜，梁志怀，
申请(专利权)人：湖南中业科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：43[中国|湖南]