一种高包封率和高稳定性的羟基积雪草苷脂质体及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开一种高包封率和高稳定性的羟基积雪草苷脂质体及其制备方法与应用。该脂质体包括羟基积雪草苷和脂质成分；所述脂质体具有复乳结构，所述羟基积雪草苷包封于脂质体中；本发明专利技术制备的脂质体包封率大于70％且稳定性大于2年，粒径100～300nm；所述羟基积雪草苷的质量占总质量的0.1～60％，所述脂质成分的质量占总质量的10～90％。该脂质体具有长效缓释作用，有利于发挥抑菌、消炎、促进成纤维细胞再生作用，促进伤口的愈合；且可有效透过表皮，从而使得更多的成分停留在真皮层，使其生物利用率更高，药效更为显著。本发明专利技术方法制备工艺简单，易于放大，对于以后大规模医药生产及其潜在的医疗用途具有广阔的应用前景。

A high encapsulation efficiency and high stability hydroxy asiaticoside liposome and its preparation and Application

【技术实现步骤摘要】
一种高包封率和高稳定性的羟基积雪草苷脂质体及其制备方法与应用
本专利技术属于药物制剂、皮肤护理用品和日化领域，具体涉及一种乳剂法制备羟基积雪草苷脂质体的方法及其在医药方面的应用。
技术介绍
皮肤是人体最大的器官，是保护人体的第一道屏障。根据细胞的不同发育阶段和形态特征，由外向内可分为5层，分别是角质层、透明层、颗粒层、棘细胞层和基底层。其中角质层是由数层角化细胞组成，能抵抗机械摩擦，并且还能够防止体液外渗，以及病毒和化学物质的内侵。皮肤损伤会影响外形美观、生活运动，严重深层的和大面积的皮肤损伤可导致局部坏死，甚至并发炎症进而威胁生命。羟基积雪草苷(Madecassoside，MA)是积雪草提取物中的水溶性皂苷，在临床上广泛应用于治疗手术创伤、烫伤、烧伤等皮肤创伤，具有抑菌、消炎、促进成纤维细胞再生等多种药理作用。在应用于皮肤疤痕修复和伤口治疗时，由于羟基积雪草苷是极性大分子物质，不容易透过皮肤表皮到达病变部位，所以使其作用以及应用受到很大的限制，不利于药效的发挥。脂质体(liposome)是一种人工膜，是磷脂分子分散在水中形成包封水相的类球状双层脂分子的封闭囊泡，直径20nm至几十微米。脂质体具有许多独特的物理、化学性质，它由磷脂在水中自发形成，制备工艺简单，在人体内具有无毒、无免疫原性、可降解、缓释、靶向等特点，脂质体广泛作为药物载体可用于转基因技术，或制备药物，利用脂质体可以与细胞膜融合的特点，将药物送入细胞内部或组织间隙。脂质体可以靶向皮肤，将药物包裹在纳米脂质体内，能够解决羟基积雪草苷水溶性大分子药物难以直接透过皮肤的问题，以增强药物透过皮肤的能力，将药物递送至病变部位充分发挥药效，利于疤痕修复和皮肤伤口的有效愈合。
技术实现思路
为了克服现有技术的缺点与不足，本专利技术的首要目的在于提供一种高包封率和高稳定性的羟基积雪草苷脂质体。为更好地发挥疤痕修复和促进伤口愈合的功效，本专利技术针对羟基积雪草苷(MA)水溶性极性分子，提供一种包封率高、稳定性好的脂质体。本专利技术所述的脂质体采用纳米脂质体制备技术，使羟基积雪草苷包封在脂质体中。所述羟基积雪草苷脂质体具有长效缓释作用，有利于发挥抑菌、消炎、促进成纤维细胞再生作用，促进伤口的愈合；另一方面，该脂质体可有效透过表皮，从而使得更多的成分停留在真皮层，使其生物利用率更高，药效更为显著。本专利技术的另一目的在于提供上述羟基积雪草苷脂质体的制备方法。本专利技术的再一目的在于提供上述羟基积雪草苷脂质体的应用。本专利技术的目的通过下述技术方案实现：一种高包封率和高稳定性的羟基积雪草苷脂质体，所述脂质体包括羟基积雪草苷和脂质成分；所述脂质体具有复乳结构，所述羟基积雪草苷包封于脂质体中；本专利技术制备的脂质体包封率大于70％且稳定性大于2年，粒径100～300nm；所述羟基积雪草苷的质量占羟基积雪草苷脂质体总质量的0.1～60％，所述脂质成分的质量占羟基积雪草苷脂质体总质量的10～90％；优选的，所述的脂质体包封率为70.2～95％，更优选为70.2～78％。优选的，所述羟基积雪草苷的质量占羟基积雪草苷脂质体总质量的1.64～35.29％，所述脂质成分的质量占羟基积雪草苷脂质体总质量的29.41～70％；所述的脂质成分优选为磷脂，包括天然磷脂或合成磷脂，具体包括蛋黄卵磷脂。上述高包封率和高稳定性的羟基积雪草苷脂质体的制备方法，包括如下步骤：(1)按一定的质量比称取脂质成分与胆固醇溶解于有机溶剂中，加入适量抗氧化剂，溶解并混合均匀，制成有机相溶液；(2)将含羟基积雪草苷的水相溶液加入至步骤(1)制得的有机相溶液中，搅拌，形成W/O乳剂，或者将上述W/O乳剂再加入到第二水相中，搅拌，形成W/O/W复乳；(3)将(2)中的W/O乳剂或W/O/W复乳减压蒸发除去有机溶剂，再真空干燥除去乳液中的剩余有机溶剂，过滤膜，制得具有高包封率和高稳定性的羟基积雪草苷脂质体溶液，并置于4℃下保存。优选的，步骤(1)中所述的脂质成分为磷脂，包括天然磷脂或合成磷脂；所述抗氧化剂可以是维生素C或维生素E醋酸酯；脂质成分与胆固醇的质量比为1:1～10:1，优选比例5:1；有机溶剂可以是二氯甲烷、三氯甲烷、正己烷、环己烷、乙醚等，优选二氯甲烷。优选的，步骤(1)中所述的有机相溶液中胆固醇的浓度为10～50mg/mL，优选为10mg/mL。优选的，步骤(2)中所述水相或第二水相为含有羟基积雪草苷水溶液或PBS溶液，浓度为1～160mg/mL，优选为1～40mg/mL，最优选20mg/mL；搅拌时间为1～30min，优选3分钟；搅拌转速100～1000rpm，优选500rpm；复乳法第二次搅拌时间1～30min，优选5分钟；搅拌转速100～1000rpm，优选500rpm。优选的，步骤(3)中所述滤膜的孔径为0.22～1μm，优选为0.22～0.45μm，更优选0.22μm；通过W/O乳剂制备的羟基积雪草苷脂质体优选油性滤膜，通过W/O/W复乳制备的羟基积雪草苷脂质体优选水性滤膜。上述高包封率和高稳定性的羟基积雪草苷脂质体在药物制剂或护肤化妆品
的应用；优选的，上述羟基积雪草苷脂质体在制备治疗皮肤烫伤、皮肤切割伤、粘膜损伤或瘢痕的透皮或粘膜吸收药物制剂中的应用；优选的，上述羟基积雪草苷脂质体在制备用于疤痕修复、深层皮肤受损或抗衰老抗氧化或美白养颜的护肤化妆品中的应用。本专利技术相对于现有技术具有如下的优点及效果：(1)本专利技术所述的脂质体在制备工艺简单易操作，包封率大于70％，真实载药量大于5％，粒径分布在100～300nm，14天昆明小鼠(n＝7)皮肤割伤实验结果显示，羟基积雪草苷脂质体组的愈合效果明显优于羟基积雪草苷水溶液组。本专利技术以乳化法制备出的羟基积雪草苷脂质体稳定性极好，通过为期2年的观察，无论是从外观，还是微观，始终保持均一稳定状态。重点解决了目前脂质体的包封率低、粒径大、稳定性差等问题；(2)本专利技术还解决了极性大分子羟基积雪草苷难以直接透过皮肤的问题，使其直接持久地对伤口病变部位发挥治疗作用。本专利技术所述的羟基积雪草苷脂质体经皮给药系统与普通皮肤局部应用制剂相比，具有长效缓释的特点和优势，包载羟基积雪草苷的脂质体易于透过角质层后，可以在表皮、真皮内形成药物贮库，使药物缓慢释放。(3)与薄膜分散法和乙醇注入法相比，具有更好的稳定性(大于2年)和更高的包封率(大于70％)。本专利技术采用乳化法制备羟基积雪草苷脂质体，可提高透皮效果，尤其是其缓释作用延长羟基积雪草苷在皮肤的作用时间。本专利技术方法制备工艺简单，易于放大，对于以后大规模医药生产及其潜在的医疗用途具有广阔的应用前景。附图说明图1是羟基积雪草苷脂质体的粒径大小分布图。图2是三种脂质体稳定性考察(2年内宏观与微观的变化)：A.0天，B.1个月，C.1年，D.2年；a.复乳法脂质体，b.薄膜分散法脂质体，c.乙醇注入法脂质体。图3是生理盐水对照组、MA水溶液组和MA脂质体组小鼠皮肤割伤愈合效果对比图。具体实施方式下面结合实施例及附图对本专利技术作进一步详细的描述，但本专利技术的实施方式不限于此。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本专利技术内。实施例1(1)称取蛋黄卵磷脂0.50g、胆固醇0.10g、VE醋酸酯0.1g溶本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种高包封率和高稳定性的羟基积雪草苷脂质体，其特征在于所述脂质体包括羟基积雪草苷和脂质成分；所述脂质体具有复乳结构，所述羟基积雪草苷包封于脂质体中；所述的脂质体包封率大于70％且稳定性大于2年，粒径100～300nm；所述羟基积雪草苷的质量占羟基积雪草苷脂质体总质量的0.1～60％，所述脂质成分的质量占羟基积雪草苷脂质体总质量的10～90％。

【技术特征摘要】
1.一种高包封率和高稳定性的羟基积雪草苷脂质体，其特征在于所述脂质体包括羟基积雪草苷和脂质成分；所述脂质体具有复乳结构，所述羟基积雪草苷包封于脂质体中；所述的脂质体包封率大于70％且稳定性大于2年，粒径100～300nm；所述羟基积雪草苷的质量占羟基积雪草苷脂质体总质量的0.1～60％，所述脂质成分的质量占羟基积雪草苷脂质体总质量的10～90％。2.根据权利要求1所述的高包封率和高稳定性的羟基积雪草苷脂质体，其特征在于：所述的脂质成分为磷脂。3.权利要求1或2所述的高包封率和高稳定性的羟基积雪草苷脂质体的制备方法，其特征在于包括如下步骤：(1)按一定的质量比称取脂质成分与胆固醇溶解于有机溶剂中，加入适量抗氧化剂，溶解并混合均匀，制成有机相溶液；(2)将含羟基积雪草苷的水相溶液加入至步骤(1)制得的有机相溶液中，搅拌，形成W/O乳剂，或者将上述W/O乳剂再加入到第二水相中，搅拌，形成W/O/W复乳；(3)将(2)中的W/O乳剂或W/O/W复乳减压蒸发除去有机溶剂，再真空干燥除去乳液中的剩余有机溶剂，过滤膜，制得具有高包封率和高稳定性的羟基积雪草苷脂质体溶液。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，所述的脂质成分与胆固醇的质量比为1:1～1...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘美凤，鄢豪，
申请(专利权)人：华南理工大学，
类型：发明
国别省市：广东,44