水解积雪草苷制备积雪草酸的方法技术

本发明专利技术公开了一种水解积雪草苷制备积雪草酸的方法，包括以下步骤：1)将积雪草苷、十二烷基硫酸钠和NaOH混合，加水溶解，在常温下水解10～15min；2)调节水解液pH值至2～5，静置，过滤，收集沉淀；3)将沉淀溶于乙醇中，过滤，将滤液加水进行结晶，过滤，得到结晶，烘干，即得成品。该方法在常温常压下即可快速断开糖苷键，水解过程温和，水解彻底，且不会产生积雪草酸的构型变化。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物提取
，具体涉及一种水解积雪草苷制备积雪草酸的方法。
技术介绍
积雪草(Centellaasiatica(L.)Urban)为伞形科积雪草树植物，因其叶子酷似马蹄状或半个铜钱，所以又名马蹄草、连钱草等，民间也有地方称其为胡薄荷、地钱草等。积雪草在许多国家和地区的传统医药领域中的应用历史悠久，我国中医中药对积雪草的内服和外用已有两千年历史，最早被《神农本草经》一书所收载。据《本草纲目》记载，积雪草味苦、辛，性寒，无毒，归肝、脾、肾、胃经，其功效为活血、消肿止痛，并有清热解毒、利尿等。积雪草的化学成分主要有三萜类、黄酮类、多炔烯类和挥发油类等。三萜类主要有三萜皂苷类，如积雪草苷、羟基积雪草苷等，和三萜酸类，如积雪草酸、羟基积雪草酸等。一般认为，积雪草中起活性作用的主要是积雪草苷和羟基积雪草苷等三萜皂苷类物质，但近年来也有资料研究表明，生物体内积雪草酸、羟基积雪草酸等苷元的生物利用度明显较其相应的苷类要高。研究表明，积雪草苷在十二指肠和结肠吸收差，在空肠和回肠段吸收略有提高，积雪草苷在大肠部分转化为苷元后吸收则显著增加，而积雪皂苷元可以直接被吸收进入动物血液中，皂苷则需要现在体内水解成苷元才能被吸收利用。近年来的研究表明，积雪草酸和羟基积雪草酸在抗氧化、抗癌等方面具有一定的作用，而且对于脑缺血也有部分疗效。积雪草酸等苷元在积雪草中的含量比积雪草皂苷低得多，积雪草中皂苷含量一般为1.8～5％，而皂苷元同皂苷的含量比通常为1：2.5，因此通过积雪草皂苷水解来获得积雪草皂苷元是一条有效的途径。常规水解积雪草皂苷制备积雪草酸的方法为：将积雪草苷溶于乙醇溶液中，加入1mol/L的NaOH溶液作为催化剂，在80℃下水解2～10h，水解结束后，冷却水解液，调PH值至2，静置沉淀，过滤收集沉淀，将沉淀物溶于乙醇，再加水进行结晶，过滤，即为乳白色结晶。上述方法采用高温水解，会造成积雪草酸发生脱水、环合、双键位移、取代基位移、构型转化等变化，大大降低目标成分的收率和纯度。
技术实现思路
本专利技术解决的技术问题是提供一种水解积雪草苷制备积雪草酸的方法，该方法在常温常压下即可快速断开糖苷键，水解过程温和，水解彻底，且不会产生积雪草酸的构型变化。本专利技术提供的技术方案是提供一种水解积雪草苷制备积雪草酸的方法，包括以下步骤：1)将积雪草苷、十二烷基硫酸钠和NaOH混合，加水溶解，在常温下水解10～15min；2)调水解液的pH值至2～5，静置，过滤，收集沉淀；3)将沉淀溶于乙醇中，过滤，将滤液加水进行结晶，过滤，得到结晶，烘干，即得成品。步骤1)中，十二烷基硫酸钠在混合溶液中的浓度3.44～4.3×10-2mol/L。由于十二烷基硫酸钠的临界胶团浓度为0.86×10-2mol/L，当表面活性剂分子的浓度高于其临界胶团浓度时，表面活性剂分子就会在溶液内部形成大量胶团，又由于十二烷基硫酸钠在水中浓度大于临界胶团浓度时，极易形成热力学稳定形状即棒状胶团，当十二烷基硫酸钠的浓度继续提高至临界胶团浓度的4～5倍时，即3.44～4.3×10-2mol/L时，棒状胶团在水溶液中相互蠕动，进而形成层状胶团结构，可大大提高对疏水基团的包裹作用。积雪草苷为两性物质，是由积雪草酸与葡萄糖和鼠李糖通过糖苷键结合的物质，葡萄糖和鼠李糖为亲水基团，而积雪草酸为疏水基团，亲水基团部分存在胶束团表面，而疏水基团则穿插在形成棒状胶束的表面活性剂分子间，由于层状胶团的存在，疏水基团则被完全插入在层状胶团中间，此时，亲水基团露在表面，十分有利于OH-快速且全面进攻糖苷键，使得糖苷键发生消除反应而开裂苷键，水解快速且彻底。因此，NaOH在混合溶液中的浓度为0.01～0.02mol/L即可水解完全，水解时间仅需10～15min。步骤2)中，采用HCl调节pH值。步骤3)中，所述沉淀与乙醇的料液比为1g：5～30ml。所述乙醇的体积浓度为50～70％。步骤3)中，水的用量为乙醇体积的8～16倍。与现有技术相比，本专利技术可在常温常压下即可快速断开糖苷键，水解过程温和，水解彻底，且不会产生积雪草酸的构型变化。具体实施方式以下具体实施例对本专利技术作进一步阐述，但不作为对本专利技术的限定。以下实施例中积雪草苷由广西昌洲制药有限公司提供，纯度为90％。实施例11)将1g积雪草苷、3.44×10-2mol十二烷基硫酸钠和0.01molNaOH混合，加水至1L，搅拌溶解，得到混合溶液，在常温常压下水解10～15min，得到水解液；2)采用HCl调节水解液pH值至2，静置，过滤，收集沉淀；3)将沉淀按料液比为1g：5ml的溶于体积浓度为50％乙醇中，过滤，将滤液加入乙醇体积8倍的水进行结晶，过滤，得到结晶，烘干，即得积雪草酸成品，称重0.434g,经HPLC分析其纯度为95.6％。收率为90.59％。实施例21)将1g积雪草苷、4.3×10-2mol十二烷基硫酸钠和0.02molNaOH混合，加水至1L，搅拌溶解，得到混合溶液，在常温常压下水解15min，得到水解液；2)采用HCl调节水解液pH值至5，静置，过滤，收集沉淀；3)将沉淀按料液比为1g：30ml的溶于体积浓度为70％乙醇中，过滤，将滤液加入乙醇体积16倍的水进行结晶，过滤，得到结晶，烘干，即得积雪草酸成品，称重0.445g,经HPLC分析其纯度为95.8％。收率为93.08％。实施例31)将1g积雪草苷、3.87×10-2mol十二烷基硫酸钠和0.015molNaOH混合，加水至1L，搅拌溶解，得到混合溶液，在常温常压下水解12min，得到水解液；2)采用HCl调节水解液pH值至3，静置，过滤，收集沉淀；3)将沉淀按料液比为1g：15ml的溶于体积浓度为60％乙醇中，过滤，将滤液加入乙醇体积12倍的水进行结晶，过滤，得到结晶，烘干，即得积雪草酸成品，称重0.439g,经HPLC分析其纯度为95.0％。收率为91.06％。实施例41)将1g积雪草苷、3.44×10-2mol十二烷基硫酸钠和0.02molNaOH混合，加水至1L，搅拌溶解，得到混合溶液，在常温常压下水解10min，得到水解液；2)采用HCl调节水解液pH值至5，静置，过滤，收集沉淀；3)将沉淀按料液比为1g：5ml的溶于体积浓度为70％乙醇中，过滤，将滤液加入乙醇体积8倍的水进行结晶，过滤，得到结晶，烘干，即得积雪草酸成品，称重0.442g,经HPLC分析其纯度为95.2％。收率为91.87％。本文档来自技高网...

【技术保护点】
水解积雪草苷制备积雪草酸的方法，其特征在于：包括以下步骤：1)将积雪草苷、十二烷基硫酸钠和NaOH混合，加水溶解，在常温下水解10～15min；2)调节水解液pH值至2～5，静置，过滤，收集沉淀；3)将沉淀溶于乙醇中，过滤，将滤液加水进行结晶，过滤，得到结晶，烘干，即得成品。

【技术特征摘要】
1.水解积雪草苷制备积雪草酸的方法，其特征在于：包括以下步骤：1)将积雪草苷、十二烷基硫酸钠和NaOH混合，加水溶解，在常温下水解10～15min；2)调节水解液pH值至2～5，静置，过滤，收集沉淀；3)将沉淀溶于乙醇中，过滤，将滤液加水进行结晶，过滤，得到结晶，烘干，即得成品。2.根据权利要求1所述的水解积雪草苷制备积雪草酸的方法，其特征在于：步骤1)中，十二烷基硫酸钠在混合溶液中的浓度3.44～4.3×10-2mol/L。3.根据权利要求1所述的水解积雪草苷制备积雪草酸的方法，其特征在于：步骤1...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢冬养，黄健军，陆美珍，叶出良，
申请(专利权)人：桂林益天成生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广西;45