System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 一种MRSA活的但不可培养状态的形成诱导或控制消减方法及其应用技术_技高网

一种MRSA活的但不可培养状态的形成诱导或控制消减方法及其应用技术

技术编号:41331740 阅读:7 留言:0更新日期:2024-05-20 09:52
本发明专利技术公开了一种MRSA活的但不可培养(VBNC)状态的形成诱导或控制消减方法及其应用。本发明专利技术通过实验发现,MRSA形成活的但不可培养状态的关键环境条件为:营养充足强酸环境(4℃)、营养不足弱酸环境(4℃)、寡营养环境(‑20℃)。在水晶饼食品体系中,1.0%的乙酸可实现对MRSA VBNC状态的消减。诱导和控制VBNC状态的MRSA对于提升米面制品等食品检测准确性和效率至关重要。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及微生物培养领域,特别涉及一种mrsa活的但不可培养状态的形成诱导或控制消减方法及其应用。


技术介绍

1、近年来,食源性致病菌的存在引起了广泛关注,其中mrsa(methicillin-resistant staphylococcus aureus)是典型的食源性致病菌之一。mrsa具有与猪,牛和家禽等食用动物有关的人畜共患作用,当携带mrsa的动物被屠宰时,mrsa可能会传播到畜禽肉、环境和屠宰场工人身上。此外,如果肉类受到污染,mrsa可以进入人类食物链,从而带给人类的潜在风险。mrsa感染可表现为菌血症、心内膜炎、关节感染和皮肤软组织感染等。

2、mrsa是抗生素耐药细菌感染的第二大常见原因。mrsa产生许多毒力因子以促进感染,包括几种形成孔隙的毒素,如双组分形成孔的白球素、两性分子肽、苯酚可溶性调节素和单亚基α毒素。

3、食品加工过程中一些胁迫条件(低温、紫外线、消毒剂等)可导致细菌进入活的但不可培养(viable but non-culturable,vbnc)状态,这给细菌的检测带来了挑战。vbnc状态的细菌在传统培养条件下不易检测,呈现不可培养性,同时其代谢活性减弱、形态发生改变、细胞膜稳定性提高以及基因表达模式发生变化。食源性致病菌进入vbnc状态可能带来多重危害,包括难以检测、潜在再活化、抗药性变异、风险传播以及潜在的致病性,对食品安全构成潜在威胁。因此,对于食品生产过程中可能发生的vbnc状态的致病菌,理解其诱因以及控制方法,采取相应的监测和控制措施显得至关重要。

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技术实现思路

1、本专利技术的目的在于克服现有技术的缺点与不足,提供一种mrsa活的但不可培养状态的形成诱导方法。

2、本专利技术的另一目的在于,提供一种mrsa活的但不可培养状态的抑制方法。

3、本专利技术的再一目的在于,提供上述形成诱导或抑制方法的应用。

4、本专利技术的目的通过下述技术方案实现:

5、一种mrsa活的但不可培养状态的诱导方法,包括如下步骤:

6、(1)mrsa的活化

7、将甘油冻存的mrsa划线接种于tsa培养基上,过夜培养后,挑取单菌落接种于tsb培养基中震荡培养,取对数期的mrsa用作后续实验。

8、(2)活的但不可培养状态的诱导和检测

9、将mrsa接种于诱导培养基,低温培养,定期取样检测可培养活菌数,并使用荧光染料检测其是否处于活的但不可培养状态。

10、步骤(1)所述的培养的条件为32~40℃培养;优选为37℃培养。

11、步骤(1)所述的对数期的mrsa为培养至3~8h的mrsa;优选为培养至4h。

12、步骤(2)所述的诱导培养基包括如下组分:

13、17.0g/l胰酪胨,3.0g/l大豆木瓜蛋白酶水解物,5.0g/l氯化钠,2.5g/l磷酸氢二钾,2.5g/l葡萄糖,余量为水;优选的,还包括体积分数为0~1%的乙酸。

14、步骤(2)所述的低温培养为-30~10℃下培养;优选为-20~4℃。

15、步骤(2)所述的荧光染料为核酸染料syto 9和pi。

16、一种mrsa活的但不可培养状态的抑制方法,包括如下步骤:

17、在培养体系中加入体积分数为0.1~2%的乙酸,或在培养体系中加入体积分数为0.1~2%的乙酸的同时将温度降低至-10℃或-10℃以下,从而抑制mrsa活的但不可培养状态的形成。

18、所述的培养体系为tsb培养基、诱导培养基或水晶饼。

19、一种抑制mrsa形成活的但不可培养状态的培养基,是在tsb培养基中添加体积分数为0.1~2%的乙酸后得到。

20、上述mrsa活的但不可培养状态的诱导方法在食品检测中的应用。

21、上述mrsa活的但不可培养状态的抑制方法和培养基在食品加工中的应用。

22、所述的食品为水晶饼。

23、所述的mrsa为金黄色葡萄球菌atcc 25923。

24、本专利技术相对于现有技术具有如下的优点及效果:

25、本项创新首次研究了在低温冷藏和冷冻条件下,盐度、酸度和营养状态对mrsa进入vbnc状态的影响。研究结果表明,在特定酸度和营养浓度条件下,可以消除vbnc状态的mrsa,成功地控制了水晶饼制品中的mrsa vbnc状态。这项技术应用于水晶饼的实际生产中,可以显著提高微生物检测的准确性和效率,有助于发现潜在的隐蔽污染源,从而为mrsa的预防和监测提供了基础。此项创新还具有易操作和显著效果等优点。

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【技术保护点】

1.一种MRSA活的但不可培养状态的诱导方法,其特征在于包括如下步骤:

2.根据权利要求1所述的诱导方法,其特征在于:

3.根据权利要求1所述的诱导方法,其特征在于:

4.根据权利要求1所述的诱导方法,其特征在于:

5.根据权利要求1所述的诱导方法,其特征在于:

6.一种MRSA活的但不可培养状态的抑制方法,其特征在于包括如下步骤:

7.根据权利要求6所述的抑制方法,其特征在于:

8.一种抑制MRSA形成活的但不可培养状态的培养基,其特征在于:

9.权利要求1~5任一所述的MRSA活的但不可培养状态的诱导方法在食品检测中的应用。

10.权利要求6~7任一所述的MRSA形成活的但不可培养状态的抑制方法和权利要求8所述的抑制MRSA形成活的但不可培养状态的培养基在食品加工中的应用。

【技术特征摘要】

1.一种mrsa活的但不可培养状态的诱导方法,其特征在于包括如下步骤:

2.根据权利要求1所述的诱导方法,其特征在于:

3.根据权利要求1所述的诱导方法,其特征在于:

4.根据权利要求1所述的诱导方法,其特征在于:

5.根据权利要求1所述的诱导方法,其特征在于:

6.一种mrsa活的但不可培养状态的抑制方法,其特征在于包括如下步骤:

【专利技术属性】
技术研发人员:李雪杰徐振波刘君彦金河坡
申请(专利权)人:华南理工大学
类型:发明
国别省市:

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