一种16种真菌毒素的检测方法技术

本发明专利技术公开一种16种真菌毒素的检测方法，其步骤：提取：称取精确样品于离心管中，加入乙腈‑水‑乙酸混合液的提取液，涡旋或振荡提取，然后以离心，吸取上清液于离心管中，加入水并涡旋混匀，离心，上清液过聚四氟乙烯滤膜，收集得滤液A；加入稳定同位素：分别准确吸取滤液A和16种真菌毒素混合标准溶液于不同的内插管中，加入14种真菌毒素稳定同位素混合工作液涡旋混匀。本发明专利技术方法采用液相色谱‑串联质谱仪进行检测，仪器灵敏度大幅提高，可通过样品直接稀释进样方式进行检测，有效避免了净化过程中目标物的损失，减少对净化材料的依赖，降低检测成本，提高样品前处理效率，实现多组分快速同时检测。

A method for detecting 16 kinds of mycotoxins

【技术实现步骤摘要】
一种16种真菌毒素的检测方法
本专利技术涉及一种检测方法，尤其是一种饲料中黄曲霉毒素等16种真菌毒素的测定，液相色谱-串联质谱法，属于饲料及饲料原料检测领域。
技术介绍
真菌毒素是真菌在适宜条件下产生的有毒次级代谢产物，能够引发人类、动物各种急、慢性疾病。主要威胁人类健康的真菌毒素种类有单端孢霉烯族类毒素、伏马类毒素、赭曲霉类毒素、黄曲霉类毒素等。目前，大部分的国家和地区都制定了严格的真菌毒素限量标准，我国也高度重视霉菌毒素污染问题，在2015年新修订的《食品安全法》中，首次将生物毒素明确列入重点关注的污染物质中。我国也已经制定了呕吐毒素(DON)、玉米赤霉烯酮(ZEN)、黄曲霉毒素B1(AFB1)、赭曲霉毒素(OTA)四种真菌毒素限量标准，新的毒素限量也在逐步制定完善中。由于异常气候和病虫害等原因，近年来粮食真菌毒素污染多发易发，危害严重损失巨大。据报道，我国每年有3100万吨饲料及饲料原料在生产、储存、运输过程中被真菌污染，约占饲料及饲料原料年总产量的6.2％。为了保证我国饲料及饲料原料质量安全，避免不必要的经济损失，及时快速监测调查真菌毒素污染种类、水平及其风险尤为重要。由于真本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种16种真菌毒素的检测方法，其步骤：(1)提取：准确称取精确到0.01g的样品5g于50mL离心管中，加入20mL乙腈‑水‑乙酸混合液的提取液，混合液三种液体体积比70:29:1，涡旋或振荡提取30min，然后以6000r/min离心10min，吸取0.5mL上清液于1.5mL离心管中，加入0.5mL水并涡旋混匀，在4℃下以12000r/min离心10min，上清液过0.2μm的聚四氟乙烯滤膜，收集得样品滤液A；(2)加入稳定同位素：分别准确吸取180uL滤液A和16种真菌毒素混合标准溶液于不同的400uL内插管中，加入20uL 14种真菌毒素稳定同位素混合工作液涡旋混匀后，得到含有14种真...

【技术特征摘要】
1.一种16种真菌毒素的检测方法，其步骤：(1)提取：准确称取精确到0.01g的样品5g于50mL离心管中，加入20mL乙腈-水-乙酸混合液的提取液，混合液三种液体体积比70:29:1，涡旋或振荡提取30min，然后以6000r/min离心10min，吸取0.5mL上清液于1.5mL离心管中，加入0.5mL水并涡旋混匀，在4℃下以12000r/min离心10min，上清液过0.2μm的聚四氟乙烯滤膜，收集得样品滤液A；(2)加入稳定同位素：分别准确吸取180uL滤液A和16种真菌毒素混合标准溶液于不同的400uL内插管中，加入20uL14种真菌毒素稳定同位素混合工作液涡旋混匀后，得到含有14种真菌毒素稳定同位素内标的16种真菌毒素混合标准溶液和含有14种真菌毒素稳定同位素内标的样品待测液；16种真菌毒素混合标准溶液见表一；14种真菌毒素稳定同位素混合工作液见表二；表一16种真菌毒素混合标准溶液表二14种真菌毒素稳定同位素混合工作液浓度(3)将上步中得到的含有14种真菌毒素稳定同位素内标的16种真菌毒素混合标准溶液和含有14种真菌毒素稳定同位素内标的样品待测液依次注入液相色谱-串联质谱系统，进行检测，即得到最终结果。2.根据权利要求1所述一种16种真菌毒素的检测方法，其特征在于：该方法采用液相色谱-串联质谱法能同时测定饲料及饲料原料中黄曲霉毒素B1/B2/G1/G2、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、雪腐镰刀菌烯醇、脱氧雪腐镰刀菌烯醇-3-葡萄糖苷、3-乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇、15-乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇、玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素A、伏马毒素B1/B2、T-2/HT-2、杂色曲霉毒素16种真菌毒...

【专利技术属性】
技术研发人员：符金华，杨琳芬，董泽民，徐国茂，邢磊，姜文娟，尹腾桂，李勇，李俊，金海红，李瑾瑾，王亮，邓宇，
申请(专利权)人：江西省兽药饲料监察所，
类型：发明
国别省市：江西,36