神经营养因子NNT-1制造技术

本发明专利技术公开了编码命名为ＮＮＴ－１的新型神经营养因子的核酸。本发明专利技术还公开了针对ＮＮＴ－１多肽的氨基酸序列、用于制备ＮＮＴ－１多肽的方法以及其它相关的方面。这类多肽对刺激Ｂ－细胞和／或Ｔ细胞的产生以及减轻炎症的反应具有活性。（*该技术在2018年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种命名为NNT-1的新型多肽和具有神经营养活性的相关多肽、涉及编码这类多肽的新型核酸分子并涉及其它相关的方面。相关领域描述许多神经性障碍和疾病至少部分是由特殊种类的神经元的变性或死亡所导致的。例如，帕金森病的特征在于迟缓的随意肌运动、肌肉强直和震颤。这类症状至少部分归因于位于称作黑质的大脑特殊区域的产生多巴胺的神经元的进行性变性。这些神经元(“多巴胺能神经元”)的变性导致称作纹状体的大脑邻接区域中的多巴胺水平下降。这种纹状体含有表达多巴胺受体的神经元；这些神经元涉及控制运动活性。目前对多巴胺能神经元变性的原因还不了解，但是已经将它归因于自由基、过量的铁含量、环境毒素、兴奋性氨基酸神经毒性、以及可能的某些神经营养因子的缺乏(Jenner，《神经病学》(Neurology)增刊3S6-S12 ；Adams和Victor编辑《神经病学机理》(Principles of Neurology)第42章“神经系统的变性疾病”，McGraw Hill，NY )。诸如肌萎缩性侧索硬化(ALS；也称作Lou Gehrig’s病)、进行性肌肉萎缩、以及遗传运动和感觉神经病(进行性神经病性疾病)这样的所有疾病至少部分是由于位于脊髓腹侧角中的运动神经元蜕变所造成的。海马(一种定义清楚的结构、它是大脑皮层的部分)在形成长期记忆的过程中起重要作用。例如由局部缺血造成的海马的破坏可以导致无法形成新的记忆。位于海马CA1区域中的锥体CA1神经元的变性是阿尔茨海默病的一个特征。对于发生在诸如中风和大脑损伤这样的疾病中的局部缺血和缺氧性损害来说，这些相同的神经元是选择性易受损的。此外，在癫痫病中，CA1锥体海马神经元以及位于海马CA3区域中的锥体神经元选择性地受到损伤。纹状体是来自黑质的含多巴胺能神经元的神经末梢的神经支配区。大多数纹状体神经元利用GABA(4-氨基丁酸)作为其神经递质。纹状体是发生在亨廷顿舞蹈病中的进行性神经变性的主要靶向物，其中主要神经元的缺失是使用GABA的纹状体神经元的缺失。含血清素的神经元位于群集在菱脑中线周围的群体神经元中。这些神经元涉及控制体温、情绪和睡眠。含血清素的神经元系统的障碍包括、例如抑郁症、其它情绪疾病和失眠。感光细胞是视网膜神经元的特殊亚群并且是产生视觉的原因。感光细胞的损伤和/或死亡可导致失明。诸如因色素性视网膜炎、老年斑变性和静止性夜盲导致的视网膜变性的特征均在于感光细胞外侧部分的进行性萎缩和功能的丧失，其中所述的感光细胞外侧部分是含有将光刺激物转化成电活性的视觉色素的特殊结构。尽管有一些可获得的用于治疗所述症状和减轻这类疾病严重性的疗法(例如用于治疗帕金森病的L-多巴胺)，但是目前没有预防或减少多数上述种类受影响神经元的变性、或促进其修复的有效疗法。近来，已经根据其对各种神经元的营养活性而鉴定了几种天然存在的蛋白质分子。将这些分子命名为“神经营养因子”。神经营养因子是内源性可溶性蛋白质，它们可以刺激或调节神经元的存活、生长、和/或形态成形性(参见Fallon和Laughlin，《神经营养因子》(Neurotrophic Factors)，Academic Press，San Diego，CA )。根据氨基酸序列的同源性和/或三维结构，公知的神经营养因子属于多肽生长因子的几种不同蛋白质的超家族(MacDonald和Hendrikson，《细胞》(Cell)，73421-424 )。神经营养因子的一个族是神经营养蛋白族。通常该族由NGF(神经生长因子)、BDNF(大脑衍生的神经营养因子)、NT-3(神经营养蛋白-3)、NT-4(神经营养蛋白-4)和NT-6(神经营养蛋白-6)组成。CNTF(睫状神经营养因子)和LIF(白血病抑制因子)是具有神经营养活性的细胞因子多肽。根据它们的结构特征和受体组成，这些多肽与一族造血细胞因子有关，该族造血细胞因子包括IL-6(白细胞介素-6)、IL-11(白细胞介素-11)、G-CSF(粒细胞集落刺激因子)和制癌蛋白-M。本专利技术的NNT-1具有显著类似于各种该族神经营养因子的特征。参见附图6。GDNF(神经胶质衍生的神经营养因子)是一种属于TGF-β(转化生长因子β)超家族的神经营养因子。GDNF表现出对多巴胺能和运动神经元的有效促进存活和分化的作用(Lin等，《科学》(Science)2601130-1132 ；Yan等，《自然》(Nature)373341-344 )。尽管公知这些神经营养因子可以促进神经元的生长和/或存活，但是几乎很少有人了解有关与这些因子一起起作用的分子的情况。在一种可以鉴定其它神经蛋白和相关分子的方式中，给予动物一种或多种公知对神经系统有作用的化合物，然后对组织分析涉及对该化合物产生神经反应的基因的诱导情况。例如，可以筛选在某些神经系统的组织、诸如大脑的海马区中诱导的基因。该技术由Nedivi等(《自然》(Nature)，363718-722 ；Nedivi等，《美国国家科学院学报》(Proc.Natl.Acad Sci.USA)，932048-2053 )用于鉴定海马齿状回中诱导的新型基因对给予称作红藻氨酸(海人草酸)的谷氨酸的神经递质类似物的反应。通过传入神经元的活性和/或通过神经元损伤来调节许多神经营养因子的表达，所述神经营养因子诸如NGF、BDNF、NT3、GDNF、bFGF、IGF-1和TGF-β。在海马的齿状回中可以观察到这些基因中的一些对谷氨酸类似物红藻氨酸的强诱导反应(Isackson，《神经生物学中的最新观点》550-357 )。看起来红藻氨酸的处理可以增加新型化合物从警觉大鼠的海马中的释放，且看起来这种活性不同于公知的神经营养因子的作用(Humpel等，《科学》(Science)，269552-554 )。鉴于许多神经系统疾病和障碍还没有公知的疗法这一事实，本领域中存在一种对确定用于治疗神经疾患和疾病的新型化合物的需求，所述疾病诸如帕金森病、肌萎缩性侧索硬化(ALS)、阿尔茨海默病、中风、以及影响视觉的各种变性疾病。本文中另有证据证明NNT-1化合物可以具有调节免疫系统的生物活性、特别是通过使得B-细胞和T-细胞的生产增加的方式。因此，本专利技术的一个目的是提供可用于促进神经元再生并恢复神经功能的新型化合物。本专利技术的另一个目的是提供治疗神经性疾病、诸如那些本文所列疾病的方法。本专利技术的另一个目的是提供治疗免疫性疾病、诸如那些本文所列疾病的方法。对于本领域普通技术人员来说，从本专利技术公开的
技术实现思路
中，这些和其它的目的是显而易见的。专利技术概述在一种实施方案中，本专利技术提供了编码多肽的一种核酸分子，它选自如下核酸分子组成的组(a)SEQ ID NO1的核酸分子；(b)SEQ ID NO3的核酸分子；(c)编码SEQ ID NO2的多肽或其生物活性片段的核酸分子；(d)编码一种与SEQ ID NO2多肽至少有70％同一性的多肽的核酸分子；(e)在严格条件下与上述(a)-(d)中任意一种核酸分子杂交的核酸分子；以及(f)作为上述(a)-(e)中任意一种核酸分子的互补序列的核酸分子。在另一种实施方案中，本专利技术提供了编码多肽的一种核酸分子，它选自如下核酸分子组成的组(a’)SEQ ID 本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种编码多肽的核酸分子，选自如下核酸分子组成的组： （ａ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１的核酸分子； （ｂ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３的核酸分子； （ｃ）编码ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２的多肽或其生物活性片段的核酸分子； （ｄ）编码一种与ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２多肽至少有７０％同一性的多肽的核酸分子； （ｅ）在严格条件下与上述（ａ）－（ｄ）中任意一种核酸分子杂交的核酸分子；以及 （ｆ）作为上述（ａ）－（ｅ）中任意一种核酸分子的互补序列的核酸分子。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：张明熙，GS埃利奥特，G塞纳尔迪，U萨米恩托，
申请(专利权)人：安姆根有限公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]