从皮肤细胞中分离的多核苷酸及其使用方法技术

提供了编码在哺乳动物皮肤细胞中表达的多肽的分离的多核苷酸，同时，还提供了含有所述分离的多核苷酸的表达载体和宿主细胞。还提供了使用所述多核苷酸和多肽的方法。（*该技术在2019年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及编码多肽的多核苷酸，在皮肤细胞中表达的多肽，及其在治疗方法中的用途。
技术介绍
皮肤是身体中最大的器官，它起着保护性覆盖层的作用。皮肤的丧失(如在严重烧伤的患者身上所出现的情况)可导致死亡，这是由于缺乏对外部微生物感染的屏障，以及丧失了体温和体液。皮肤组织由若干层组成。最外面一层是上皮，它由基底膜支撑，并且覆盖真皮。在真皮下面是疏松的结缔组织和覆盖肌肉或骨组织的筋膜。皮肤是自我更新的组织，就是说细胞经常地生成和脱落，上皮的最下面的细胞是基底细胞，它富含能够复制的细胞。所述复制细胞被称为祖细胞或干细胞。复制细胞又产生被称为“过渡扩增细胞”的子代细胞。这些细胞在它们从基底层向上皮的更上面的表层移动时进行分化，并成熟变成角质形成细胞(就是成熟表皮细胞)。在以上过程中，角质形成细胞被角化，被最终从皮肤表面脱落。上皮中的其他细胞包括合成黑素的黑素细胞，黑素是负责保护不受阳光伤害的色素。朗氏细胞也存在于上皮中，并起着加工外源蛋白，以便呈递到免疫系统中的细胞的作用。真皮包括神经、血液和淋巴管，纤维和脂肪组织。在真皮内有成纤维细胞，巨噬细胞和肥大细胞。汗腺或皮脂腺以及毛发滤泡穿过上皮和真皮。每一根头发都是由一个毛发滤泡产生。当毛发被拔掉以后，由上皮细胞进行的毛发再生是由毛发滤泡的真皮乳头指导的。当皮肤表面破裂时，例如在受到创伤时，所述干细胞增殖并且子代角质形成细胞移动通过所述创口，以便重新弥合所述组织。因此，所述皮肤细胞具有能被创伤激活的基因。所述基因的产物包括若干生长因子，如上皮生长因子，它介导皮肤细胞的增殖。所述在皮肤中被激活的基因以及所述基因的蛋白产物可以作为治疗皮肤创伤的制剂开发。由皮肤细胞产生的其他生长因子也可以影响其他类型细胞生长。由于皮肤癌是一种皮肤细胞生长的疾病，由皮肤产生的能调节细胞生长的蛋白可以作为用于治疗皮肤癌的制剂开发。由皮肤产生的能调节黑素产生的蛋白可以用作保护皮肤不受阳光的有害作用的制剂。已知角质形成细胞是能分泌细胞因子，并表达各种细胞表面蛋白。细胞因子和细胞表面分子是在针对感染的炎性反应中并且在影响皮肤的自身免疫病中起着重要作用的蛋白。因此由皮肤细胞表达的基因及其蛋白产物可以开发成用于治疗影响皮肤的炎性疾病的制剂。毛发是人体的一个重要部分。皮肤病会导致脱发。簇状脱发是一种以在头皮上成片脱发为特征的疾病。全面秃顶是药物治疗癌症的一种副作用。毛发的生长和发育是由在皮肤和真皮乳头中表达的基因进行调节的。所述基因及其蛋白产物可用于开发成用于治疗毛发滤泡疾病的制剂。新的治疗需要加速皮肤伤口的愈合，防止脱发，促进毛发的再生或去掉毛发，并且能更有效的治疗自身免疫病和炎性皮肤病，而又没有不利影响。还需要能更有效的治疗皮肤癌。因此，本领域仍有必要鉴定并分离编码在皮肤中表达的蛋白的基因，以便用于开发用来治疗包括与皮肤相关的疾病在内的疾病治疗剂。专利技术概述本专利技术提供了在皮肤细胞表达的多肽，以及编码所述多肽的多核苷酸，含有所述多核苷酸的表达载体和宿主细胞，及其使用方法。在具体实施方案中，所提供的分离的多核苷酸包括选自下列一组的DNA序列(a)序列1-14、45-48、64-68、77-89、118、119、198-231、239-249、254-274、349-372、和399-405所示序列；(b)序列1-14、45-48、64-68、77-89、118、119、198-231、239-249、254-274、349-372、和399-405所示序列的互补物；(c)序列1-14、45-48、64-68、77-89、118、119、198-231、239-249、254-274、349-372、和399-405所示序列的反向互补物；(d)序列1-14、45-48、64-68、77-89、118、119、198-231、239-249、254-274、349-372、和399-405所示序列的反向序列；(e)有99％的可能性与序列(a)-(d)的序列相同的序列；和(f)与序列(a)-(d)的序列具有至少50％、75％或90％同一性的序列。在其他实施方案中，本专利技术提供了含有选自下列一组的氨基酸序列的分离的多肽(a)序列120-197、275-348、373-398和406-409所示序列；和(b)与序列120-197、275-348、373-398和406-409所示序列具有至少50％、75％或90％同一性的序列，以及编码所述多肽的分离的多核苷酸。还提供了含有包括选自下列一组的氨基酸序列的多肽的至少一个功能性部分的分离的多肽(a)序列120-197、275-348、373-398和406-409所示序列；和(b)与序列120-197、275-348、373-398和406-409所示序列具有50％、75％或90％同一性的序列。在有关实施方案中，本专利技术提供了含有上述多核苷酸的表达载体，以及用所述载体转化过的宿主细胞。在另一方面，本专利技术提供了一种刺激角质形成细胞生长和运动、抑制上皮产生的癌细胞生长、抑制肿瘤的血管形成和血管化、或调节受治对象的血管生长的方法，该方法包括给所述对象服用一种含有分离的多肽的组合物，其中，所述多肽包括选自下列一组的氨基酸序列(a)序列187、196、342、343、395、397和398所示序列；和(b)与序列187、196、342、343、395、397和398所示序列具有至少50％、75％或90％同一性的序列。还提供了调节受治对象的皮肤炎症的方法，该方法包括给所述对象服用包括一种分离的多肽的组合物，其中，所述多肽包括选自下列一组的氨基酸序列(a)序列338和347所示序列；和(b)与序列338和347所示序列具有至少50％、75％或90％同一性的序列。在另一方面，本专利技术提供了用于刺激受治对象的上皮细胞生长的方法。所述方法包括给所述对象服用一种包括含有选自下列一组的氨基酸序列的多肽的组合物(a)序列129和348所示序列；和(b)与序列129和348所示序列具有至少50％、75％或90％同一性的序列。在另一方面，提供了可用于抑制HIV-1与白细胞结合的方法，是用于治疗患者身体上的炎性疾病或用于治疗癌症，所述方法包括给所述对象服用包括含有选自下列一组的氨基酸序列的分离的多肽的组合物(a)序列340、344、345和346所示序列；和(b)与序列340、344、345和346所示序列具有至少50％、75％或90％同一性的序列。正如下文详细说明的，本专利技术的分离的多核苷酸和多肽可用于制备治疗皮肤病的治疗剂。本专利技术的上述及其他特征以及获得这些特征的方法，通过参考下面的更详细的说明可以得到最好的理解。本文所披露的所有参考文献都全文收作本文的参考，就如同每一份参考文献被单独收入一样。附图简述附图说明图1表示huTR1 mRNA在人体组织中分布的Northern分析的结果。关键词He，心脏；Br，大脑；Pl，胎盘；Lu，肺；Li，肝脏；SM，骨骼肌；Ki，肾；Sp，脾；Th，胸腺；Pr，前列腺；Ov，卵巢。图2表示muTR1a和huTR1a的MAP激酶分析结果。按照正文中所述添加muTR1a(500ng/ml)，huTR1a(100ng/ml)或LPS(3pg/ml)。图3表示用本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多核苷酸，包括选自下列一组的核苷酸序列：（１）序列１－１１９、１９８－２７４、３４９－３７２、和３９９－４０５所示的序列；（２）序列１－１１９、１９８－２７４、３４９－３７２、和３９９－４０５所示序列的互补物；（３）序列１－１１９、１９８－２７４、３４９－３７２、和３９９－４０５所示序列的反向互补物；（４）序列１－１１９、１９８－２７４、３４９－３７２、和３９９－４０５所示的反向序列；（５）至少有９９％的可能性与选自（１）－（４）中任一种序列的序列相同，是使用上述运行参数通过计算机算法ＢＬＡＳＴＰ确定的；和（６）与上述（１）－（４）中任一种序列至少具有５０％的同一性的核苷酸序列，是使用上述运行参数和同一性测试通过计算机算法ＢＬＡＳＴＰ确定的。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：L斯特罗恩，M斯莱曼，JD瓦特森，R安鲁斯特，A库姆布勒，JG穆里森，
申请(专利权)人：吉尼西斯研究及发展有限公司，
类型：发明
国别省市：NZ[新西兰]