本发明专利技术提供在哺乳动物ｆｓｎ－／－淋巴结基质细胞中表达的编码多肽的分离的多核苷酸以及包含这类分离多核苷酸的表达载体和宿主细胞。本发明专利技术还提供这类多核苷酸和多肽的用法。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及编码在来自鳞皮(flaky skin)(fsn-/-)小鼠的淋巴结基质细胞中表达的蛋白的基因及其在治疗法中的应用。淋巴结被形成支持被膜的致密结缔组织网包围。这种网络延伸至机体中的淋巴结，形成额外的支持构架。在全部其余的器官中，可以鉴定出包含网状纤维以及产生和包围所述纤维的网状细胞的精细网。这些特征为淋巴系统的主要功能细胞提供了支持，所述功能细胞为T-淋巴细胞和B-淋巴细胞。在淋巴结中发现的其它细胞类型包括巨噬细胞、小结树突细胞和衬于为淋巴结供血的血管内的内皮细胞。淋巴结内的细胞互相通信，以便保护机体抵抗外源物质。当外源物质或抗原存在时，它被巨噬细胞和小结树突细胞探测到，所述细胞摄取并加工所述抗原，并且将所述抗原的部分呈现在其细胞表面。这些细胞表面抗原然后被呈递给T-淋巴细胞和B-淋巴细胞，引起所述T-淋巴细胞和B-淋巴细胞增殖并且分别分化成活化T-淋巴细胞和浆细胞。这些细胞被释放到循环中，以便搜寻和破坏抗原。有些T-淋巴细胞和B-淋巴细胞也将分化为记忆细胞。假如这些细胞在以后遇到同一种抗原，则免疫应答将更为快速。一旦活化T-淋巴细胞和B-淋巴细胞被释放到循环中，则它们可以执行各种各样的功能，导致最终破坏抗原。活化T-淋巴细胞可以分化成细胞毒性淋巴细胞(也称为杀伤T细胞)，所述细胞毒性淋巴细胞识别在其细胞表面具有外源抗原的其它细胞，并通过使所述细胞裂解而杀伤所述细胞。活化T-淋巴细胞也可以分化成辅助T细胞，所述辅助T细胞然后将分泌蛋白，以便刺激对抗原应答的B-淋巴细胞和其它T-淋巴细胞。另外，活化T-淋巴细胞可以分化成抑制性T细胞，所述抑制性T细胞分泌多种抑制B-淋巴细胞活性的因子。活化B-淋巴细胞分化成浆细胞，所述浆细胞合成并且分泌与外源抗原结合的抗体。然后所述抗体-抗原复合体被巨噬细胞探测到并破环，或者被一组称为补体的血液成分检测和破环。淋巴结可以被分离，所得细胞可以在培养物中生长。可以使在组织培养皿中贴壁的细胞保持一段时间，所述细胞称为基质细胞。所述培养细胞为异质群体，并且可以由存在于淋巴结内的大多数细胞组成，例如网状细胞、小结树突细胞、巨噬细胞和内皮细胞。众所周知，骨髓基质细胞在造血祖细胞的归位(homing)、生长和分化中起关键性作用。由基质细胞产生的蛋白质对体外保持基质细胞是必需的。此外，已知基质细胞分泌多种因子并且呈现淋巴瘤细胞存活所必需的膜结合受体。已经描述了A/J小鼠近交品系(The Jackson Laboratory，BarHarbour，ME)中的一种常染色体隐性突变，命名为鳞皮(fsn-/-)。所述小鼠患一种类似于人牛皮癣的皮肤病。牛皮癣是一种影响2％人群的常见病，其特征为与皮肤增厚和生鳞屑相关的慢性炎症。皮肤病变的组织学表明，表皮内、皮肤最上层的细胞增殖增加，以及在表皮下皮肤层真皮内中异常存在炎性细胞，包括淋巴细胞。虽然所述疾病的病因不清，但牛皮癣与涉及T淋巴细胞的免疫系统疾病相关。所述疾病更通常在家庭成员内发生，表明也涉及遗传因素。具有fsn基因突变的小鼠不仅患有牛皮癣样皮肤病，而且患有涉及免疫系统和造血系统细胞的其它异常。与包括脾脏和淋巴结在内的淋巴器官增大相关，这些小鼠的淋巴细胞数目显著增加。另外，小鼠的肝脏增大，并且它们患有贫血症。在fsn-/-小鼠的异常淋巴结中表达的基因和蛋白可能因此影响免疫系统和造血系统细胞的发育或功能、这些细胞在炎性疾病中的应答以及皮肤和其它结缔组织细胞对炎性信号的应答。本领域需要鉴定其作用是调节免疫系统所有细胞的蛋白的编码基因。来自正常或异常淋巴结的这些蛋白可以用于修饰针对肿瘤细胞或感染性因子例如细菌、病毒、原生动物和蠕虫的免疫应答。这类蛋白可用于治疗其中免疫系统引起对机体不利反应的疾病，包括I型超敏反应(例如枯草热、湿疹、过敏性鼻炎和哮喘)和II型超敏反应(例如新生儿的输血反应和溶血性疾病)。在III型反应期间以及在例如麻风病、血吸虫病和皮炎的疾病的IV型反应中引发其它不利反应，所述III型反应是由于在持久感染的感染器官中形成的免疫复合体或在反复吸入来自霉菌、植物或动物的物质后在肺中形成的免疫复合体引起的。免疫系统的新型蛋白还可用于治疗其中机体将其自身识别为外来物质的自身免疫病。这类疾病的实例包括类风湿性关节炎、Addison病、溃疡性结肠炎、皮肌炎和狼疮。这类蛋白还可用于组织移植过程中，其中所述机体通常将移植组织识别为外来物并试图将其杀伤；当存在移植物抗宿主疾病的高风险时，还可用于骨髓移植中，在移植物抗宿主病中移植细胞攻击其宿主细胞，通常引起死亡。因此，本领域仍需要鉴定和分离在免疫系统的细胞内表达的蛋白的编码基因，用于开发治疗包括与免疫系统相关的那些疾病在内的疾病的治疗药物。在具体实施方案中，提供分离的多肽，所述多肽包含选自SEQ IDNO11-20、30-38和47-53中所提供序列的氨基酸序列和如本文中定义的这类序列的变异体。也提供分离的多肽，所述多肽包含含有选自以下的氨基酸序列的多肽的至少一种功能部分(a)SEQ ID NO11-20、30-38和47-53中所提供的序列；和(b)如本文中定义的SEQ ID NO11-20、30-38和47-53序列的变异体。在其它实施方案中，本专利技术提供包含选自以下的核苷酸序列的分离的多核苷酸(a)SEQ ID NO1-10、21-29和39-46中所提供的序列；(b)SEQ ID NO1-10、21-29和39-46中所提供序列的互补序列；(c)SEQ ID NO1-10、21-29和39-46中所提供序列的反向互补序列；(d)SEQ ID NO1-10、21-29和39-46中所提供序列的反向序列；和(e)如本文中定义的(a)-(d)序列的变异体。在相关实施方案中，本专利技术提供包含以上多核苷酸的表达载体，以及用这类载体转化的宿主细胞。如下文详述，本专利技术的分离的多核苷酸和多肽可以有效用于制备用于治疗免疫性疾病的治疗药物。在相关实施方案中，提供用于调节血管生长和用于治疗以下疾病的方法例如炎性疾病、免疫系统疾病、癌症、肿瘤坏死因子介导的疾病和病毒性疾病。这类疾病的实例包括HIV感染、上皮癌、淋巴样癌、骨髓癌、间质癌和神经元癌(neuronal cancer)、关节炎、炎性肠病和心力衰竭。参考以下更详细的描述将会最佳地理解本专利技术的上述特征和其它特征以及获得所述特征的方式。本文公开的所有参考文献均通过引用全部结合到本文中，如同每个参考文献单独结合到本文中一样。专利技术详述一方面，本专利技术提供从fsn-/-小鼠的淋巴结基质细胞中分离的多核苷酸以及由这类多核苷酸编码的分离的多肽。本文所用术语“多核苷酸”是指脱氧核糖核苷酸或核糖核苷酸碱基的单链或双链聚合物，包括DNA分子和相应的RNA分子，包括HnRNA和mRNA分子，有义链和反义链，并且包括cDNA、基因组DNA和重组DNA以及全合成或部分合成的多核苷酸。HnRNA分子含有内含子，并以通常一对一方式对应于一种DNA分子。一种mRNA分子对应于一种HnRNA和已经切除了内含子的DNA分子。多核苷酸可以由有完整的基因构成或由其任何部分构成。可操作的反义多核苷酸可以包含相应的多核苷酸的片段，因此“多核苷酸”的定义包括所有这类可操作的反义片本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种分离的多肽，所述多肽包含一种选自ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１－２０、３０－３８和４７－５３的序列。
【技术特征摘要】
...
【专利技术属性】
技术研发人员：L斯特拉钱，M斯莱曼，N阿伯尼斯，R安鲁斯特，KD库姆布勒，JG穆里森，
申请(专利权)人：吉尼西斯研究及发展有限公司，
类型：发明
国别省市：NZ[新西兰]
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