用于治疗炎性疾病的双歧杆菌制造技术

从切下并冲洗过的人的胃肠道分离到的双歧杆菌菌株在由人口服之后具有显著的免疫调节作用。该菌株可用于预防和／或治疗不希望出现的炎性活动，尤其是胃肠道炎性活动例如炎症性肠病或过敏性肠综合征。炎性活动也可以是癌症引起的。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
导论本专利技术涉及在食品和药品中有各种应用的益生菌双歧杆菌菌株。更具体地说，本专利技术涉及能够有利地修饰并且结果导致减轻炎性疾病的可观察到的症状的益生菌双歧杆菌菌株。消费者越来越想知道保持其环境，健康和营养所必需要的物质。因此，科学研究已经集中于食物，紧张状态和现代医学实践(例如抗生素和放射治疗)在危害人的健康中所起的作用。特别是，群体动力学向老年社会的变化增加了由缺陷或危害植物区系引起的疾病的发生例如胃肠道(GIT)感染，便秘，过敏的肠道症(IBS)，炎症性肠病(IBD)-节段性回肠炎和溃疡的结肠炎，食物过敏，抗生素诱导的腹泻，心血管疾病和某些癌症(例如直肠癌)。已经将益生菌定义为通过改善胃肠道微生物的平衡而有利地影响宿主的活的微生物食品补剂，或更广泛地定义为活的微生物，在保证固有的基本营养时摄取一定数量的所说微生物对健康产生影响。通常各种微生物，特别是乳杆菌和链球菌的种类的混合物已经用于发酵的日消耗产品中以有利于健康。近年来，功能食品(以有目的的方式影响身体的功能以便对生理和营养产生有利影响的食品)，特别是(嗜酸-双岐)酸奶的商业制造和销售已经从日本适宜的建立的小环境市场扩散到合算的和扩大的欧盟。现在许多来源于人的益生菌的细菌在商业上被开发利用(例如嗜酸乳杆菌LA-1)，许多消费者，消费机构和科学委员会的成员怀疑这样的产品并且他们要求公布益生菌。因此日用食品工业在巨大的压力下需要验证这些新的益生菌食品。已经建立了用于选择潜在的有效的益生菌微生物的标准概括如下人来源，非病原体行为，对技术处理的抗性(即在释放载体中的存活率和活性)，对胃酸性和胆碱性的抗性，胃表皮组织的吸附，形成GIT集落的能力，抗微生物物质的产生，调节免疫应答的能力，影响代谢活性(例如胆固醇同化，乳糖酶活性，维生素的产生)的能力(Huis in′t Veld J，Shortt C.益生菌微生物的选择标准。在Leeds，A.R.Rowland，I.R.版，肠论坛和健康-过去，现在和将来。伦敦皇家医学协会出版社，199619-26)。双歧杆菌是在形成集落的微生物菌群中存在的几个主要的可培养的细菌之一。现在还没有完全阐明直肠中内源性双歧杆菌的功能。但是认识到与用配方制剂喂养的婴儿相比只有喂母乳的婴儿降低了腹泻的危险。这些婴儿具有更大量的直肠双歧杆菌的事实部分解释了观察到的对健康的益处，因为大量的非病原体双歧杆菌侵占GIT的可获得的小场所可以帮助阻止细菌的感染。节段性回肠炎的发病据认为与直肠微生物群落有关(Targan，S.和Shanahan，F.炎症性肠病从实验台到病床，Williams和Wilkins 1994)。近来已经发现患有活性节段性回肠炎的患者其粪便中可回收的双歧杆菌明显低于健康的个体。所观察到的双歧杆菌数量的减少与β-D-半乳糖苷酶的产生和活性的水平的降低直接相关(Favier，C.等人Dig.Dis.Sci.1997，42817-822)。β-D-半乳糖苷酶是由双歧杆菌产生的酶。这些结果支持了在其他研究中提出双歧杆菌菌株在维持平衡的健康的肠道微生物菌群中起着重要的作用的建议。据认为双歧杆菌是益生菌，因为它们是在保证基本营养时被摄取足够量时对健康有影响的活生物体。许多摄取的双歧杆菌必须达到肠道的作用的位点才能发挥益生菌作用。已经建议了每克肠道内含物中约106-107的活的双歧杆菌的基本水平(Bouhnik，Y.，Lait199373241-247)。文献报道显示在成人和婴儿中完成的体内研究表明一些双歧杆菌菌株能够通过胃肠道的传代而存活。在能忍受酸和胆汁盐的不同的双歧杆菌菌株的能力之间已经观察到显著的不同，表明存活是用于选择潜在的益生菌菌株的重要的标准。双歧杆菌的摄取可以改善胃肠道的运输。再者，关于人的间接的证据证实通过双歧杆菌发酵消耗的奶导致某些粪便酶例如用于将原致癌物转变为致癌物质的β-D-半乳糖苷酶的水平的减低(Bouhnik Y.等人，欧洲临床营养杂志199650269-273)。当个体摄取由长双歧杆菌和嗜热链球菌发酵的奶时也降低了粪便产生的腐败代谢物例如p-甲酚，吲哚和氨(Takiguchi，R.等人，Bifidus-Flores，Fructus et Semina 1996；9135-140)。已经报道了抗微生物活性与双歧杆菌有关。也已经证实了双歧杆菌调节免疫系统的各种参数。已经报道通过给受试动物喂食乳酸细菌制剂降低了IL-10缺陷的小鼠的粘膜炎症(Madsen，K.等人胃肠道1997；112A1030)。在大鼠上完成的进一步的研究已经证实除了显著减低肠管癌症的发生和肿瘤存在的数量(singh，J.等人致癌作用1997；18833-841)，摄取双歧杆菌可以抑制在肠道中形成畸变的腺管病灶(早期发生损伤)(kulkarni，N.和Reddy，B.实验生物医学协会年报1994；207278-283)。对营养和治疗和一般来说对健康具有特定的、有利的影响的益生菌菌株一直以来都在进行研究。专利技术概述本专利技术提供了从切下并洗涤过的人的胃肠道分离到的双歧杆菌菌株，在由人口服所述菌株之后具有显著的免疫调节作用。优选地当导入到包括与免疫系统相互作用的细胞和免疫系统细胞的一个系统时双歧杆菌菌株实现免疫学标记的变化。优选地与免疫系统相互作用的细胞是表皮细胞。优选的是免疫学标记是细胞因子，尤其是TNFα。在一个优选的实施方案中，与免疫系统相互作用的细胞和免疫系统细胞的来源匹配。与免疫系统相互作用的细胞是胃肠道，呼吸道或泌尿生殖道来源的。本专利技术还提供了从切下交洗涤过的人的胃肠道分离到的在由人口服之后具有显著的免疫调节作用的长婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium longum infantis)菌株。由人口服之后双歧杆菌菌株具有显著的抗炎性作用。优选的是，从切下并洗涤过的人的胃肠道分离双歧杆菌菌株，所述的胃肠道能够抗击炎症性肠病，在生理浓度的人胆汁和人胃液存在下保持所述的能力。通过测量在几个并发的免疫缺陷受体小鼠(SCID)中诱导的消瘦疾病的逆转测量抗击炎症性肠病的作用的能力，所述的小鼠已经用纯化的CD4+，CD45RBhighT细胞给药。通过将本专利技术的一个或多个长婴儿双歧杆菌菌株单独或与唾液乳杆菌菌株结合给药之后，测量IL-10缺陷小鼠(IL-10+129 Svex菌株)中结肠炎症的降低也可以测量长婴儿双歧杆菌菌株抗炎症性肠病的作用的能力。白细胞介素10(IL-10)是抑制巨噬细胞/单核细胞，T辅助1(Th1)细胞，和天然杀伤细胞的效应子功能的重要调节细胞因子。另外，IL-10扩大了B细胞的增殖和分化。缺失了IL-10基因的鼠模型自发发展为炎症性肠病和胃肠道肿瘤。在这些疾病状态的病理发展过程中已经涉及了胃肠道菌群，因为没有微生物的动物不产生疾病。优选的是，所述双歧杆菌菌株对广谱革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌具有抑制作用。优选的是，所述双歧杆菌菌株显示广谱的抗细菌包括链球菌，假单胞菌，大肠杆菌和芽孢杆菌种类的活性。在特定的方面，本专利技术提供了长婴儿双歧杆菌菌株UCC35624或其突变体或其变异体。长婴儿双歧杆菌菌株UCC35624于1999年1月13日保藏于国立工业和海洋细菌保藏有限公司(NCIMB)，保藏号为NCIMB 41003。在一个本文档来自技高网...

【技术保护点】
从切下并洗涤过的人的胃肠道分离到的双歧杆菌菌株，其在由人口服之后具有显著的免疫调节作用。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：约翰凯文柯林斯，杰拉尔德克里斯托弗奥沙利文，利亚姆奥马霍尼，弗格斯沙纳汉，
申请(专利权)人：爱尔兰企业贸易上称作爱尔兰生物学研究公司，爱尔兰国立科克大学科克学院，
类型：发明
国别省市：IE[爱尔兰]