使用哺乳动物β防御素治疗炎性疾病制造技术

本发明专利技术系关于使用哺乳动物β防御素抑制ＴＮＦ－α活性，其在治疗与肿瘤坏死因子α相关之病理学病状具有效用。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】使用哺乳动物β防御素治疗炎性疾病涉及序列表本申请含有呈计算机可读形式的序列表。该计算机可读形式通过提述并入本文中。专利技术背景专利
本专利技术涉及通过施用哺乳动物β防御素而抑制肿瘤坏死因子α (TNF-alpha或 TNF-α)活性，其在多种病症的治疗(包括与发炎相关之病理学病状的治疗)中具有效用。背景 人防御素在许多其它元件中，先天免疫的关键组分为个别显示相当大选择性但集体能够快速杀死广谱的细菌、病毒及真菌的抗微生物肽(AMP)。AMP的生物重要性因其在自然界中之普遍分布而更为突出，且其有可能由所有多细胞生物体产生。在人类中，优势AMP为防御素。人防御素为阳离子小肽，基于其三个分子内半胱氨酸二硫键之拓扑学可分为α-防御素及β-防御素。α-防御素可进一步细分为首先自嗜中性粒细胞颗粒分离的α-防御素 (ΗΝΡ1-4)及由Paneth细胞在小肠隐窝中表达的α -防御素(HD5及HD6)。β -防御素主要由多种组织及器官中的上皮细胞产生，所述组织及器官包括皮肤、气管、胃肠道、泌尿生殖系统、肾、胰及乳腺。β-防御素家族最具特征的(best characterized)成员为hBDl_3。 然而，使用多种生物信息学工具，已在人基因组中注释了几乎40个编码推定β -防御素同源物的开放阅读框。一些人防御素是组成型产生的，而其它是由促炎性细胞因子或外源微生物产物诱导的。已经越来越清楚的是，除直接抗微生物活性外，人防御素也具有宽范围的免疫调节/替代性质。所述性质包括诱导多种趋化因子及细胞因子、趋化活性及细胞凋亡活性，诱导前列腺素、组胺及白细胞三烯释放，抑制补体，通过铎样受体(toll-like receptor)信号传导刺激树突细胞成熟，以及刺激由嗜中性粒细胞的病原体清除。此外，人防御素也在伤口愈合、上皮及成纤维细胞的增殖、血管生成(angiogenesis)及血管发生(vasculogenesis) 中起作用。有越来越多的人防御素在许多感染性及炎性疾病中发挥重要作用的证据。发炎和 /或感染皮肤中通常观察到人防御素之过表达，很可能是因为由微生物组分或内源性促炎性细胞因子局部诱导。在牛皮癣(psoriasis)中，hBD2及hBD3过于充足，且在患有寻常痤疮(acne vulgaris)或浅表性毛囊炎(superficial folliculitis)的患者的受损上皮中观察到hBD2的显著上调。另一方面，异位性/特应性皮炎(topic dermatitis)与hBD2及 hBD3的下调相关。回肠克罗恩氏病(Crohn' s disease)与HD5及HD6的缺陷表达相关， 且在结肠中的克罗恩氏病中，hBD2-4的表达下调。细胞因子细胞因子为来自高级真核生物的小的分泌多肽，其负责细胞间信号转导且影响其它细胞之生长、分裂和功能。它们是有效的多效性多肽，其例如经由相应受体充当局部或全身性细胞间调控因子，且因此在许多生物过程(如免疫、发炎及造血)中起关键作用。细胞因子由多样细胞类型产生，所述细胞类型包括成纤维细胞、内皮细胞、上皮细胞、巨噬细胞/ 单核细胞及淋巴细胞。TNF-α涉及多种生理病原性过程且可如在宿主防御中具有保护性或如在自体免疫中具有有害性。TNF-α为关键细胞因子之一，其引发且维持发炎反应，且已证明TNF-a 失活在下调与自体免疫疾病相关之炎性反应中是重要的。感染后，巨噬细胞大量分泌 TNF-α且TNF-α通过刺激内皮细胞产生粘附分子及通过产生为趋化细胞因子之趋化因子来介导嗜中性粒细胞及巨噬细胞募集(recruitment)至感染部位。TNF-α有助于活化白血球及其它炎性细胞且增加损伤组织内之血管渗透性。TNF-α主要由巨噬细胞、单核细胞及树突细胞产生，但也可由多种其它细胞类型产生，所述细胞类型包括淋巴样细胞、肥大细胞、内皮细胞、心肌细胞、脂肪组织、成纤维细胞及神经元组织。当前的抗炎药通过与TNF-α结合且因此阻止TNF_a向细胞表面上TNF_a之受体传导信号来阻断TNF-a之作用。该类型之阻断具有某些严重的副作用，其中一些为感染，如肺结核、败血症及真菌感染且可能使癌症发病率增加。IL-10,也称为人细胞因子合成抑制因子(CSIF)，也作为抗炎细胞因子是免疫调控的关键参与者。该细胞因子由数种细胞类型产生，所述细胞类型包括单核细胞、巨噬细胞、 T细胞、B细胞、树突细胞及肥大细胞。该细胞因子在免疫调控及发炎作用中具有多效性效应。其下调促炎性细胞因子、由Thl/Thl7细胞分泌之细胞因子、MHC第II类Ag及共刺激分子于抗原呈递细胞上的表达。IL-10也由称为调控T细胞(Tregs)之T细胞群体分泌。 所述细胞不阻止最初T细胞活化；相反，其抑制持续反应且阻止慢性和潜在破坏性的反应。 在周边中，一些T细胞被抗原及IL-10或TGF-β诱导成为Tregs。IL-10诱导之Tregs为 ⑶4+/⑶25 +/Foxp3-且称为Trl细胞。所述细胞通过分泌IL-10抑制免疫反应。最近研究已公开在鉴别Thl7细胞时T细胞效应子谱系之多样化大于Thl/Th2/Treg。已显示该亚群在先前归因于Thl系之数种自体免疫疾病(如克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、牛皮癣及多发性硬化)中呈病原性。由Thl7分泌之细胞因子也被IL-10下调，且阻断TNF通过使Thl7细胞失活而预防牛皮癣。IL-10之总体活性为抗炎性，且已在数个动物研究中显示预防发炎及损伤，然而因为IL-10施用途径及其生物半衰期方面的困难，所以临床IL-10治疗仍然不足。使用人防御素治疗发炎引人关注的是，小肠中克罗恩氏病与潘纳斯细胞(paneth cell) a -防御素HD5 及HD6之水平降低相关，而结肠中克罗恩氏病与β -防御素hBD2及hBD3之产生减少相关 (Gersemann等，2008 ；Wehkamp等，2005)。此外，已有力地证明克罗恩氏病之发病机制中涉及肠微生物区(Swidsinski等，2002)。所述研究人员通过使用荧光原位杂交显示在活性克罗恩氏病中，观察到粘膜相关且具侵袭性之细菌之急剧增加，而正常小肠上皮及大肠上皮中无所述细菌。这些观察结果一起合并成一个假设，该假设表明在健康人中，沿肠上皮屏障之适当水平之防御素起作用以控制腔内(luminal)细菌之组成及数目且使其不粘附及入侵粘膜而触发发炎(Wang等，2007)。另一方面，在能力不足以产生保护性水平之分泌防御素的人中，抗微生物防御与腔内细菌之间的平衡会改变。结果，这使得细菌入侵基础(underlying)肠组织，从而诱导炎性状态，而这又可能发展成克罗恩氏病。基于该假设，WO 2007/081486公开了数种人防御素在炎性肠病之治疗中之用途。 专利技术者提出以使防御素在肠腔中之适当位置释放之配制物形式经口向克罗恩氏病患者施用的防御素将减少入侵细菌之数目，重建正常上皮屏障功能且因此降低炎性疾病之严重性。根据WO 2007/081486，防御素之功能在于直接靶向且杀死腔中之细菌，从而阻止其入侵上皮组织。即，防御素完全起抗感染化合物作用。关于W0/2007/081486，令人惊讶的是胃肠外施用之hBD2能够降低小鼠中DSS诱导之结肠炎的严重性，因为通过使用该施用途径，肽从未遇到腔内细菌。另外，我们此处显示hB本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．哺乳动物β防御素在制造用于治疗选自下组的炎性疾病或病症的药物中的用途：类风湿性关节炎、骨关节炎、多发性硬化、动脉粥样硬化、硬皮病（全身性硬化）、狼疮、全身性红斑狼疮（ＳＬＥ）、（急性）肾小球性肾炎、哮喘、慢性阻塞性肺病（ＣＯＰＤ）、呼吸窘迫综合征（ＡＲＤＳ）、血管炎、葡萄膜炎、皮炎、异位性／特应性皮炎、毛发脱落、鼻炎（过敏性）、过敏性结膜炎、重症肌无力、硬化性皮炎、肉状瘤病、牛皮癣关节炎、强直性脊椎炎、青少年特发性关节炎、格雷夫斯病（Ｇｒａｖｅｓ　ｄｉｓｅａｓｅ）、斯耶格伦氏综合征（Ｓｊｏｇｒｅｎ′ｓ　ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、及贝塞特氏病（ｄｉｓｅａｓｅ）。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：坦贾·M·R·凯尔，
申请(专利权)人：诺维信阿德宁生物技术公司，
类型：发明
国别省市：DK