人癌胚抗原与细胞分化抗原40配体融合肿瘤疫苗的制备及应用制造技术

采用基因重组技术对人癌胚抗原（ＣＥＡ）和细胞分化抗原４０配体（ＣＤ４０Ｌ）ｃＤＮＡ基因进行重组，并在二者之间接一段弹性的连接子，将重组的ＣＥＡ－ＣＤ４０Ｌ基因克隆进杆状病毒表达系统的供体质粒ｐＦａｓｔＢａｃ的多克隆位点，重组供体质粒转化含辅助杆状病毒质粒Ｂａｃｍｉｄ的大肠杆菌，获得重组杆状病毒质粒，转染昆虫细胞ＳＦ９，鉴定并培养工程细胞，收获细胞，液相层析分离纯化重组ＣＥＡ－ＣＤ４０Ｌ蛋白。用Ｔ淋巴细胞和Ｂ淋巴细胞增殖刺激实验鉴定重组融合蛋白的生物学功能。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

生物医药基因重组肿瘤疫苗以抗CD3抗体作阳性对照，用T淋巴细胞和B淋巴细胞增殖刺激实验鉴定重组融合蛋白的生物学功能。权利要求人癌胚抗原(CEA)和细胞分化抗原40配体(CD40L)融合肿瘤疫苗采用基因重组技术将CEA和CD40L cDNA基因用一段弹性连接子连接成融合蛋白，在杆状病毒表达系统昆虫细胞sf9中表达，采用液相层析法纯化重组融合蛋白。用T淋巴细胞和B淋巴细胞增殖刺激实验鉴定重组蛋白的生物活性。1.人癌胚抗原(CEA)和CD40配体(CD40L)融合基因在原核细胞和真核细胞中表达，并在抗肿瘤治疗中的应用。2.对人癌胚抗原(CEA)和CD40配体(CD40L)基因进行部分增殖重组后融合表达的技术。3.用其他的肿瘤相关抗原或病毒抗原基因与CD40配体(CD40L)进行重组并表达的技术。全文摘要采用基因重组技术对人癌胚抗原(CEA)和细胞分化抗原40配体(CD40L)cDNA基因进行重组，并在二者之间接一段弹性的连接子，将重组的CEA－CD40L基因克隆进杆状病毒表达系统的供体质粒pFastBac的多克隆位点，重组供体质粒转化含辅助杆状病毒质粒Bacmid的大肠杆菌，获得重组杆状病毒质粒，转染昆虫细胞SF9，鉴定并培养工程细胞，收获细胞，液相层析分离纯化重组CEA－CD40L蛋白。用T淋巴细胞和B淋巴细胞增殖刺激实验鉴定重组融合蛋白的生物学功能。文档编号A61K39/00GK1465400SQ0212295公开日2004年1月7日 申请日期2002年6月14日 优先权日2002年6月14日专利技术者王虹, 王 虹 申请人:王虹, 王 虹

【技术保护点】
人癌胚抗原（ＣＥＡ）和细胞分化抗原４０配体（ＣＤ４０Ｌ）融合肿瘤疫苗采用基因重组技术将ＣＥＡ和ＣＤ４０Ｌ ｃＤＮＡ基因用一段弹性连接子连接成融合蛋白，在杆状病毒表达系统昆虫细胞ｓｆ９中表达，采用液相层析法纯化重组融合蛋白。用Ｔ淋巴细胞和Ｂ淋巴细胞增殖刺激实验鉴定重组蛋白的生物活性。人癌胚抗原（ＣＥＡ）和ＣＤ４０配体（ＣＤ４０Ｌ）融合基因在原核细胞和真核细胞中表达，并在抗肿瘤治疗中的应用。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王虹，
申请(专利权)人：王虹，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]