The invention provides a preparation method of cyanobacterial protein polypeptides, including freeze thawing, wall breaking, fractionation salting out, aqueous two-phase extraction, ultrafiltration, purification and adsorption of algal toxins. Simple, good repeatability and low cost preparation prepared by the method of the invention, the extraction of cyanobacteria protein polypeptide with high extraction rate, the loss of cyanobacterial protein purification and removal of MC LR in MC less, LR content of cyanobacteria protein polypeptide finally get very low, reach the standard reagent grade.
【技术实现步骤摘要】
蓝藻蛋白多肽的制备方法
本专利技术涉及蛋白多肽的提取领域，具体是一种蓝藻蛋白多肽的制备方法。
技术介绍
水体富营养化程度的加剧和范围的扩大，致使淡水蓝藻水华爆发日趋普遍，严重破坏水体及周围环境，为消除蓝藻污染，每年大量的蓝藻被打捞上来，与此同时打捞上来的蓝藻的资源化利用已成为蓝藻重点研究课题。蓝藻中含有有效物质包括氨基酸、多糖、藻胆蛋白、藻毒素，一吨蓝藻藻干粉可生产藻蓝蛋白SO-80kg,藻多糖20kg,藻毒素lkg。其中，藻毒素包括微囊藻毒素(microcystin，MC)、节球藻毒素(nodularin，NOD)、柱胞藻毒素(cylindrospermospin)、鱼腥藻毒素-α(anatoxin-α)等。试剂级蓝藻蛋白售价达150~180美元/毫克，是黄金价格的10000倍，但目前市场全部被美国垄断。目前国内主要采用螺旋藻等原料提取藻蓝蛋白，但是螺旋藻中藻蓝蛋白含量较低且其本身作为保健品市场价格很高，因此提取成本较高。如何提高蓝藻蛋白的提取率和如何充分地去除蓝藻蛋白中的藻毒素是目前研究重点。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种制备方法简单、重现性好、制备...
【技术保护点】
蓝藻蛋白多肽的制备方法，包括冻融破壁、分级盐析、双水相萃取、超滤纯化和吸附除藻毒素，其特征在于：所述的吸附除藻毒素为：将粗制蓝藻蛋白多肽用超纯水溶解，加入氧化石墨烯粉末，2~6℃温度下200~600r/min搅拌吸附12~24h，2~6℃温度下8000~12000r/min离心6~15min，取上清液，冷冻干燥得到精制蓝藻蛋白多肽。
【技术特征摘要】
1.蓝藻蛋白多肽的制备方法，包括冻融破壁、分级盐析、双水相萃取、超滤纯化和吸附除藻毒素，其特征在于：所述的吸附除藻毒素为：将粗制蓝藻蛋白多肽用超纯水溶解，加入氧化石墨烯粉末，2~6℃温度下200~600r/min搅拌吸附12~24h，2~6℃温度下8000~12000r/min离心6~15min，取上清液，冷冻干燥得到精制蓝藻蛋白多肽。2.根据权利要求1所述的蓝藻蛋白多肽的制备方法，其特征在于：所述的冻融破壁为：在蓝藻泥中加入超纯水，蓝藻泥和超纯水的质量体积比为1g：0.6~2.0ml，于-25~-15℃温度下冷冻，于15~25℃温度下解冻，反复冻融次数1~3次，冻融结束后2~6℃温度下8000~12000r/min离心6~15min，保存上清液。3.根据权利要求1所述的蓝藻蛋白多肽的制备方法，其特征在于：所述的分级盐析为：在冻融破壁得到的上清液中加入硫酸铵，使溶液中硫酸铵饱和度达到15~25%，搅拌，2~6℃温度下4000~6000r/min离心3~8min，取沉淀，在沉淀中加超纯水溶解加入硫酸铵使溶液中硫酸铵饱和度达到30~40%，搅拌，2~6℃温度下4000~6000r/min离心3~8min，取上清液。4.根据权利要求1所述的蓝藻蛋白多肽的制备方法，其特征在于：所述的双水相萃取为：在分级盐析得到上清液中加入PEG4000和磷酸钾盐KHP，调节体系pH为5.5~6.5，PEG...
【专利技术属性】
技术研发人员：周建波，
申请(专利权)人：兰溪市沉默生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33
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