免疫调节组合物,其用途及生产方法技术

本发明专利技术涉及至少一组肽在组合物中的应用，以及调节对一种或多种多肽抗原的免疫应答反应的方法。在某些实施方式中，各组肽的序列全部或部分衍生自一个多肽抗原。各肽组中的各个肽含有一个多肽抗原所对应的氨基酸序列的不同部分，并且显示与同组肽的至少一个其它肽有部分序列相同性或相似性。本发明专利技术还包括在预防、诊断和治疗应用的范围内使用这些肽的方法。此外，本发明专利技术涉及未经培养的抗原呈递细胞或其前体细胞在调节这些细胞的接受者的调节免疫应答反应的方法和组合物中的应用，这些抗原呈递细胞或其前体细胞未经历活化条件，但已与抗原接触。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】,其用途及生产方法
该专利技术总体涉及免疫应答反应的调节。更具体地说，本专利技术涉及至少一组肽在组合物中的应用，以及调节对一种或多种多肽抗原的免疫应答反应的方法。在某些实施方式中，各组肽的序列全部或部分衍生自一种多肽抗原。各肽组中的各个肽含有对应于一种多肽抗原不同部分的氨基酸序列，并且与同组肽的至少一个其它肽显示部分序列相同性或相似性。本专利技术还包括在预防、诊断和治疗应用中使用这些肽的方法。此外，本专利技术涉及应用未经培养的未经历活化条件但已与抗原接触的抗原呈递细胞或其前体细胞来调节这些细胞的接受者的免疫应答反应的方法和组合物。本说明书中参考的各种出版物的详细目录收集在说明书的最后处。
技术介绍
自从近20年前被发现以来，1型人免疫缺陷病毒型(HIV-1)已夺走了二千二百万人的生命，并且正继续毁坏全世界的民众(1)。目前，四千二百万人携带HIV-1，尽管做了很多努力来调整高危行为，但每年仍有5百万新的感染发生(2)。类似地，丙肝病毒(HCV)和乙肝病毒感染在世界范围内数百万导致人慢性肝损伤和肝细胞损伤。迫切需要对这些病毒的安全有效的预防或治疗疫苗。此外，现在人们相信，很多癌症的免疫保护或癌症的清除需要特异性T细胞应答反应。持续性胞内病原体如复制性病毒的消除通常需要细胞介导的免疫(CMI)。CD8+细胞毒T淋巴细胞(CTL)是CMI的主要效应细胞；它们通过识别细胞表面MHC I类分子呈递的病毒肽来杀伤病毒感染的细胞。在病毒特异性抗体出现之前，HIV-1感染的急性阶段，强力的HIV-1-特异性CTL应答反应时间上与降低的病毒血症相关(3，4)。而且，在慢性感染时，强烈的CTL应答与降低的HIV-1病毒血症相关(5，6)，而HIV-1-特异性CTL的降低与AIDS的快速发展相关(4，7-9)。类似地，一般认为HCV的清除靠病毒特异性T细胞应答来帮助。尚没有对HIV-1，HCV或癌症的有效疫苗。早期的HCV-1疫苗策略是依据灭活的全病毒疫苗以及重组结构蛋白如包膜(env)糖蛋白。非人灵长类模型显示这些疫苗对致病性猴免疫缺陷病毒(SIV)和高致病性SHIV(SIV-HIV-1嵌合)攻击只提供有限的病毒株特异性保护(10-13)。第一次人III期试验也失败了，未显示有效性(14)。颗粒-和重组的全蛋白疫苗虽然安全，但倾向于产生的抗体对很多慢性病毒病原体提供的保护不够。或者，细胞内表达的抗原随后更可能诱导CTL应答。减毒活病毒产生强大的细胞介导的免疫(CMI)应答，然而，其临床安全性受到关注(15)。因此，很多注意力已转向表达HIV-1/SIV基因(如env，gag和pop)或HCV基因的遗传工程载体(如DNA质粒和痘病毒)(16)。不知道哪种免疫-靶抗原是保护性抗原，但已表明很多T细胞反应可降低产生病毒逃逸突变的可能性(17)。然而，正是这种大量潜在的表位使大载体的构建常常很困难，并且因为其潜在的安全性而变得十分复杂。已注意到DNA疫苗与宿主DNA整合的潜在能力，以及病毒载体疫苗在免疫损伤宿主中的安全性。这些给重组疫苗提出了重要的管理上的障碍。此外，尽管对T细胞和线形B细胞表位是如何加工并呈递给免疫系统的了解已获得显著进展，但基于表位的疫苗的全部潜能还没有被充分探索。主要原因是必须鉴定大量不同的T细胞表位，以将这些表位包括在疫苗中来覆盖人群中极大的人白细胞抗原(HLA)多态性。以前已报道，灌注全抗原-脉冲或单表位-脉冲的培养的抗原呈递细胞(APC)在小鼠模型中具有免疫原性的(22-27)。然而，在近交系(inbred)小鼠模型中的其它报道显示，灌注单个肽脉冲细胞甚至可能是耐受原性的(tolerogenic)(诱导对抗原耐受的状态，这对疫苗的作用不利)(28-31)。专利技术概述本专利技术公开了一种发现，即已与感兴趣的病毒多肽抗原的重叠肽接触的自体细胞在远交系(outbred)群体中产生强烈的免疫原性反应，这种免疫原性反应保护其免受随后的病毒攻击。本专利技术人提出，系统性给予这些重叠肽本身可达到类似的保护性反应。使用多个重叠肽提供几种益处，包括减少逃逸(escape)突变体的出现，更易于在不知道任何表位的情况下产生基于肽的免疫原性组合物。在这方面，采用诸肽之间的重叠序列减少或防止潜在表位缺失，扩大该组合物对远交群体之间主要组织相容性复合体(MHC)多样性的免疫覆盖范围。因此，在本专利技术的一个方面，提供至少一组肽用于调节对一种或多种感兴趣多肽的免疫应答反应。各组中的各个肽含有感兴趣多肽相应氨基酸序列的不同部分(例如，多肽的特定致病区)，并且显示与同组肽中至少一个其它肽有部分序列相同性或相似性。在某些实施方式中，使用了至少2、3、4、5、6或7组肽，其中各组中的肽序列衍生自感兴趣的特定多肽。部分序列相同性或相似性通常包含在各肽的一端或两端。合适地，在一端或两端，有至少4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14个毗连的氨基酸残基，其序列与至少一个其它肽中含有的氨基酸序列相同或相似。在某些实施方式中，该肽长度至少为6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、20、25、30个氨基酸残基，合适的长度不多于约500、200、100、80、60、50、40个氨基酸残基。合适地选择该肽的长度以增强溶细胞的T淋巴细胞应答反应的产生(例如，长度约8-10个氨基酸的肽)或T辅助淋巴细胞应答反应的产生(例如，长度约12-20个氨基酸的肽)。在某些实施方式中，所述肽序列衍生自与感兴趣多肽相应的序列的至少约30、40、50、60、70、80、90、91、92、93、94.95、96、97、98、99％。合适的感兴趣多肽是选自下列的抗原蛋白质抗原，癌细胞表达的抗原，颗粒抗原，同种抗原，自身抗原或过敏原，或免疫复合体。在某些实施方式中，感兴趣的抗原是疾病相关或病症相关的多肽，如但不限于，病原生物或癌症产生的多肽。病原生物的例子包括但不限于，酵母、病毒、细菌、蠕虫、原生动物和支原体。癌症的例子包括但不限于，黑色素瘤、肺癌、乳腺癌、子宫颈癌、前列腺癌、结肠癌、胰腺癌、胃癌、膀胱癌、肾癌、移植后淋巴增生疾病(PTLD)，何杰金氏(Hodgkin′s)淋巴瘤等。另一方面，本专利技术提供了抗原呈递细胞或其前体细胞，它们已与一组前面广义描述的抗原接触过，接触的时间和条件足以使这些多肽或其加工形式被抗原呈递细胞或其前体细胞呈递。在相关方面，本专利技术提供产生能调节对感兴趣多肽的免疫应答反应的抗原呈递细胞的方法。该方法通常包括，使抗原呈递细胞或其前体细胞与至少一组前面广义描述的肽接触，接触的时间和条件足以使这些多肽或其加工形式被抗原呈递细胞或其前体细胞呈递。当采用前体细胞时，宜将该前体细胞在足以使其分化产生抗原呈递细胞的条件下培养一段时间。在有些实施方式中，将所述肽或各组肽与基本上纯化的抗原呈递细胞或其前体细胞接触。在其它实施方式中，将该肽或各组肽与异质(heterogeneous)抗原呈递细胞或其前体细胞群接触。在这些实施方式中，异质细胞群可以是血液或外周血单个核细胞。通常，抗原呈递细胞或其前体细胞选自单核细胞、巨噬细胞、髓系(myeloid lineage)细胞、B细胞、树突状细胞或郎格罕斯细胞。在其它实施方式中，将所述肽或各组肽与未经培养的抗原呈递细胞群本文档来自技高网...

【技术保护点】
至少一组肽在制备用于调节免疫应答反应的药物中的用途，其特征在于，各肽组的各个肽含有一个感兴趣多肽所对应的氨基酸序列的不同部分，并且显示与同组肽中至少一个其它肽有部分序列相同性或相似性。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：SJ肯特，
申请(专利权)人：墨尔本大学，
类型：发明
国别省市：AU[澳大利亚]