一种叶酸受体介导靶向龙葵总碱靶向纳米胶束及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种龙葵总碱靶向载药纳米胶束的制备方法及用途，其制备方法采用溶剂挥发成膜法或高压均质机法制备。将具有温敏性的胶束材料与具有叶酸靶向的胶束材料和药物同时溶解于易挥发的有机溶剂，通过溶剂挥发成膜法或高压均质机法，自组装形成包埋龙葵总碱的纳米胶束。最后透析除去未包埋的药物和其他杂质，冷冻干燥，即制得龙葵总碱靶向载药纳米胶束，本发明专利技术的龙葵总碱靶向载药纳米胶束具有良好的作用，且局部药物浓度高、作用时间长、不良反应少。

A kind of folate receptor mediated targeted coramsine targeted nano micelle and preparation method and application thereof

【技术实现步骤摘要】
一种叶酸受体介导靶向龙葵总碱靶向纳米胶束及其制备方法和应用
本专利技术涉及一种药物及其制备方法和应用，尤其涉及一种叶酸受体介导靶向龙葵总碱靶向纳米胶束及其制备方法和应用。
技术介绍
龙葵总碱(solasodine)，为茄科茄属(solanum)植物(如中药龙葵等)中含有的甾体生物碱提取物。二十世纪初，国外从茄科植物solanum.sodomeum中提取到龙葵总碱solasodine，对茄科植物生物碱作了系列的研究，研究表明龙葵总碱及其生物碱具有多种有效活性，特别是抗肿瘤活性。具备一定的抗肿瘤活性和较小的毒副作用，并且制备工艺简单，可以进行产业化生产。但龙葵总碱存在体内的分布不具选择性，水溶性差，对健康组织产生毒性及极易被清除等缺点，阻碍了其作为抗肿瘤药物的开发利用。聚合物胶束(polymericmicelles)是由嵌段共聚物在水溶液中自组装形成的分子有序聚集体，具有经典的“核-壳”结构。作为药物载体，具有稳定、低毒、缓释、靶向的优点。由于聚合物具有亲水疏水的两亲结构，依据相似相容的原理，胶束疏水核可增溶难溶药物。肿瘤组织生长迅速，血管生成很快，新生血管外膜细胞缺乏、基底膜变形，纳米级的共聚物胶束能穿透肿瘤的毛细血管壁的“缝隙”进入肿瘤组织，而肿瘤组织淋巴系统回流不完善，造成粒子在肿瘤部位蓄积，实现了实体瘤的增强渗入停滞效应(EPR)。另外纳米级胶束的粒径大小可延长其在血液中的循环时间，而长循环纳米粒能够更好地利用EPR效应，从而提高药物对肿瘤细胞的毒性，增强疗效。另外，经聚合物胶束包裹的药物能避免药物被酶降解而失活，因此更加稳定。药物在吸收过程中，聚合物胶束的亲水外壳与纳米级的粒径能有效减少胶束与免疫球蛋白作用，减少微粒聚集，从而保护胶束不被网状内皮系统(reticuloendothelialsystem，RES)识别并清除。同时，由于共聚物胶束的临界胶束浓度(CMC)较低，形成的胶束可以在较低浓度下保持稳定，从而延长了药物在血循环中的滞留时间，有利于提高药物的生物利用度。
技术实现思路
本专利技术为解决现有技术中的上述问题提出了一种能可以在较低浓度下保持稳定，从而延长了药物在血循环中的滞留时间，有利于提高药物的生物利用度的叶酸受体介导靶向龙葵总碱靶向纳米胶束。为实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：一种叶酸受体介导靶向龙葵总碱靶向纳米胶束，以叶酸和温敏材料修饰的聚氧乙烯聚氧丙烯醚嵌段共聚物作为载体，制备成具有靶向特征的聚合物胶束。为了进一步优化上述技术方案，本专利技术所采取的技术措施为：优选的，所述的叶酸及其衍生物是叶酸、亚叶酸、二氢叶酸或四氢叶酸。优选的，所述温敏材料为N-异丙基甲基丙烯酰胺和甲基丙烯酸羟乙酯聚合的亲水链段。优选的，所述亲水链段为在pH值7.4的PBS溶液中温度响应在38-40℃的亲水链段。优选的，以聚氧乙烯聚氧丙烯醚嵌段共聚物为载体，包埋抗肿瘤药物；所述的抗肿瘤药物与环境响应基础共聚物质量比为：10：1～10:50。优选的，所述聚氧乙烯聚氧丙烯醚嵌段共聚物为泊洛沙姆，即Pluronic。本专利技术的第二个方面是提供一种环境响应基础共聚物在抗肿瘤药物领域中的应用。为实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：一种环境响应基础共聚物在抗肿瘤药物领域中的应用，所述环境响应基础共聚物为聚氧乙烯聚氧丙烯醚嵌段共聚物。本专利技术的第三个方面是提供一种叶酸受体介导靶向龙葵总碱靶向纳米胶束的制备方法。为实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：一种叶酸受体介导靶向龙葵总碱靶向纳米胶束的制备方法，其特征在于：步骤一、纳米胶束的制备：以不同摩尔比聚合N-异丙基甲基丙烯酰胺和甲基丙烯酸羟乙酯这两种不同功能单体，得到亲水链段，筛选得到在pH值7.4的PBS溶液中温度响应在38-40℃的亲水片段，通过加入引发剂和一定量的RAFT链转移剂Pluronic-CTA，在氮气保护下反应12小时反应完成后得到白色粉末状固体Pluronic-PNH，作为温敏共聚物；步骤二、采用溶剂挥发成膜法制备龙葵总碱载药胶束称取一定量的温敏共聚物溶于氯仿中，完全溶解后加入一定量的龙葵总碱/氯仿溶液，混合均匀后使用超声分散，然后40℃旋蒸除去溶剂，旋干后龙葵总碱与共聚物在圆底烧瓶的内壁上形成一层薄膜。然后将圆底烧瓶置于超声清洗器中，边超声边用注射器慢慢加入一定量的超纯水，不断摇晃圆底烧瓶，使薄膜充分被超纯水润湿。加完超纯水后，继续超声分散，即可获得龙葵总碱载药胶束溶液；步骤三、采用高压均质机法制备龙葵总碱纳米胶束取FA-PF127-PNH，PF127-PNH，龙葵总碱，加到DMF中，超声溶解后，再加入超纯水，继续超声。在600Bar的压力下，将混合液循环四次，流出液的温度为45℃。优选的，所述步骤三中DMF添加量为20ml。优选的，所述步骤三中FA-PF127-PNH添加量为30mg，PF127-PNH添加量为70mg，龙葵总碱添加量为4.22mg。优选的，所述步骤三中的超纯水的添加量为80ml。本专利技术采用上述技术方案，与现有技术相比，具有如下技术效果：通过本课题的研究可得到一种集载药、靶向、温敏控制释药于一体的聚合物载药胶束；并将这种具多种功能性的载体材料用于抗肿瘤中药龙葵总碱的载体胶束制剂制备，主要有以下优点：(1)在聚氧乙烯聚氧丙烯醚嵌段共聚物修饰优化后的温敏片段，胶束的两亲性可增溶难溶性药物，从而可以优化载药胶束的增溶作用，延长血液循环时间等性能。(2)制备得到的依靠叶酸受体介导肿瘤靶向聚合物胶束具有温敏的性能，可使药物在肿瘤环境下控制释放，增加了对肿瘤组织的细胞毒性，也降低了对正常组织的毒性。(3)在原有商品化材料聚氧乙烯聚氧丙烯醚嵌段共聚物基础上改性，增加新的功能，既保留原材料的物理化学特性，又使其靶向性和释药性更智能化。(4)载药胶束的制备方法适合产业化放大，不仅具有产业化前景，而且为其应用于临床给药提供了可能。(5)将龙葵总碱制成共聚物载体胶束，提高龙葵总碱的溶解性，延长其在体内的滞留时间，提高药物的生物利用度。附图说明附图1为龙葵总碱纳米胶术合成示意图；附图2为共聚物Pluronic-PNH-PNAS对NIH3T3细胞存活率的影响；附图3为龙葵总碱纳米胶束体外抗肿瘤活性；附图4为龙葵总碱体外抗肿瘤活性。具体实施方式本专利技术提供了一种叶酸受体介导靶向龙葵总碱靶向纳米胶束及其制备方法和应用。下面通过具体实施例对本专利技术进行详细和具体的介绍，以使更好的理解本专利技术，但是下述实施例并不限制本专利技术范围。下面结合具体实施实例对本专利技术做进一步的说明。实施例1连接叶酸纳米胶束材料的制备pf127溶解在丙酮中，倒入冰冻的己烷中通过结晶获得纯净的白色粉末，以进行进一步的实验。f127-cdi的制备：PluronicF127(1.2604g，0.1mmol)溶解在无水THF(20ml)形成无色透明液。然后，过多的CDI(0.1644g，1mmol/L)由蠕动泵以1RPM滴(15S/滴)在氮气气氛下在室温下添加到F127溶液中。滴加完成后，混合溶液用磁力搅拌12小时后用旋转蒸发器将混合浓缩至约10毫升。然后倒入冷冻乙醚(300ml)保存在20℃沉淀pf127-cdi。通过离心10000rpm消除未反应的CDI。收集产物为白色粉末(0.8700g)经真空干燥在35本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种叶酸受体介导靶向龙葵总碱靶向纳米胶束，其特征在于：以叶酸和温敏材料修饰的聚氧乙烯聚氧丙烯醚嵌段共聚物作为载体，制备成具有靶向特征的聚合物胶束。

【技术特征摘要】
1.一种叶酸受体介导靶向龙葵总碱靶向纳米胶束，其特征在于：以叶酸和温敏材料修饰的聚氧乙烯聚氧丙烯醚嵌段共聚物作为载体，制备成具有靶向特征的聚合物胶束。2.根据权利要求1所述叶酸受体介导靶向龙葵总碱靶向纳米胶束，其特征在于：所述的叶酸及其衍生物是叶酸、亚叶酸、二氢叶酸或四氢叶酸。3.根据权利要求1所述叶酸受体介导靶向龙葵总碱靶向纳米胶束，其特征在于：所述温敏材料为N-异丙基甲基丙烯酰胺和甲基丙烯酸羟乙酯聚合的亲水链段。4.根据权利要求3所述叶酸受体介导靶向龙葵总碱靶向纳米胶束，其特征在于：所述亲水链段为在pH值7.4的PBS溶液中温度响应在38-40℃的亲水链段。5.根据权利要求1所述叶酸受体介导靶向龙葵总碱靶向纳米胶束，其特征在于：以聚氧乙烯聚氧丙烯醚嵌段共聚物为载体，包埋抗肿瘤药物；所述的抗肿瘤药物与聚氧乙烯聚氧丙烯醚嵌段共聚物质量比为：10：1～10:50。6.一种环境响应基础共聚物在抗肿瘤药物领域中的应用，所述环境响应基础共聚物为聚氧乙烯聚氧丙烯醚嵌段共聚物。7.一种叶酸受体介导靶向龙葵总碱靶向纳米胶束的制备方法，其特征在于：步骤一、纳米胶束的制备：以不同摩尔比聚合N-异丙基甲基丙烯酰胺和甲基丙烯酸羟乙酯这两种不同功能单体，得到亲水链段，筛选得到在pH值7.4的PBS溶液中温度响应在38-40℃的亲水片段，通过加入引发剂和一定量的RAFT链转移剂Plur...

【专利技术属性】
技术研发人员：张艳红，姚譞，唐英，韩润，
申请(专利权)人：上海中药制药技术有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31