【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及中药分析，尤其涉及一种玉芩颗粒的指纹图谱检测方法。
技术介绍
1、非酒精性脂肪性肝病(nafld)是一种无过量饮酒史，以肝细胞脂肪变性和脂质贮积病理学改变为特征的临床综合征，是与胰岛素抵抗和遗传易感性密切相关的获得性代谢应激性肝损伤，由于nafld的发病机制尚未完全明确，目前尚缺乏有效的治疗手段。
2、玉芩颗粒源自古方柴胡疏肝散、柴胡清肝饮和六积散，结合临床经验加减化裁而成，具有舒肝活血、利胆化湿、健脾降脂的功效。目前已有的临床人用经验显示，玉芩颗粒治疗非酒精性脂肪肝的总有效率可达80％以上，患者服用后肝功能明显好转，b超显示脂肪肝消失或好转、血脂下降、体重有所减轻，与此同时，玉芩颗粒具有较好的安全性，能够规避长期服用所造成的肝损伤。但中药复方普遍成分复杂，仅建立几个有效成分定性或定量的检测方法，并不能反应中医药多成分共同作用的药效特点，无法实现对质量水平的整体监控。
3、建立多味中药复方各成分的指纹图谱信息及指纹图谱方法，对制剂的质量控制和可传递性具有相当重大的意义，同时，单波长指纹图谱难以反应复方的成分信息，因此，有必要建立一种玉芩颗粒的双波长指纹图谱检测方法。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是针对现有技术中的不足，提供一种玉芩颗粒的指纹图谱检测方法。
2、为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案是：
3、提供一种玉芩颗粒的指纹图谱检测方法，步骤包括：
4、s1、所述玉芩颗粒中三七皂苷、人参皂苷rb1
5、s11、制备第一供试品溶液：将所述玉芩颗粒于正丁醇的水溶液中溶解，并进行第一后处理，即得；
6、s12、制备第一对照品溶液：将所述三七皂苷、所述人参皂苷rb1、所述人参皂苷rg1以及所述柴胡皂苷a于甲醇中溶解，即得；
7、s13、将所述第一供试品溶液与所述第一对照品溶液分别注入高效液相色谱仪，比对所述第一供试品溶液与所述第一对照品溶液的所述高效液相色谱的结果，计算所述三七皂苷、所述人参皂苷rb1、所述人参皂苷rg1以及所述柴胡皂苷a的含量；其中，所述高效液相色谱的条件包括：
8、色谱柱的长度为100mm-200mm；所述色谱柱的内径为2mm-3mm；所述色谱柱的填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶，所述十八烷基硅烷键合硅胶的粒径为2.0μm-3.0μm；检测波长为200nm-210nm；洗脱方式为梯度洗脱；流动相a为乙腈，流动相b为体积分数为0.1％的磷酸水溶液；所述梯度洗脱的程序包括：
9、0min，乙腈5％，0.1％的磷酸水溶液95％；
10、20min，乙腈15％，0.1％的磷酸水溶液85％；
11、30min，乙腈15％，0.1％的磷酸水溶液85％；
12、45min，乙腈30％，0.1％的磷酸水溶液70％；
13、55min，乙腈50％，0.1％的磷酸水溶液50％；
14、65min，乙腈100％，0.1％的磷酸水溶液0％；
15、s2、所述玉芩颗粒中特女贞苷、橙皮苷以及大豆苷元的检测：
16、s21、制备第二供试品溶液：将所述玉芩颗粒于甲醇中溶解，并进行第一后处理，即得；
17、s22、制备第二对照品溶液：将所述特女贞苷、所述橙皮苷以及所述大豆苷元于甲醇中溶解，即得；
18、s23、将所述第二供试品溶液与所述第二对照品溶液分别注入高效液相色谱仪，比对所述第二供试品溶液与所述第二对照品溶液的所述高效液相色谱的结果，计算所述特女贞苷、所述橙皮苷以及所述大豆苷元的含量；其中，所述高效液相色谱的条件包括：
19、色谱柱的长度为100mm-200mm；所述色谱柱的内径为2mm-3mm；所述色谱柱的填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶，所述十八烷基硅烷键合硅胶的粒径为2.0μm-3.0μm；检测波长为250nm-260nm；洗脱方式为梯度洗脱；流动相a为乙腈，流动相b为体积分数为0.1％的磷酸水溶液；所述梯度洗脱的程序包括：
20、0min，乙腈5％，0.1％的磷酸水溶液95％；
21、20min，乙腈15％，0.1％的磷酸水溶液85％；
22、30min，乙腈15％，0.1％的磷酸水溶液85％；
23、45min，乙腈30％，0.1％的磷酸水溶液70％；
24、55min，乙腈50％，0.1％的磷酸水溶液50％；
25、65min，乙腈100％，0.1％的磷酸水溶液0％。
26、优选地，步骤s11包括：称取4.0g-6.0g所述玉芩颗粒，将所述玉芩颗粒于50ml所述正丁醇的饱和水溶液中溶解，并进行所述第一后处理，即得所述第一供试品溶液；
27、其中，所述第一后处理包括：依次进行回流处理以及静置处理后，取上清液，采用氨试液进行洗涤处理进行蒸干处理，加入5ml甲醇进行溶解处理。
28、优选地，所述第一对照品溶液中，所述三七皂苷、所述人参皂苷rb1、所述人参皂苷rg1以及所述柴胡皂苷a的质量体积比均为40μg/ml-70μg/ml。
29、优选地，步骤s13中，所述高效液相色谱的条件还包括：所述色谱柱的柱温为27℃-33℃；进样量为1μl-3μl，流速为0.25ml/min-0.35ml/min。
30、优选地，步骤s13中，所述高效液相色谱的检测波长为203nm。
31、优选地，所述第一对照品溶液的指纹图谱包括：与所述三七皂苷对应的峰14、与所述人参皂苷rb1对应的峰15、与所述人参皂苷rg1对应的峰18，以及与所述柴胡皂苷a对应的峰20。
32、优选地，步骤s21包括：称取1.0g-3.0g所述玉芩颗粒，将所述玉芩颗粒于25ml甲醇中溶解，并进行所述第二后处理，即得所述第二供试品溶液；
33、其中，所述第二后处理包括：依次进行超声处理以及静置处理后，采用甲醇进行稀释处理、混匀处理以及过滤处理。
34、更优选地，所述超声处理的功率为250w，频率为40khz。
35、优选地，所述第二对照品溶液中，所述特女贞苷、所述橙皮苷以及所述大豆苷元的质量体积比均为40μg/ml-70μg/ml。
36、优选地，步骤s23中，所述高效液相色谱的条件还包括：所述色谱柱的柱温为27℃-33℃；进样量为1μl-3μl，流速为0.25ml/min-0.35ml/min。
37、优选地，步骤s23中，所述高效液相色谱的检测波长为254nm。
38、优选地，所述第二对照品溶液的指纹图谱包括：与所述特女贞苷对应的峰6、与所述橙皮苷对应的峰7，以及与所述大豆苷元对应的峰8。
39、本专利技术采用以上技术方案，与现有技术相比，具有如下技术效果：
40、本专利技术通过建立玉芩颗粒双波长指纹图谱，能够更好地反映出玉芩颗粒的多个指标性成分信本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种玉芩颗粒的指纹图谱检测方法，其特征在于，步骤包括：
2.根据权利要求1所述的指纹图谱检测方法，其特征在于，步骤S11包括：称取4.0g-6.0g所述玉芩颗粒，将所述玉芩颗粒于50mL所述正丁醇的饱和水溶液中溶解，并进行所述第一后处理，即得所述第一供试品溶液；
3.根据权利要求1所述的指纹图谱检测方法，其特征在于，所述第一对照品溶液中，所述三七皂苷、所述人参皂苷Rb1、所述人参皂苷Rg1以及所述柴胡皂苷A的质量体积比均为40μg/mL-70μg/mL。
4.根据权利要求1所述的玉芩颗粒指纹图谱检测方法，其特征在于，步骤S13中，所述高效液相色谱的条件还包括：所述色谱柱的柱温为27℃-33℃；进样量为1μL-3μL，流速为0.25mL/min-0.35mL/min。
5.根据权利要求1所述的指纹图谱检测方法，其特征在于，所述第一对照品溶液的指纹图谱包括：与所述三七皂苷对应的峰14、与所述人参皂苷Rb1对应的峰15、与所述人参皂苷Rg1对应的峰18，以及与所述柴胡皂苷A对应的峰20。
6.根据权利要求1所述的指纹图谱检
7.根据权利要求6所述的指纹图谱检测方法，其特征在于，所述超声处理的功率为250W，频率为40kHz。
8.根据权利要求1所述的指纹图谱检测方法，其特征在于，所述第二对照品溶液中，所述特女贞苷、所述橙皮苷以及所述大豆苷元的质量体积比均为40μg/mL-70μg/mL。
9.根据权利要求1所述的玉芩颗粒指纹图谱检测方法，其特征在于，步骤S23中，所述高效液相色谱的条件还包括：所述色谱柱的柱温为27℃-33℃；进样量为1μL-3μL，流速为0.25mL/min-0.35mL/min。
10.根据权利要求1所述的指纹图谱检测方法，其特征在于，所述第二对照品溶液的指纹图谱包括：与所述特女贞苷对应的峰6、与所述橙皮苷对应的峰7，以及与所述大豆苷元对应的峰8。
...【技术特征摘要】
1.一种玉芩颗粒的指纹图谱检测方法，其特征在于，步骤包括：
2.根据权利要求1所述的指纹图谱检测方法，其特征在于，步骤s11包括：称取4.0g-6.0g所述玉芩颗粒，将所述玉芩颗粒于50ml所述正丁醇的饱和水溶液中溶解，并进行所述第一后处理，即得所述第一供试品溶液；
3.根据权利要求1所述的指纹图谱检测方法，其特征在于，所述第一对照品溶液中，所述三七皂苷、所述人参皂苷rb1、所述人参皂苷rg1以及所述柴胡皂苷a的质量体积比均为40μg/ml-70μg/ml。
4.根据权利要求1所述的玉芩颗粒指纹图谱检测方法，其特征在于，步骤s13中，所述高效液相色谱的条件还包括：所述色谱柱的柱温为27℃-33℃；进样量为1μl-3μl，流速为0.25ml/min-0.35ml/min。
5.根据权利要求1所述的指纹图谱检测方法，其特征在于，所述第一对照品溶液的指纹图谱包括：与所述三七皂苷对应的峰14、与所述人参皂苷rb1对应的峰15、与所述人参皂苷rg1对应的峰18，以及与所述柴胡皂...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘志远，袁佳慧，范蕴隆，戴薇萍，姜旸，
申请(专利权)人：上海中药制药技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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