制备极窄范围的8至35nm粒径的含紫杉烷的两亲嵌段共聚物胶束组合物的方法技术

载了制备粒径8~35nm极窄范围的含紫杉烷的两亲嵌段共聚物胶束组合物的方法。通过该方法所制备的紫杉烷类聚合物胶束复溶后平均粒径在12~19nm，D10在8~12nm，D90在20~28nm，多分散系数小于0.1的包含紫杉烷药物的两亲性嵌段共聚物组合物方法，此粒径大小符合人体生理结构分布要求，提高粒子穿透肿瘤组织效率；解决现有成束技术由于长时间高温导致活性成份降解，尤其按照现有最新标准方法，减小温度敏感杂质的降解，降低毒副作用，符合新药申报要求，使其成药。

A method for preparing two parent block copolymer micelles containing taxane with very narrow range of 8~35nm particle size

A method for preparing two parent block copolymer micelles containing taxane in a narrow range of particle size 8~35nm. Which is made by the method of polymer micelle preparation of taxanes after reconstitution with an average size of 12~19nm, D10 in 8~12nm, D90 in 20~28nm, the polydispersity of 0.1 contains taxane drug two amphiphilic block copolymer composition method is less than the coefficient, particle size distribution accords with the physiological structure of the human body, improve the particle penetration of tumor tissue efficiency; solve the existing beam forming technology because of the long time high temperature lead to degradation of active ingredients, especially according to the latest available standard methods, reduce the degradation of temperature sensitive impurities, reduce the adverse effect of drugs with the reporting requirements, the medicine.

【技术实现步骤摘要】
制备极窄范围的8~35nm粒径的含紫杉烷的两亲嵌段共聚物胶束组合物的方法
本专利技术属于药物剂型和纳米药物制备
，实施方案涉及粒径范围8~35nm含紫杉烷的两亲嵌段共聚物胶束组合物及其制备方法。
技术介绍
癌症已成为国人疾病死因之首。据发表在CA：ACancerJournalforClinicians（IF=144.8）杂志的《2015年中国癌症统计》一文分析显示，2015年中国有新发浸润性癌病例数429.2万，相当于平均每天新发12000例癌症，有281.4万癌症死亡病例，相当于平均每天7500人死于癌症。癌症的发病率和死亡率均呈逐年上升的趋势。由于肿瘤血管的高渗透性、血流复杂性、间质内压高，导致化疗药物通常只能渗透三到五层细胞直径的血管壁，几乎没有药物能达到远端的肿瘤细胞，导致耐药性发生。尤其粒径在50nm以上的纳米载体在肿瘤组织穿透力上是有所欠缺，100nm以上的纳米载体在渗透性差的肿瘤组织，基本无疗效。H.Cabral等2011年在naturenanotechnology发表研究显示只有粒径在30nm以下的粒子可有效穿透渗透性较差的胰腺癌取得较好抗肿瘤效果；VikashP.Chauhan等也于2012年在naturenanotechnology上发表纳米药物粒径在12nm是最理想的大小，这个大小的粒子对肿瘤组织有较好的穿透性，才能发挥较好的抗肿瘤效果，这与人体生理结构，肾的清除阈值8nm以下相符。脂质体属于第一代纳米制剂，其粒径范围多在50~150nm，其制备工艺复杂，成本高；虽然将药物包裹在脂质体中能够改善药物动力学和生物分布，但是与传统的药物制剂相比，市场上的脂质体治疗药剂仅是降低了原有普通制剂的毒副作用，提高患者生命质量，但其对总的存活率（OS）并不理想。近年，聚合物纳米抗癌药物在缓控释靶向给药制剂研究中崭露头角，其作为抗肿瘤药物载体具有显著的优势和广泛的应用前景。其中可以自组装成纳米级微粒的聚合物胶束（Polymericmicelles），以其对疏水性药物较大的亲合性，较小的粒径范围（10nm~100nm），较高的载药量、包封率，低毒高效，药物缓慢释放，制成粉末（冷冻干燥或喷雾干燥）可长期保存；易于实现工业化大生产等优点，成为国内外新药技术研究的热点。然而目前所发表的文献及上市、不同临床阶段的聚合物胶束，其粒径范围均很宽、较大，如韩国紫杉醇胶束Cynviloq，其申请的专利“96197134.7”、“200880123622.6”在组成、制备工艺上并不能有效控制粒径范围及粒径大小，其粒径范围在10~100nm，平均粒径在20~50nm范围，50%的粒子超过30nm；而胶束粒子在超过30nm以上，其对肿瘤组织的渗透性就会变差，其疗效就会降低。日本nanocarrier公司的NK105粒径范围20~430nm，平均粒径在85nm，这也是其III期临床结果不理想的原因。而经典的紫杉醇白蛋白制剂Abraxane，其体外粒径检测平均粒径在130nm，但在体内经血浆稀释后，粒径在10nm左右，这也是其临床抗肿瘤效果显著的原因；但是其制备工艺复杂、成本高导致临床患者负担重，推广受限。
技术实现思路
专利技术目的：解决现有技术无法有效控制成束粒子粒径大小、粒径范围问题，通过本专利技术开发出制备粒径范围极窄8~35nm，复溶后平均粒径在12~19nm，D10在8~12nm，D90在20~28nm，多分散系数小于0.1的包含紫杉烷药物的两亲性嵌段共聚物组合物方法，此粒径大小符合人体生理结构分布要求，提高粒子穿透肿瘤组织效率；解决现有成束技术由于长时间高温导致活性成份降解，尤其按照USP40版药典方法中，对温度敏感的杂质4增多，毒副作用增多问题。为实现上述技术目的，本专利技术采取如下技术方案：制备极窄范围的粒径8~35nm的含紫杉烷的两亲嵌段共聚物胶束组合物的方法。所述含紫杉烷的两亲嵌段共聚物胶束组合物复溶后平均粒径在12~25nm，多分散系数小于0.1的包含紫杉烷、两亲性嵌段共聚物以及冻干赋型剂。所述制备方法包含：(1)严格的两亲嵌段共聚物嵌段比、分子量，其所述的两亲性嵌段共聚物其亲水嵌段（A）是甲氧基聚乙二醇2000，并且所述疏水嵌段B是聚乳酸（PLA）或聚乳酸和乙醇酸的共聚物（PLGA），疏水嵌段分子量为1600~2200，A/B质量比在1.02~1.18(2)将紫杉烷和所述两亲嵌段共聚物溶解在有机溶剂中，而后快速除掉有机溶剂，得到物料A(3)将物料A加注射用水，并严格控制温度25~65℃条件下，旋转超声使之快速水化成束，而后降温至0~10℃，并加入冻干赋型剂溶液混合，再通过纳米级滤膜积压过滤，滤液分装、冻干。其中所述紫杉烷是紫杉醇、多西紫杉醇、拉洛他赛、卡巴他赛、康莫他赛、阿齐他赛、信立他赛或者他们的混合物；所述有机溶剂选自乙醇、甲醇、叔丁醇、乙腈的一种或多种；所述冻干赋型剂选自甘露醇、乳糖、蔗糖、右旋糖酐、甘氨酸、果糖、山梨醇的一种或多种等。所述快速除掉有机溶剂方法选择喷雾、冻干、旋蒸方法中的任意一种方法；其中所述旋转超声使之水化，是将超声与旋转结合，严格控制温度、旋转速度、超声强度、频率使其快速成束，提高样品稳定性，并控制成束粒径在极小、极窄的范围，其温度在25~65℃，优选28~35℃，其旋转速度10~500r/min，优选150~250r/min，其超声声强在0.1~150w/cm2，频率0.1KHZ~100KHz；其纳米级滤膜选自孔径10~300nm的滤膜。应用本专利技术的紫杉烷类药物的胶束或冻干制剂可用于治疗患有癌症、肿瘤、卡波西肉瘤、恶性肿瘤、继发于组织损伤的失调的组织或细胞增生以及任何其他对紫杉烷类药物反应的疾病的患者，在治疗特别有效的癌症类型中有肝细胞癌和肝转移瘤、卵巢癌、乳腺癌等。附图说明图1为实施例1制备的多西他赛胶束冻干制剂、冻干制剂复溶后的性状照片。图2为多西他赛胶束（实施例1）粒径。图3为多西他赛胶束（实施例1）透射电镜照片。图4为多西他赛胶束（实施例1）有关物质图谱。图5为多西他赛胶束（实施例15）非专利技术制备的样品的粒径图。图6为多西他赛胶束（实施例15）非专利技术制备样品的有关物质图谱。图7为多西他赛胶束实施例1与市售品泰素帝、实施例15样品抗胰腺癌效果图表1：为图2多西他赛胶束（实施例1）粒径分布数据表2：为图4多西他赛胶束（实施例1）有关物质图谱数据表3：为图5多西他赛胶束（实施例15）非专利技术制备的样品的粒径分布数据表4：为图6多西他赛胶束（实施例15）有关物质图谱数据具体实施方式以下是本专利技术中所用材料的中文名及对应简称的说明：1、二嵌段聚合物：甲氧基聚乙二醇-聚（D,L-乳酸），简称MePEG－PDLLA，或MPEG－PLA。2、甲氧基聚乙二醇，简称MePEG，或MPEG。3、聚（D,L-乳酸），简称PDLLA。实施例1（1）将95.014g甲氧基聚乙二醇聚（D,L-乳酸）(MPEG2000-PDLLA1776)和5.007g多西他赛溶于0.2L无水乙醇中，加热或超声搅拌至完全溶解，得到澄清溶液A；（2）将澄清溶液A旋蒸去掉有机溶剂，使之呈透明凝胶B；（3）将预热过的1.5L注射用水，加入凝胶B，在60℃，200r/min搅拌，声强10~30w/cm2，频率本文档来自技高网...

【技术保护点】
制备极窄范围的粒径8~35nm的含紫杉烷的两亲嵌段共聚物胶束组合物的方法，所述含紫杉烷的两亲嵌段共聚物胶束组合物复溶后平均粒径在12~25nm，多分散系数小于0.1 的包含紫杉烷、两亲性嵌段共聚物以及冻干赋型剂，所述制备方法包含：(1)严格的两亲嵌段共聚物嵌段比、分子量(2)将紫杉烷和所述两亲嵌段共聚物溶解在有机溶剂中，而后快速除掉有机溶剂，得到物料A(3)将物料A加注射用水，并严格控制温度25~65℃条件下，旋转超声使之快速水化成束，而后降温至0~10℃，并加入冻干赋型剂溶液混合，再通过纳米级滤膜积压过滤，滤液分装、冻干。

【技术特征摘要】
1.制备极窄范围的粒径8~35nm的含紫杉烷的两亲嵌段共聚物胶束组合物的方法，所述含紫杉烷的两亲嵌段共聚物胶束组合物复溶后平均粒径在12~25nm，多分散系数小于0.1的包含紫杉烷、两亲性嵌段共聚物以及冻干赋型剂，所述制备方法包含：(1)严格的两亲嵌段共聚物嵌段比、分子量(2)将紫杉烷和所述两亲嵌段共聚物溶解在有机溶剂中，而后快速除掉有机溶剂，得到物料A(3)将物料A加注射用水，并严格控制温度25~65℃条件下，旋转超声使之快速水化成束，而后降温至0~10℃，并加入冻干赋型剂溶液混合，再通过纳米级滤膜积压过滤，滤液分装、冻干。2.如权利要求1所述的方法，其中所述严格的两亲嵌段共聚物含有亲水嵌段（A）和疏水嵌段（B）的两亲嵌段共聚物A-B型嵌段共聚物。3.如权利要求1所述的方法，其中所述紫杉烷是紫杉醇、多西紫杉醇、拉洛他赛、卡巴他赛、康莫他赛、阿齐他赛、信立他赛或者他们的混合物。4.如权...

【专利技术属性】
技术研发人员：不公告发明人，
申请(专利权)人：山东华铂凯盛生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37