脉络通颗粒的指纹图谱检测方法及其指纹图谱技术

本发明专利技术公开了一种脉络通颗粒指纹图谱检测方法，该方法采用高效液相色谱法建立，色谱条件包括：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.3体积％甲酸水溶液为流动相B，梯度洗脱，流速0.5～1.5ml·min‑1，柱温20～35℃，检测波长210～360nm；理论塔板数按芦丁峰计算应不低于3000。实验验证表明，本发明专利技术的检测方法，稳定性和重复性好、分析速度快，分析效率高，避免了现有技术质量控制的单一性和片面性，从而可以客观、全面、准确的评价脉络通颗粒的质量，对控制脉络通颗粒的质量和保证临床疗效具有重要意义。另一方面，本发明专利技术还提供了通过如上所述的脉络通颗粒指纹图谱检测方法得到的脉络通颗粒指纹图谱。

Fingerprint detection method and fingerprint chromatogram of mailutong granules

The invention discloses a detection method of Mailuotong granule fingerprint, the method using high performance liquid chromatography established, the chromatographic conditions include: Eighteen alkyl silane bonded silica as filler, with acetonitrile as mobile phase A, with 0.3 vol% aqueous formic acid as mobile phase B, gradient elution, flow rate of 0.5 ~ 1.5ml min 1, column temperature 20 to 35 DEG C, the detection wavelength of 210 ~ 360nm; the number of theoretical plates should not be less than 3000 calculated by Ding Feng lu. The experimental results show that the detecting method of the invention, good stability and repeatability, fast analysis speed, high analysis efficiency, avoid singleness of existing technology of quality control and one sidedness, and quality evaluation objective, comprehensive and accurate Mailuotong granules, and has important significance to the clinical curative effect of quality control of pulse Luotong particles and guarantee. On the other hand, the invention also provides a fingerprint of the mailutong granules obtained by the method of detecting the fingerprint of the mailutong granule, as described above.

【技术实现步骤摘要】
脉络通颗粒的指纹图谱检测方法及其指纹图谱
本专利技术属于中药检测
，具体地说，涉及一种脉络通颗粒的指纹图谱检测方法及其指纹图谱。
技术介绍
脉络通颗粒具有益气活血、化瘀止痛、通脉活络的功能。适用于治疗胸痹引起的心胸疼痛、胸闷气短、头痛眩晕及冠心病、心绞痛具有上述诸症，中风引起的肢体麻木、半身不遂等症。脉络通颗粒组方出自《中药部颁标准》的“脉络通颗粒”，且于1987年独家生产、上市。脉络通颗粒的组方中，以党参、当归为君药，益气兼以养血；红花、丹参、川芎、地龙为臣药，辅助君药达到活血通脉的功效；山楂为佐药，通行气血，活血祛瘀止痛；木贼、葛根、槐米为使药，能够升清通痹，助药上行，直达病所。君臣佐使，全方配伍，益气活血、化瘀止痛，适用于气虚血瘀、心脉痹阻的冠心病心绞痛患者。中药指纹图谱是指某些中药材或中药制剂经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示其化学特征的色谱图或光谱图。中药指纹图谱是一种综合的，可量化的鉴定手段，它是建立在中药化学成分系统研究的基础上，主要用于评价中药材以及中药制剂半成品质量的真实性、优良性和稳定性。“整体性”和“模糊性”为其显著特点。在现阶段，中药的有效成分绝大多数没有明确的情况下，中药指纹图谱对于有效控制中药材或中成药的质量具有重要的意义。日本汉方药主要生产企业在20世纪80年代就已经在企业内部采用高效液相指纹图谱控制质量。德国和法国也已经在用高效液相指纹图谱方法对银杏叶提取物进行质量控制，美国最近几年也明确把指纹图谱作为混合物群的质量控制方法。随着研究的深入，人们发现，作为中医理论的实践产物，中药，尤其是复方中药，其中所含的任一种成分都不能代表其整体疗效。人们逐渐认识到，现行的参照化药质量控制模式的质量标准不能恰当的反映中药内在的质量。从现行的质量控制模式向一种综合的、宏观的、可量化的鉴别与主要有效成分含量测定结合已是发展的趋势。脉络通颗粒共有10味药材，现行质量标准中只对主成分葛根素进行含量测定是不够的，必须对它的物质群整体予以控制。所以，除了“微观分析”外，还应该用某种“宏观分析”方法，从整体上有效的表征中药质量。所以建立一种脉络通颗粒的指纹图谱检测方法势在必行。
技术实现思路
本专利技术人开发了一种脉络通颗粒的指纹图谱检测方法及其指纹图谱，通过此方法可以保证脉络通颗粒的质量稳定性、一致性和可控性，从而确保脉络通颗粒的安全性和有效性。本专利技术的目的是提供一种脉络通颗粒的指纹图谱检测方法。本专利技术的第二目的是提供用于脉络通颗粒的指纹图谱检测方法的指纹图谱。在本专利技术的实施方案中，本专利技术提供了一种脉络通颗粒的指纹图谱检测方法，包括采用高效液相色谱法对脉络通颗粒进行检测，其中，色谱条件包括：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.3体积％甲酸水溶液为流动相B，梯度洗脱，流速0.5～1.5ml·min-1，柱温20～35℃，检测波长210～360nm；理论塔板数按芦丁峰计算应不低于3000。在本专利技术的优选实施方案中，本专利技术提供的一种脉络通颗粒的指纹图谱检测方法，其中，梯度洗脱过程中，流动相A的比例变化为：0～3min，5体积％乙腈；3～50min，5体积％～42体积％乙腈；50～50.1min，42体积％～95体积％乙腈；50.1～60min，95体积％乙腈；即梯度洗脱程序如下表：在本专利技术的优选实施方案中，本专利技术提供的一种脉络通颗粒的指纹图谱检测方法，其中，所述的以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱为phenomenenxluna(2)C18(4.6*250mm，5um)。在本专利技术的优选实施方案中，本专利技术提供的一种脉络通颗粒的指纹图谱检测方法，还包括以下步骤：(1)供试品溶液的制备：取脉络通颗粒2.0g，精密称定，置100ml具塞锥形瓶中，精密加入70体积％乙醇25～75ml，密塞，称定重量，超声处理(250w，40KHz)10～40分钟，放冷，用70体积％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；(2)对照品溶液的制备：取葛根素、芦丁、阿魏酸、党参炔苷、丹酚酸B、槲皮素、山柰素适量，加70体积％乙醇制成每1ml含葛根素112μg、芦丁204μg、阿魏酸44μg、党参炔苷32μg、丹酚酸B92μg、槲皮素40μg、山柰素28μg的混合对照品溶液，即得；(3)测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2～10μl，注入高效液相色谱仪，记录60分钟内的色谱图，用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》2004A版对图谱进行处理，即得脉络通颗粒的指纹图谱。在本专利技术的更优选实施方案中，本专利技术提供了一种脉络通颗粒的指纹图谱检测方法，包括以下步骤：(1)供试品溶液的制备：取脉络通颗粒2.0g，精密称定，置100ml具塞锥形瓶中，精密加入70体积％乙醇50ml，密塞，称定重量，超声(250w，40KHz)处理20分钟，放冷，用70体积％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；(2)对照品溶液的制备：取葛根素、芦丁、阿魏酸、党参炔苷、丹酚酸B、槲皮素、山柰素适量，加70体积％乙醇制成每1ml含葛根素112μg、芦丁204μg、阿魏酸44μg、党参炔苷32μg、丹酚酸B92μg、槲皮素40μg、山柰素28μg的混合对照品溶液，即得；(3)测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入高效液相色谱仪，记录60分钟内的色谱图，用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》2004A版对图谱进行处理，即得脉络通颗粒的指纹图谱；这里，所述高效液相色谱测定的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A；以0.3％甲酸水溶液为流动相B；梯度洗脱，流速1.0ml·min-1；柱温25℃；检测波长270nm；理论塔板数按芦丁甲峰计算应不低于3000。另一方面，本专利技术提供了通过上述脉络通颗粒的指纹图谱检测方法得到的脉络通颗粒指纹图谱，所述图谱中有21个共有峰。在本专利技术的优选实施方案中，本专利技术提供的脉络通颗粒指纹图谱，所述图谱中有21个共有峰，其中，各共有峰的保留时间分别为：共有峰1：13.234min；共有峰2：15.952min；共有峰3：17.602min；共有峰4：20.612min；共有峰5：21.099min；共有峰6：21.321min；共有峰7：24.057min；共有峰8：27.190min；共有峰9：28.845min；共有峰10：29.452min；共有峰11：29.830min；共有峰12：30.206min；共有峰13：33.715min；共有峰14：34.979min；共有峰15：37.136min；共有峰16：38.789min；共有峰17：39.278min；共有峰18：39.610min；共有峰19：41.671min；共有峰20：45.049min；共有峰21：48.173min。本专利技术的有益效果是：(1)用本专利技术所提供的方法所建立的脉络通颗粒指纹图谱，能有效地表征脉络通颗粒的质量，有利于全面监控药物的质量。(2)指纹图谱注重各个构成指纹特征峰的前后顺序和相互关系，注重整体面貌特征，既避免了因测定个别化学成分而判定脉络通颗粒质量的片面性，又减少了为质量达标而人为处理的可能性。(3)本专利技术方法具有方法简便、稳定、精密度高、重现性好的优点。在本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种脉络通颗粒的指纹图谱检测方法，包括采用高效液相色谱法对脉络通颗粒进行检测，其中，色谱条件包括：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.3体积％甲酸水溶液为流动相B，梯度洗脱，流速0.5～1.5ml·min

【技术特征摘要】
1.一种脉络通颗粒的指纹图谱检测方法，包括采用高效液相色谱法对脉络通颗粒进行检测，其中，色谱条件包括：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.3体积％甲酸水溶液为流动相B，梯度洗脱，流速0.5～1.5ml·min-1，柱温20～35℃，检测波长210～360nm；理论塔板数按芦丁峰计算应不低于3000。2.如权利要求1所述的检测方法，其中，梯度洗脱过程中，流动相A的比例变化为：0～3min，5体积％乙腈；3～50min，5体积％～42体积％乙腈；50～50.1min，42体积％～95体积％乙腈；50.1～60min，95体积％乙腈；即梯度洗脱程序如下表：3.如权利要求1所述的检测方法，其中，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱为phenomenenxluna(2)C18，4.6*250mm，5um。4.如权利要求1-3中任一项所述的检测方法，还包括以下步骤：(1)供试品溶液的制备：取脉络通颗粒2.0g，精密称定，置100ml具塞锥形瓶中，精密加入70体积％乙醇25～75ml，密塞，称定重量，在250w，40KHz的条件下超声处理10～40分钟，放冷，用70体积％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；(2)对照品溶液的制备：取葛根素、芦丁、阿魏酸、党参炔苷、丹酚酸B、槲皮素、山柰素适量，加70体积％乙醇制成每1ml含葛根素112μg、芦丁204μg、阿魏酸44μg、党参炔苷32μg、丹酚酸B92μg、槲皮素40μg、山柰素28μg的混合对照品溶液，即得；(3)测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2～10μl，注入高效液相色谱仪，记录60分钟内的色谱图，用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》2004A版对图谱进行处理，即得脉络通颗粒的指纹图谱。5.一种脉络通颗粒的指纹图谱检测方法，包括以下步骤：(1)供试品溶液的制备：取脉络通颗粒2.0g，精密称定，置100ml具塞锥形瓶中，精密加入70体积％乙醇25～75ml，密塞，称定重...

【专利技术属性】
技术研发人员：俞洁东，吴革林，曾海松，董阗伟，李敏，陈顺中，曹泽庆，张丽，邵扬，
申请(专利权)人：扬子江药业集团有限公司，扬子江药业集团江苏龙凤堂中药有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32