一种防治糖尿病足的干细胞组合物及其应用、干细胞制剂制造技术

本发明专利技术涉及干细胞技术领域，特别涉及一种防治糖尿病足的干细胞组合物及其应用、干细胞制剂。该干细胞组合物由间充质干细胞和外周血单个核细胞组成。本发明专利技术干细胞组合物可有效防治糖尿病足，效果好于干细胞或外周血单个核细胞单独使用的效果，间充质干细胞和外周血单个核细胞联合使用具有协同增效作用。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】一种防治糖尿病足的干细胞组合物及其应用、干细胞制剂
本专利技术涉及干细胞
，特别涉及一种防治糖尿病足的干细胞组合物及其应用、干细胞制剂。
技术介绍
近年来，随着世界人口老龄化的速度加快，糖尿病患者的数目急剧增加，严重影响了个人的生活质量。糖尿病的危害性很大程度上源于它的多种并发症，其中缺血性糖尿病足是最常见且最严重的并发症之一，且因其较高的病死率、截肢率和感染率，成为糖尿病患者致残和致死的常见原因。糖尿病足的主要临床表现为间歇性跛行、静息痛、足部溃疡和坏疽等，不但给患者造成痛苦，而且给社会和家庭带来了巨大的经济负担。长期以来对于糖尿病足的治疗处于相对混乱无序的状态，大量患者分散于骨科、普外科、内科、中医科，临床医生多将其归为神经病变和感染，下肢缺血引起的糖尿病足溃疡远未受到应有的重视。目前对缺血性糖尿病足的治疗仍缺乏有效的手段，由于其累及范围广，且有多支及多节段性等特点，传统治疗主要是内科的药物治疗和外科的血流重建,然而对于因远端流出道动脉闭塞性病变导致的足部缺血来说，药物治疗不能从根本上解决问题,外科血流重建是首先应该考虑的方法。但是,此类患者多为年老体弱，经常伴有心脑血管病变，无法接受动脉搭桥或下肢动脉介入等外科治疗而经常面临着截肢的危险。总之，目前临床上一般采用药物、血管搭桥、介入手术等方式治疗，都具有一定局限性，远期效果很不理想。如何促进糖尿病缺血下肢血管再生和有效循环的建立是治疗关键。干细胞是一类具有自我复制能力和分化能力的多潜能细胞，具有再生各种组织器官的潜在功能，医学界将其称之为“万用细胞”。而干细胞移植作为治疗血管再生的新疗法，为糖尿病足患者带来了希望，并成为近年来研究的热点。其治疗机制主要是参与新生血管形成、启动和分泌相关因子、免疫调节以及干细胞的增殖和分化能力等有关。干细胞移植后，一方面整合于受损的血管丛，在缺血、缺氧环境下可诱导生成血管内皮细胞、平滑肌细胞等，使其分化、形成新生毛细血管，促进血管再生；另一方面，干细胞可通过自分泌或旁分泌途径等反应性分泌多种生长因子，如血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子和神经生长因子等细胞因子，与内皮细胞膜上的相应受体结合，促进内皮细胞增殖、迁移、重塑，形成新生血管，进一步促进局部新生血管形成、神经再生和重构等，最终可改善微循环，恢复患肢血流，提高患肢皮肤温度，实现促进创面愈合，达到治疗目的。外周血单个核细胞(Peripheralbloodmononuclearcell，PBMC)，即外周血中具有单个核的细胞，包括淋巴细胞和单核细胞。徐世民于2013年发表的《自体外周血干细胞移植治疗糖尿病足的疗效及其与CD34+水平关系的研究》文章中报道了自体外周血干细胞移植后患者有明显的侧支循环建立，局部血运改善，利于溃疡愈合，从而避免了截肢或最大限度降低了截肢平面。目前还未见将间充质干细胞与外周血单个核细胞共同治疗缺血性糖尿病足的报道。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术提供了一种防治糖尿病足的干细胞组合物及其应用、干细胞制剂。该干细胞组合物可有效防治糖尿病足，效果好于干细胞或外周血单个核细胞单独使用的效果。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：本专利技术提供了一种干细胞组合物，由间充质干细胞和外周血单个核细胞组成。在本专利技术中将间充质干细胞和外周血单个核细胞联合使用后，可有效治疗糖尿病足，效果好于干细胞或外周血单个核细胞单独使用的效果。作为优选，干细胞组合物中间充质干细胞与外周血单个核细胞的细胞数量比例为(1～5)：(1～5)。在本专利技术提供的实施例中，干细胞组合物中间充质干细胞与外周血单个核细胞的细胞数量比例为1：1。作为优选，间充质干细胞为脐带间充质干细胞、骨髓间充质干细胞或脂肪间充质干细胞。本专利技术还提供了该干细胞组合物在制备预防和/或治疗糖尿病足药物中的应用。本专利技术还提供了一种干细胞制剂，包括间充质干细胞、外周血单个核细胞、人血白蛋白和溶媒。在本专利技术提供的实施例中，干细胞制剂的剂型为静脉注射剂或皮下注射剂。作为优选，干细胞制剂为静脉注射剂，各组分浓度为：间充质干细胞：(1～5)×105个/mL；外周血单个核细胞：(1～5)×105个/mL；人血白蛋白：5wt％；溶媒：补足。在本专利技术中，静脉输注静脉注射液按照体重以5～10×105个/kg的标准将本专利技术干细胞制剂沿静脉回输至患者体内。作为优选，干细胞制剂为皮下注射剂，各组分浓度为：间充质干细胞：(1～5)×106个/mL；外周血单个核细胞：(1～5)×106个/mL；人血白蛋白：5wt％；溶媒：补足。优选地，干细胞制剂为皮下注射剂，各组分浓度为：间充质干细胞：2×106个/mL；外周血单个核细胞：2×106个/mL；人血白蛋白：5wt％；溶媒：补足。在本专利技术中，患处局部注射皮下注射剂时，将含2×107个间充质干细胞的干细胞制剂装入5mL注射器，缓慢注入患处，注射完毕后用无菌纱布按压针眼处3～5min，患者俯卧30min，期间每5min活动患处8～10次。作为优选，溶媒为复方电解质注射液、葡萄糖注射液或生理盐水。在本专利技术提供的实施例中，溶媒为生理盐水。本专利技术提供了一种防治糖尿病足的干细胞组合物及其应用、干细胞制剂。该干细胞组合物由间充质干细胞和外周血单个核细胞组成。本专利技术至少具有如下优势之一：1、本专利技术干细胞组合物可有效防治糖尿病足，效果好于干细胞或外周血单个核细胞单独使用的效果，间充质干细胞和外周血单个核细胞联合使用具有协同增效作用。2、使用安全，没有毒副作用。间充质干细胞具有来源广泛、含量丰富、分离简单、体外扩增稳定容易、不涉及伦理问题、便于自体/异体移植、免疫原性低、对供区损伤小等优势，备受临床医生的重视。研究显示，间充质干细胞能够有效调节免疫，分泌营养因子修复受损血管、促进新生血管生成、改善微环境等，为糖尿病下肢血管病变治疗提供了新途径。3、本专利技术干细胞组合物及其制剂能标本兼治，收到治本效果；治疗方法简便易行，患者都能接受和使用，对于那些无法进行下肢搭桥的，及年老体弱、并伴发其他疾病不能接受手术搭桥的患者来说尤为合适。具体实施方式本专利技术公开了一种防治糖尿病足的干细胞组合物及其应用、干细胞制剂，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本专利技术。本专利技术的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
技术实现思路
、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本专利技术技术。本专利技术提供的一种防治糖尿病足的干细胞组合物及其应用、干细胞制剂中所用原料或辅料均可由市场购得。下面结合实施例，进一步阐述本专利技术：实施例1脐带间充质干细胞的培养与收集(1)在无菌条件下，取离开母体时间不超过2h的新鲜脐带，并筛查产妇是否携带传染性疾病病原体，将来源于健康供者(乙肝表面抗原、丙肝抗体、梅毒抗体和艾滋病抗体阴性)的新鲜脐带置于含有双抗的PBS中于4℃保温箱中运回实验室；(2)将新鲜脐带用无菌的PBS清洗，再用75％乙醇消毒，然后用PBS清洗干净，前后清洗消毒所用溶液体积均为能将脐带浸泡在其中为宜，去除脐带最外层膜及静、动脉后，将脐带剪碎至20mm3大小的块，将其以0.5～1c本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种干细胞组合物，其特征在于，由间充质干细胞和外周血单个核细胞组成。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种干细胞组合物，其特征在于，由间充质干细胞和外周血单个核细胞组成。2.根据权利要求1所述的干细胞组合物，其特征在于，所述干细胞组合物中间充质干细胞与外周血单个核细胞的细胞数量比例为(1～5)：(1～5)。3.根据权利要求1或2所述的干细胞组合物，其特征在于，所述干细胞组合物中间充质干细胞与外周血单个核细胞的细胞数量比例为1：1。4.根据权利要求1所述的干细胞组合物，其特征在于，所述间充质干细胞为脐带间充质干细胞、骨髓间充质干细胞或脂肪间充质干细胞。5.如权利要求1至4中任一项所述干细胞组合物在制备预防和/或治疗糖尿病足药物中的应用。6.一种干细胞制剂，其特征在于，包括间充质干细胞、外周血单个核细胞、人血白蛋白和溶媒。...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈海佳，葛啸虎，王一飞，陈婉玲，王小燕，马岩岩，罗二梅，
申请(专利权)人：广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44