一种用于美国红枫苗生产的组培培养基配方及培养方法组成比例

本发明专利技术公开了一种用于美国红枫苗生产的组培培养基配方及培养方法，本发明专利技术在MS培养基基础上进行改进，发明专利技术出红枫培养基（HF），结合一25g/L蔗糖和7g/L琼脂、0.010mg/L~0.003mg/L苯基脲衍生物（TDZ），对美国红枫进行组织培养，大大提高了美国红枫的繁殖速度，提高了美国红枫的扩繁系数，经过六周的培养时间，可以使扩繁系数变为以前的2倍，使扩繁系数达到6.5，美国红枫的年产能增大，具有很大的产能和经济效益。

A tissue culture medium formula and culture method for the production of Acer rubrum seedlings

The invention discloses a culture medium for tissue culture of American Red Maple seedling production and cultivation methods, the culture medium on the basis of the improvement in the MS, the invention of Hongfeng medium (HF), with 25g/L sucrose and 7g/L agar, 0.010mg/L~0.003mg/L phenyl urea derivatives (TDZ), the American maple tissue culture, greatly improve the reproduction rate of Acer rubrum, improve the propagation coefficient of maple, after six weeks of incubation time, can make the propagation coefficient is 2 times larger than before, the multiplication coefficient reached 6.5, the annual production capacity of American maple increased, great production capacity and economic benefits.

【技术实现步骤摘要】
一种用于美国红枫苗生产的组培培养基配方及培养方法
本专利技术涉及一种用于美国红枫苗生产的组培培养基配方及培养方法，属于红枫培育

技术介绍
本专利技术公开了一种美国红枫组培快繁方法,美国红枫系槭树科槭树属高大落叶乔木,具有适应性强、耐旱、耐温、长势迅猛等特点,是园林绿化的优良树种。目前美国红枫主要以种子播种繁殖方式进行种苗繁育,但因种子结实率较低,因此需要进行组织培养，现在美国红枫的组织培养大都是以改良的MS培养基（MS培养基里的硝酸铵减半）作为基础培养基，具体配方是：改良的MS+25g/L蔗糖、7g/L琼脂、0.5mg/L细胞分裂素、0.01mg/L吲哚丁酸或者萘乙酸，但是，这个配方在继代培养的过程中扩繁系数不高，仅在3.0左右；一个芽外植体分别以3和6为扩繁系数，扩繁一年为例，如果是扩繁系数为3，则一年的产能是0.66万株，而如果扩繁系数是6，则一年的产能是167.96万株，这是极其巨大的产能和经济效益差距，因此需要研发一种可以提高美国红枫扩繁系数的组培培养基，提高美国红枫的产能和经济效益。
技术实现思路
针对现有技术中的问题，本专利技术提供了一种美国红枫苗生产组培培养基配方，本专利技术的配方使美国红枫繁殖力更强，扩繁系数提高，从而年产量增加。本专利技术的技术方案如下，一种美国红枫苗生产组培培养基配方，包括以下组分：红枫培养基（HF）包括大量元素：112.50mg/L氯化钙、1440.00mg/L硝酸钾、180.54mg/L硫酸镁、330.60mg/L磷酸二氢钾、600.00mg/L硝酸铵；微量元素：0.025mg/L氯化钴、0.25mg/L硫酸铜、6.20mg/L硼酸、16.90mg/L硫酸锰、0.25mg/L钼酸钠、8.6mg/L硫酸锌；有机成分：2.00mg/L甘氨酸、100.00mg/L肌醇、1.00mg/L盐酸硫胺素VB、0.50mg/L烟酸、0.25mg/L盐酸吡哆素；铁盐：73.40mg/L乙二胺四乙酸钠铁。本专利技术的培养基配方还包括浓度为25g/L蔗糖和7g/L琼脂、0.010mg/L~0.003mg/L苯基脲衍生物（TDZ）。优选的，本专利技术所述培养基配方中的苯基脲衍生物（TDZ）的浓度为0.020mg/L。本专利技术的美国红枫苗生产组培培养基配方的使用方法，具体步骤如下：起始培养：（1）外植体的选择：外植体选取红枫母株茎枝上的腋芽，用解剖刀切下；（2）外植体的预处理：吐温-80的水溶液中振荡冲洗5min，用流水冲洗2h后，置于无菌室超净工作台上，往后的操作需要在超净工作台上进行无菌操作；（3）外植体的消毒：先用75％酒精消毒10s，用无菌水冲洗3次，再用0．8％的次氯酸钠溶液消毒5min，无菌水冲洗5次，用无菌纸吸干水分后备用；（4）将步骤（1）到（3）处理好的外植体接种到不同浓度的红枫苗生产组培培养基的若干个瓶中，每瓶一个腋芽；（5）步骤（4）中的红枫生产组培培养基PH都调整为5.4~5.6；（6）将上述外植体培养20天，长成小苗，观察外植体即腋芽的萌芽率及萌芽后形成的小苗的长势；继代培养：（7将步骤（6）中的小苗接种到不同浓度的红枫苗生产组培培养基的若干个瓶中，每瓶一个小苗，培养六周后观察。上述的继代培养即是将起始培养的红枫小苗继续放置到不同培养基中培养。上述步骤中使用的母株选用的是4-5年生的十月光辉品种，外植体选取的是母株茎枝上的腋芽。其中，步骤（6）中外植体接入的瓶和步骤（7）中的小苗接入的瓶置于24℃，16小时/天光照的环境中培养。本专利技术的步骤（4）中红枫苗生产组培培养基的TDZ浓度分别为0.01mg/L~0.03mg/L，步骤（7）中红枫苗生产组培培养基的TDZ浓度为0.015mg/L~0.025mg/L。本专利技术的步骤（4）中红枫苗生产组培培养基的TDZ浓度分别为0.015mg/L~0.025mg/L，步骤（7）中红枫苗生产组培培养基的TDZ浓度为0.020mg/L。优选的，本专利技术的红枫为美国红枫。本专利技术与现有技术相比有益效果：利用本专利技术的的红枫培养基（HF）提高了红枫植株的扩繁系数，使扩繁系数达到6.5，美国红枫的年产能增大，具有很大的产能和经济效益。说明书附图图1为萌发率与TDZ浓度梯度关系；其中表示②组、③组、④组的实验数据，横坐标为TDZ浓度，纵坐标为萌发率。具体实施方式下面结合具体实施例来进一步描述本专利技术，本专利技术的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但实施例仅是范例性的，并不对本专利技术的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本专利技术的精神和范围下可以对本专利技术技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本专利技术的保护范围内。实施例本专利技术的实施例中使用的红枫培养基（HF）具体成分含量起始培养：将上述准备好的芽外植体接种到以下十种配方的培养基，十一组实验如下。①配方一：MS培养基（硝酸铵含量是原来的50%）+25g/L蔗糖+7g/L琼脂+0.5mg/L细胞分裂素+0.01mg/L吲哚丁酸。②配方二：HF+25g/L蔗糖+7g/L琼脂+0.01mg/LTDZ。③配方三：HF+25g/L蔗糖+7g/L琼脂+0.03mg/LTDZ。④配方四：HF+25g/L蔗糖+7g/L琼脂+0.05mg/LTDZ。⑤配方五：HF+25g/L蔗糖+7g/L琼脂+0.03mg/LTDZ+0.01mg/L萘乙酸。⑥配方六：HF+25g/L蔗糖+7g/L琼脂+0.03mg/LTDZ+0.01mg/L吲哚丁酸。⑦配方一：MS培养基（硝酸铵含量是原来的50%）+25g/L蔗糖+7g/L琼脂+0.5mg/L细胞分裂素+0.01mg/L吲哚丁酸。⑧配方七：HF+25g/L蔗糖+7g/L琼脂+0.015mg/LTDZ。⑨配方八：HF+25g/L蔗糖+7g/L琼脂+0.025mg/LTDZ。⑩配方九：HF+25g/L蔗糖+7g/L琼脂+0.035mg/LTDZ。⑪配方十：HF+25g/L蔗糖+7g/L琼脂+0.025mg/LTDZ+0.01mg/L吲哚丁酸。实施例①~⑪的美国红枫苗生产组培培养基配方的使用方法，具体步骤如下：起始培养（1）外植体的选择：外植体选取美国红枫母株茎枝上的腋芽，用解剖刀切下；（2）外植体的预处理：放入少量吐温-80的水溶液中振荡冲洗5min，用流水冲洗2h后，置于无菌室超净工作台上，往后的操作需要在超净工作台上进行无菌操作；（3）外植体的消毒：先用75％酒精消毒10s，用无菌水冲洗3次，再用0.8％的次氯酸钠溶液消毒5min，无菌水冲洗5次，用无菌纸吸干水分后备用；（4）将步骤（1）到（3）处理好的外植体接种到上述①~⑥组配方的红枫苗生产组培培养基中，每种培养基100瓶，每瓶一个腋芽；（5）步骤（4）中的红枫生产组培培养基PH都调整为5.4~5.6；（6）将上述外植体培养20天，长成小苗，观察外植体即腋芽的萌芽率及萌发后形成的小苗长势；继代培养：（7）将步骤（6）中①组培养成的小苗接种到⑦组的培养基中，将配方三培养成的小苗接种到⑧~⑪组配方的红枫苗生产组培培养基中，共五组实验，每组培养基接种4瓶，每瓶15棵小苗，培养六周后观察。上述步骤中使用的母株选用的是4-5年生的十月光辉品种，外植体选取的是母株茎枝上的腋芽。其中，步骤（6）中外植体接入的瓶和步骤（7）中的小本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种美国红枫苗生产组培培养基配方，包括以下组分：红枫培养基（HF）包括大量元素：112.50mg/L氯化钙、1440.00mg/L硝酸钾、180.54 mg/L硫酸镁、330.60 mg/L磷酸二氢钾、600.00 mg/L硝酸铵；微量元素：0.025 mg/L氯化钴、0.25 mg/L硫酸铜、6.20 mg/L硼酸、16.90 mg/L硫酸锰、0.25 mg/L钼酸钠、8.6 mg/L硫酸锌；有机成分：2.00 mg/L甘氨酸、100.00 mg/L肌醇、1.00mg/L盐酸硫胺素VB、0.50 mg/L烟酸、0.25 mg/L盐酸吡哆素；铁盐：73.40mg/L乙二胺四乙酸钠铁。

【技术特征摘要】
1.一种美国红枫苗生产组培培养基配方，包括以下组分：红枫培养基（HF）包括大量元素：112.50mg/L氯化钙、1440.00mg/L硝酸钾、180.54mg/L硫酸镁、330.60mg/L磷酸二氢钾、600.00mg/L硝酸铵；微量元素：0.025mg/L氯化钴、0.25mg/L硫酸铜、6.20mg/L硼酸、16.90mg/L硫酸锰、0.25mg/L钼酸钠、8.6mg/L硫酸锌；有机成分：2.00mg/L甘氨酸、100.00mg/L肌醇、1.00mg/L盐酸硫胺素VB、0.50mg/L烟酸、0.25mg/L盐酸吡哆素；铁盐：73.40mg/L乙二胺四乙酸钠铁。2.根据权利要求1所述的美国红枫苗生产组培培养基配方，其特征在于，所述培养基配方还包括浓度为25g/L蔗糖和7g/L琼脂、0.010mg/L~0.003mg/L苯基脲衍生物（TDZ）。3.根据权利要求2所述的美国红枫苗生产组培培养基配方，其特征在于，所述培养基配方中的苯基脲衍生物（TDZ）的浓度为0.020mg/L。4.一种美国红枫苗生产组培培养基配方的使用方法，具体步骤如下：起始培养：（1）外植体的选择：外植体选取红枫母株茎枝上的腋芽，用解剖刀切下；（2）外植体的预处理：吐温-80的水溶液中振荡冲洗5min，用流水冲洗2h后，置于无菌室超净工作台上，往后的操作需要在超净工作台上进行无菌操作；（3）外植体的消毒：先用75％酒精消毒10s，用无菌...

【专利技术属性】
技术研发人员：钟飞，王晓菲，毛伟，
申请(专利权)人：山东大丰园农业有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37