珙桐枝条快速繁殖的培养方法技术

本发明专利技术公开了一种珙桐枝条快速繁殖的培养方法。该方法包括以下步骤：(1)采集珙桐带芽枝条作为外植体；(2)消毒灭菌；(3)诱导带芽枝条产生丛生芽，并增殖培养；(4)壮苗培养；(5)生根培养；(6)炼苗移栽；(7)水肥管理。本发明专利技术方法可有效提升人工繁殖珙桐的速度，提升珙桐苗的成活率。

Culture and rapid propagation of Davidia branches

The invention discloses a dove branches culture and rapid propagation method. The method comprises the following steps: (1) collecting branches as explants with buds of Davidia involucrata; (2) sterilization; (3) induced with bud branches produced adventitious buds, and proliferation; (4) (5) seedling culture; rooting culture; (6) transplanting; (7) the management of water and fertilizer. The method of the invention can effectively enhance the artificial reproduction speed, improve the survival rate of Dovetree seedlings.

【技术实现步骤摘要】
珙桐枝条快速繁殖的培养方法
本专利技术属于珙桐培养
，具体涉及一种珙桐枝条快速繁殖的培养方法。
技术介绍
珙桐(gǒngtóng)为落叶乔木。可生长到15～25米高，叶子广卵形，边缘有锯齿，色花奇美，是1000万年前新生代第三纪留下的孑遗植物，在第四纪冰川时期，大部分地区的珙桐相继灭绝，只有在中国南方的一些地区幸存下来，成为了植物界今天的“活化石”，被誉为“中国的鸽子树”，又称“鸽子花树”、“水梨子”，野生种只生长在中国西南四川省和中部湖北省和周边地区，因此，珙桐已被列为国家一级重点保护野生植物，为中国特有的单属植物，属孑遗植物，也是全世界著名的观赏植物，是国家一级保护植物。由于珙桐野生体仅存在于中国西南四川省和中部湖北省和周边地区，数量稀少，因此，需要建立一种人工快速繁殖的培养方法来培育珙桐，以达到保护和商业化利用的目的。
技术实现思路
针对现有技术中的上述不足，本专利技术提供一种珙桐枝条快速繁殖的培养方法，以解决现有人工繁殖珙桐速度慢的问题。本专利技术解决上述技术问题的技术方案如下：提供一种珙桐枝条快速繁殖的培养方法，包括：(1)采集5年生以下，嫩梢长度为4～6cm的珙桐带芽枝条为外植体材料；(2)消毒灭菌将带芽枝条切割为带芽茎段，再进行消毒灭菌处理；(3)将经消毒后的带芽茎段置于含NAA、6-BA、GA3和AC的WPM培养基中，于24±1℃、2000～2100lx条件下，光照8～10h/d培养，诱导带芽茎段腋芽的萌发，增殖培养，得到珙桐苗；其中，所述WPM培养基中NAA加入量为0.2～0.6mg/L、6-BA加入量为1.0～3.0mg/L、GA3加入量为0～2.0mg/L、AC加入量为0.5～1.5g/L；(4)壮苗培养用含有NAA、6-BA、GA3和AC的WPM培养基，于24±1℃、2000～2100lx条件下，光照8～10h/d，培育步骤(4)中所得珙桐苗36天；其中，NAA加入量为0.5～1.5mg/L、6-BA加入量为0.2～1.0mg/L、GA3加入量为0.5～1.5mg/L、AC加入量为0.5～1.5g/L；(5)生根培养选取步骤(4)中生长状态良好的珙桐苗，采用含有IBA、6-BA和AC的White培养基，于24±1℃、2000～2100lx条件下，光照8～10h/d，培养至生根；其中，IBA的加入量为2.0～4.0mg/L、6-BA的加入量为0～1.5mg/L、AC的加入量为0.5～1.5g/L；(6)炼苗移栽在生根培养后7～15d，对珙桐苗进行闭罐炼苗15～2d，遮阴度为50％～70％，再开罐炼苗3～7d，然后将珙桐苗移出，消毒灭菌，移栽至经消毒处理的基质中，浇足定根水，每5d喷施一次营养液；其中，基质为草炭、珍珠岩和蛭石的混合物，草炭、珍珠岩和蛭石重量比为1～2:0.5～1:0.5～1；(7)移栽后按常规方法进行水肥管理，培育得到珙桐树苗。进一步地，步骤(2)中消毒灭菌过程为：将带芽枝条剪去叶片，切割为带芽茎段，用75％乙醇消毒处理带芽茎段10～40s，然后采用无菌水冲洗2～5次，再用0.01％HgCl2溶液浸泡3～6min，最后用无菌滤纸吸干带芽枝条表面水分。进一步地，步骤(3)中WPM培养基中NAA加入量为0.4mg/L、6-BA加入量为2.0mg/L、GA3加入量为2.0mg/L、AC加入量为0.5g/L。进一步地，步骤(4)中用于壮苗培育的WPM培养基中NAA加入量为1.0mg/L、6-BA加入量为1.0mg/L、GA3加入量为1.0mg/L、AC加入量为1.0g/L。进一步地，步骤(5)中用于生根培育的White培养基中IBA的加入量为3.0mg/L、6-BA的加入量为1.0mg/L、AC的加入量为1.0g/L。进一步地，步骤(6)中基质中草炭、珍珠岩和蛭石的重量比为2:1:1。进一步地，步骤(6)中基质的消毒过程如下：将基质置于0.1MPa的灭菌锅中，保压20～30min；或者采用5％的福尔马林或0.3％的硫酸铜溶液淋透基质，再以塑料布覆盖7d。进一步对，步骤(6)中珙桐苗的消毒过程如下：采用0.1％～0.3％的高锰酸钾溶液或500倍多灵菌溶液清洗珙桐苗2～3次。本专利技术具有以下有益效果：1、本专利技术方法采用带芽枝条来繁育珙桐树苗，由于带芽枝条上本身就具有带芽茎段，对带芽枝条进行消毒后，即可进行诱导丛生芽的萌发，无需经过破休眠处理，在繁育前期生长快，大大缩短了繁育时间，同时，采用本专利技术方法的培养基，在2000～2100lx的条件下对带芽茎段进行诱导萌发，可使带芽茎段丛生芽和腋芽的萌发量和萌发效率在短时间内达到最大值。2、根据诱导带芽茎段腋芽萌发所用的培养基组分及配比，在带芽茎段具有最大萌发效率和萌发量的前提下，采用相同的培养基进行增殖培养，可在保证具有最大增殖效率的前提下，促使带芽茎段在增殖培养过程中继续萌发丛生芽和腋芽，提升珙桐苗的成活率和得率，另外，诱导萌发丛生芽和腋芽过程所用培养基和增殖培养基组分相同，无需向增殖培养基中添加新成分，大大降低了培养基的配比成本。3、由于通过增殖培养基培养后，即可初步得到珙桐苗，因此，在选用壮苗培养基组分时，以增殖培养基的组分为参考，调整其中各组分配比，以使壮苗效果达到最大化，另外，壮苗培养基和增殖培养基组分相同，仅组分配比不同，无需向壮苗培养基中添加新成分，大大降低了培养基的配比成本。4、采用本专利技术过程中提及的方法进行炼苗，可使珙桐苗的成活率达到80％以上。5、本专利技术以带芽茎段为外植体，建立了一套完整的珙桐组培快速繁殖技术体系，有效解决了带芽茎段在消毒、增殖、生根、炼苗过程中存在的技术问题，可在短期内培育大量的珙桐苗，并且，炼苗技术成熟，成活率可达80％以上。具体实施方式以下结合实施例对本专利技术的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本专利技术，并非用于限定本专利技术的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。实施例1：一种珙桐枝条快速繁殖的培养方法，包括以下步骤：(1)采集5年生以下，嫩梢长度为4～6cm的珙桐带芽枝条为外植体材料；(2)消毒灭菌带芽枝条消毒灭菌(灭菌体系见表1)：将带芽枝条剪去叶片，切割成带芽茎段，对带芽茎段进行消毒，其具体消毒过程为：用75％乙醇消毒10～40s，然后采用无菌水冲洗2～5次，再用0.01％HgCl2溶液浸泡3～6min，吸干水分，消毒处理结果见表2；表1带芽枝条消毒灭菌体系表2不同消毒方式对带芽茎段的处理结果由表2可知，带芽茎段成活率最高的为三号消毒处理过程，即75％酒精浸泡30s，然后再用0.1％升汞浸泡4min。(3)设立9组含有不同NAA、6-BA、GA3和AC含量的WPM培养基(见表3)，将经步骤(2)消毒处理后的带芽茎段分别置于9组培养基中培养，于24±1℃、2000lx下，光照10h/d，诱导带芽茎段腋芽的萌发，增殖培养，得到珙桐苗，其结果见表4；表3不同激素浓度配比的培养基表4带芽茎段诱导腋芽萌发的结果由表4数据可知，四种因素的极差(R值)大小依次是B＞C＞A＞D，因此四种因素对丛生芽和腋芽萌发的影响大小依次是6-BA＞GA3＞NAA＞AC，其中，5号培养基的萌发率为100％，远高于其余培养基本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种珙桐枝条快速繁殖的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)采集5年生以下，嫩梢长度为4～6cm的珙桐带芽枝条为外植体材料；(2)消毒灭菌将带芽枝条切割为带芽茎段，再进行消毒灭菌处理；(3)将消毒后的带芽茎段置于含NAA、6‑BA、GA3和AC的WPM培养基中，于24±1℃、2000～2100lx条件下，光照8～10h/d培养，诱导带芽茎段腋芽的萌发，增殖培养，得到珙桐苗；其中，所述WPM培养基中NAA加入量为0.2～0.6mg/L、6‑BA加入量为1.0～3.0mg/L、GA3加入量为0～2.0mg/L、AC加入量为0.5～1.5g/L；(4)壮苗培养用含有NAA、6‑BA、GA3和AC的WPM培养基，于24±1℃、2000～2100lx条件下，光照8～10h/d，培育步骤(4)中所得珙桐苗36天；其中，NAA加入量为0.5～1.5mg/L、6‑BA加入量为0.2～1.0mg/L、GA3加入量为0.5～1.5mg/L、AC加入量为0.5～1.5g/L；(5)生根培养选取步骤(4)中生长状态良好的珙桐苗，采用含有IBA、6‑BA和AC的White培养基，于24±1℃、2000～2100lx条件下，光照8～10h/d，培养至生根；其中，IBA的加入量为2.0～4.0mg/L、6‑BA的加入量为0～1.5mg/L、AC的加入量为0.5～1.5g/L；(6)炼苗移栽在生根培养后7～15d，对珙桐苗进行闭罐炼苗15～2d，遮阴度为50％～70％，再开罐炼苗3～7d，然后将珙桐苗移出，消毒灭菌，移栽至经消毒处理的基质中，浇足定根水，每5d喷施一次营养液；其中，基质为草炭、珍珠岩和蛭石的混合物，草炭、珍珠岩和蛭石重量比为1～2:0.5～1:0.5～1；(7)移栽后按常规方法进行水肥管理，培育得到珙桐树苗。...

【技术特征摘要】
1.一种珙桐枝条快速繁殖的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)采集5年生以下，嫩梢长度为4～6cm的珙桐带芽枝条为外植体材料；(2)消毒灭菌将带芽枝条切割为带芽茎段，再进行消毒灭菌处理；(3)将消毒后的带芽茎段置于含NAA、6-BA、GA3和AC的WPM培养基中，于24±1℃、2000～2100lx条件下，光照8～10h/d培养，诱导带芽茎段腋芽的萌发，增殖培养，得到珙桐苗；其中，所述WPM培养基中NAA加入量为0.2～0.6mg/L、6-BA加入量为1.0～3.0mg/L、GA3加入量为0～2.0mg/L、AC加入量为0.5～1.5g/L；(4)壮苗培养用含有NAA、6-BA、GA3和AC的WPM培养基，于24±1℃、2000～2100lx条件下，光照8～10h/d，培育步骤(4)中所得珙桐苗36天；其中，NAA加入量为0.5～1.5mg/L、6-BA加入量为0.2～1.0mg/L、GA3加入量为0.5～1.5mg/L、AC加入量为0.5～1.5g/L；(5)生根培养选取步骤(4)中生长状态良好的珙桐苗，采用含有IBA、6-BA和AC的White培养基，于24±1℃、2000～2100lx条件下，光照8～10h/d，培养至生根；其中，IBA的加入量为2.0～4.0mg/L、6-BA的加入量为0～1.5mg/L、AC的加入量为0.5～1.5g/L；(6)炼苗移栽在生根培养后7～15d，对珙桐苗进行闭罐炼苗15～2d，遮阴度为50％～70％，再开罐炼苗3～7d，然后将珙桐苗移出，消毒灭菌，移栽至经消毒处理的基质中，浇足定根水，每5d喷施一次营养液；其中，基质为草炭、珍珠岩和蛭石的混合物，草炭、珍珠岩和蛭石重量比为1～2:0.5～1:0.5～1；(7)移栽后按常...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡进耀，邹利娟，毛艳萍，蒋炜，
申请(专利权)人：绵阳师范学院，
类型：发明
国别省市：四川,51