本发明专利技术提供一种快速繁殖大象大蒜（Ａｌｌｉｕｍ ａｍｐｅｌｏｐｒａｓｕｎ ｖａｒ．ａｍｐｅｌｏｐｒａｓｕｎ）的方法，本发明专利技术采用不定芽增殖法快繁大象大蒜，利用顶端分生组织得到无菌苗，再利用无菌苗的基部得到的大量增殖不定芽；本发明专利技术避免了组培过程中脱分化、再分化引起的组培苗玻璃化现象，极大地提高了繁殖系数。本发明专利技术包括外植体的消毒、无菌苗诱导、不定芽诱导和继代增殖、不定芽生根、组培苗移栽的操作步骤。本发明专利技术以ＭＳ基本培养基为基础，添加不同比例的植物激素（α－萘乙酸ＮＡＡ、吲哚丁酸ＩＢＡ、６－苄基腺嘌呤６－ＢＡ、激动素ＫＴ、赤霉素ＧＡ），通过不同的组合，在适宜的不定芽诱导和增值培养基、生根培养基上快速繁殖出新植株。本发明专利技术操作简便，成本低廉，应用价值高。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于用组织培养技术获得再生植株领域，特别涉及一种利用顶 端分生组织得到无菌苗，再利用无菌苗的基部得到的大量增殖不定芽，以lt匕'决速繁殖大象大H (v4〃,w附a附pe/o/ rawt/w wj7-.ampeloprasun)的方f去。技术背景大蒜自西汉时期张骞出使西域引进中国之后，把大蒜带回国安家落 户，至今已有两千多年的历史。大蒜是人类日常生活中不可缺少的调料， 在烹调鱼、肉、禽类和蔬菜时有去腥增味的作用，特别是在凉拌菜中，既 可增味，又可杀菌。大蒜的品种很多，按照鳞茎外皮的色泽可分为紫皮蒜 与白皮蒜两种。紫皮蒜的蒜瓣少而大，辛辣味浓，产量高，多分布在华北、 西北与东北等地，耐寒力弱，多在春季播种，成熟期晚；白皮蒜有大瓣和 小瓣两种，辛辣味较淡，比紫皮蒜耐寒，多秋季播种，成熟期略早。我国大蒜的主要产地河南省杞县、中牟县，山东省金乡县、苍山县、广饶县、 茌平县、^K武县，江苏射阳县、太仓市，上海嘉定，安徽亳州市、来安 县，四川温江县、彭州市，云南大理及新疆等地。大象大蒜(爿/"wm am/ e/o/ roswm ampdoprasum)属于百合禾斗'^^属 植物，又称为大头蒜、东方大蒜，虽然被称为大蒜，但大象大蒜实际上 是韭葱的一个变种，在美国广为种植。大象大蒜蒜头巨大，形状类似大蒜， 味淡，但叶片比大蒜宽大。大象大蒜是1941年美国的一位园丁吉姆.尼 古拉斯在俄勒冈一处荒废的花园内发现的。经过12年的精心资源搜集合 品种选育，尼古拉斯在1953年推出了鳞茎巨大、抗逆境能力增强的、抗 病虫害增强的品种，命名为"大象大蒜"。与普通大蒜相比，大象大蒜约为 普通大蒜体积的6倍，蒜头直径约为8-15厘米，每亩地产值约为1 1.7 吨，市场潜力巨大。正是由于上述不可比拟的优点，大象大蒜在国外的市 场上深受欢迎，售价不菲。大象大蒜可以用于烹饪，特别是在凉拌菜中， 大象大蒜味道温和，无蒜臭味，非常受欢迎。此外大象大蒜在国外也用于 庭院种植观赏。目前国内一些大蒜主产区如苍山地区，已经从国外买进一 些蒜头，进行种植，但成本很高。目前大象大蒜的繁殖主要依靠蒜瓣进行扩繁，繁殖系数很低，满足不了市场的大量需求。目前国内尚未有对引进 的大象大蒜进行通过组织培养进行快速繁殖的报道和专利申请。关于大蒜的脱毒快繁的技术和专利申请，国内外均有报道，主要可 以分为四个类型1、由大蒜的小鳞茎分离得到顶端分生组织后在适宜培 养基上培养，衍生出更多小苗；2、由顶端分生组织分离得到愈伤组织， 使它增殖并分化成大蒜苗；3、由顶端分生组织培养成愈伤，愈伤经过继 代，然后由顶端分生组织增殖产生小苗；4、由大蒜小鳞茎的顶端分生组 织分离得到苗原基，然后增殖生成苗。由于大象大蒜与普通大蒜同属百合科葱属植物，我们在大象大蒜的组 培快繁过程中，业参考了大蒜快繁的技术，但大象大蒜与普通大蒜毕竟生 物学习性上有较大的不同，利用已有的普通大蒜的快速繁殖方法已经不适 合于大象大蒜的快速繁殖。本专利技术采用丛不定芽增殖法快繁大象大蒜，避 免了组培过程中脱分化、再分化引起的组培苗玻璃化现象，极大地提高了 繁殖系数。本方法操作简单，成本低廉，应用价值高。
技术实现思路
本专利技术提供一种快速繁殖大象大蒜(^///wm ampe/opraw" wu:ampek)prasim)的方法，本专利技术采用不定芽增殖法快繁大象大蒜，利用 顶端分生组织得到无菌苗，再利用无菌苗的基部得到的大量增殖不定芽； 避免了组培过程中脱分化、再分化引起的组培苗玻璃化现象，极大地提 高了繁殖系数。本专利技术的技术方案是这样实现的 ，步骤包括外植体消毒、无菌苗诱导、 不定芽诱导和继代增殖、不定芽生根、组培苗移栽，其特征在于，包括以 下操作步骤A. 外植体的消毒选取大象大蒜的外植体，在用自来水配制的重量百分比10%的溶液中 浸泡5 10分钟，在自来水下冲洗干净后，在超净工作台上进行表面消毒；B. 无菌苗诱导在超净工作台上，用无菌的解剖刀及镊子剥去所述的外植体的外表 皮，直至露出顶端分生组织；将无菌的、完整的顶端分生组织及其基部用 镊子挑出来，放在无菌苗诱导培养基上，移入组培室培养，使所述的顶端分生组织长成无菌苗；C. 不定芽诱导和继代增殖待所述的无菌苗长到2 3厘米高时，在超净工作台上，在距离无菌 苗基部上方2 3毫米的地方，用解剖刀切除以上部分，仅保留无菌苗基 部，置于不定芽诱导和增殖培养基上，移入组培室培养；待不定芽长至2 3厘米时，留取2 3毫米的不定芽基部，在超净工作台上接种到不定芽诱 导增殖培养基上进行不定芽的诱导与增殖，移入组培室培养，；D. 不定芽生根当所述的不定芽长至3 4厘米时，在超净工作台上，将所述的不定 芽转移至生根培养基中，直到长出不定根，移入组培室培养；E. 组培苗移栽当所述的不定根长至3 4厘米时，将所述的组培苗移出组培室，在 自然光照下炼苗2 3天，然后敞开瓶盖再炼苗3 4天，用镊子将的组培 苗从瓶中取出，用清水洗净根部的培养基，栽入由沙、蛭石和珍珠岩混合 的基质中，初期覆盖塑料薄膜保持湿度和温度，后期逐步撤除塑料薄膜， 注意遮阴、保温、保湿，移栽20天后上盆栽植或者大田栽植。步骤A所述的外植体是大象大蒜的鳞茎。步骤A 步骤D中所述的在超净工作台上的进行工作均为无菌操作。 步骤A 步骤E中在所述的组培室中，培养条件为温度为25 28°C ，光照度为1600 2000勒克斯(Lx)，光照时间为12小时/天，湿度为70 80%。步骤B中所述的顶端分生组织在无菌苗诱导的过程中未观察到玻璃化 现象。步骤C中所述的无菌苗基部和不定芽基部在不定芽诱导和继代增殖过 程中未观察到玻璃化现象。步骤A所述的试验操作包括选取大象大蒜的鳞茎做外植体，在自来 水下冲洗干净后，在超净台上用75%酒精进行表面消毒1分钟，接着无菌 水冲洗1 2次，再用15%次氯酸钠溶液消毒10 15分钟，无菌水冲洗3 4次。步骤B所述的无菌苗诱导培养基是MS基本培养基；步骤C所述的不定芽诱导和增殖培养基是，以MS基本培养基为基础，添加一定比例的植物激素；步骤D所述的生根培养基是，以MS基本培养基成分中的大量元素减 为原来的1/2、其他成分不变，得到的1/2MS培养基为基础，添加一定比例的植物激素或不添加。本专利技术与已有技术相比具有如下优点1. 本专利技术采用丛生苗增殖法快繁大象大蒜，避免了组培过程中脱分化、 再分化引起的组培苗玻璃化现象，极大地提高了繁殖系数。2. 本专利技术所提供的大象大蒜快速繁殖方法具有操作简便、繁殖系数高、出苗率高等优点，繁育出的大象大蒜组培苗根壮、抗性强，移栽成活率很咼。3. 本专利技术操作简单，培养基成分价格低廉，应用价值高。具体实施方式实施例l:材料大象大蒜owpe/oprasww \w:ampeloprasun)， 由山东省 苍山市科技局提供，自美国购买。，步骤包括外植体消毒、无菌苗诱导、 不定芽诱导和继代增殖、组培苗生根、组培苗移栽，其特征在于，包括以 下操作步骤A. 外植体的消毒选取大象大蒜的鳞茎作为外植体，在用自来水配制的重量百分比10% 的溶液中浸泡5 10分钟，在自来水下冲洗干净后，在超净工作台上进行 表面消毒；在超净工作台上，用75%酒精进行表面消毒1分钟，接着无菌水冲洗 1 2次本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种快速繁殖大象大蒜的方法，步骤包括外植体消毒、无菌苗诱导、不定芽诱导和继代增值、不定芽生根、组培苗移栽，其特征在于，包括以下操作步骤： Ａ．外植体的消毒 选取大象大蒜的外植体，在用自来水配制的重量百分比１０％的溶液中浸泡５～１０分钟，在自来水下冲洗干净后，在超净工作台上进行表面消毒； Ｂ．无菌苗诱导 在超净工作台上，用无菌的解剖刀及镊子剥去所述的外植体外表皮，直至露出顶端分生组织；将无菌的、完整的顶端分生组织及其基部用镊子挑出来，放在无菌苗诱导培养基上，使所述的顶端分生组织长成无菌苗； Ｃ．不定芽诱导和继代增殖 待所述的无菌苗长到２～３厘米高时，在超净工作台上，在距离无菌苗基部上方２～３毫米的地方，用解剖刀切除以上部分，仅保留无菌苗基部，置于不定芽诱导和增殖培养基上；待不定芽长至２～３厘米时，留取２～３毫米的不定芽基部，在超净工作台上接种到不定芽诱导增殖培养基上进行不定芽的诱导与增殖； Ｄ．不定芽生根 当所述的不定芽长至３～４厘米时，在超净工作台上，将所述的不定芽转移至生根培养基中，直到长出不定根； Ｅ．组培苗移栽 当所述的不定根长至３～４厘米时，在自然光照下炼苗２～３天，然后敞开瓶盖再炼苗３～４天，用镊子将组培苗从瓶中取出，用清水洗净根部的培养基，栽入由沙、蛭石和珍珠岩混合的基质中，初期覆盖塑料薄膜保持湿度和温度，后期逐步撤除塑料薄膜，注意遮阴、保温、保湿，移栽２０天后上盆栽植或者大田栽植。 步骤Ａ～步骤Ｄ中所述的在超净工作台上的进行工作均为无菌操作。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：张秀海，梁宏霞，黄丛林，王永勤，吴忠义，李春华，
申请(专利权)人：北京市农林科学院，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]
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