培养基、培养基组合物及其制备方法技术

一种培养基、培养基组合物及其制备方法，该培养基组合物包括：第一组分，为所述培养基组合物中的结构支撑组分，所述第一组分为凝胶；第二组分，为所述培养基组合物中除第一组分、第三组分之外的其余组分；第三组份为培养基中对常温、光照或溶液不稳定的组分、或完整的动物活细胞、或高温高压灭菌时会发生变性的组分，该组分需要考虑组分的具体性质单独储存运输。本发明专利技术的培养基制备时仅需对第一组分进行加热，使凝胶溶解，而后与第二、三组分混合完成培养基配制；节省了实验前的准备时间，易于工业化生产，提高了微生物检测的标准化程度，且以液体混合模式替代了传统干粉培养基的固体混合模式，培养基组分更加均一，提高了微生物培养基的批间稳定性和质量可靠性。

【技术实现步骤摘要】
培养基、培养基组合物及其制备方法
本专利技术涉及微生物
，更具体地涉及一种培养基、培养基组合物及其制备方法。
技术介绍
培养基(culturemedium)是人工配制的，适合微生物生长、分离鉴别的营养基础。一般基础培养基中含有蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉、氯化钠、琼脂等基本营养物质。在临床及食品卫生检验所用的培养基中，还经常需要添加抑菌剂、指示剂、血液、糖类等组分，以利于特定细菌的分离与鉴别，而病毒培养和疫苗生产中所用的培养基，则需要添加不同种类的氨基酸、核苷酸、无机盐、生长因子等物质。培养基组分的复杂性及添加物稳定性的不同，直接决定了培养基的配置工艺和添加流程，实际工作中需针对性控制。培养基作为微生物研究的基础原料，在使用时应达到如下状态：(1)完全无菌状态；(2)培养基中各组分均衡有效，制备过程中培养基组分无损失及变性；(3)制备时间短，以保证接种时待检样品中微生物的活性，尤其是临床样本和厌氧菌。固体/半固体培养基是微生物研究过程中最常使用的一种培养基，其成分特征的共性是含有琼脂成分作为凝固时的结构支撑组分。琼脂凝胶的融点约为90～95℃，而凝固点为40～45℃，这一特性决定了琼脂能够作为微生物培养基的凝固剂，在较低温度下将培养基制备成所需形状。在一种叫做倾注培养的微生物培养方法中，需要先将含有微生物的样品与培养基进行混合，将微生物包埋于培养基内，琼脂的低温凝固特性不会对微生物产生伤害。实验室中即配即用的方式并不利于久存，因此如今培养基市场供应的主要方式是出现于1917年的干粉式培养基，目前市售的干粉培养基已有400多个品种，由于各个品种的组分不同，配置过程复杂，各组分添加的流程不易掌握，在实际工作中容易产生失误而导致实验失败。此外，目前主流的以干粉模式配制的固体、半固体培养基还有以下不足：(1)配制周期长，工作量大。以干粉培养基配制固体或半固体培养基的流程如下：干粉称量→配制→调节pH值→高压灭菌→冷却至50～55℃→加入添加剂混匀待用。整个操作过程用时约两至三小时，操作繁琐，造成人力资源的浪费。(2)干粉培养基的组分均衡度往往不够理想。培养基的组分十分复杂，部分添加组分是微量的，以干粉形式供应过程中，常常因混合不均匀或运输过程中的分层现象导致生产出的成品培养基成分不够均衡。以肠杆菌分离鉴别培养基中最为常用的沙门志贺氏菌琼脂(SS琼脂)为例，其组分如下：试想将0.025克中性红组分及0.00033克煌绿组分均匀混合于60克其它物料当中，其难度可想而知。(3)配制过程往往需要通过降低灭菌温度或减少灭菌时间来保护部分成分的稳定性和有效性，因而导致产品污染几率增加。例如亚硫酸铋琼脂，由于亚硫酸铋高温下不稳定，无法采用高压灭菌处理，只能通过煮沸杀灭微生物繁殖体，而在煮沸的状态下，真菌孢子和细菌的芽孢是无法被杀灭的。(4)由于琼脂的溶解温度约为90～95℃，培养基液化后的可使用温度通常为50℃，配制后需要的降温时间长。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的主要目的在于提供一种培养基、培养基组合物及其制备方法，以期解决上述技术问题中的至少之一。为了实现上述技术目的，作为本专利技术的一个方面，本专利技术提供了一种培养基组合物，包括：第一组分，为所述培养基组合物中的结构支撑组分，所述第一组分为凝胶或干粉；所述第一组分灭菌后单独封装，或单独分装后高温灭菌；第二组分，为所述培养基组合物中除了第一组分、对常温、光照或溶液不稳定的组分、或完整的动物活细胞、或高温高压灭菌时会发生变性的组分之外的其余组分；所述第二组分灭菌后单独封装，或单独分装后高温高压灭菌。作为本专利技术的另一个方面，本专利技术还提供了一种培养基组合物的制备方法，包括以下步骤：将培养基中的结构支承组分制成干粉或加水配制成凝胶，灭菌后单独封装或单独分装后高温灭菌，得到所述培养基组合物的第一组分；将所述培养基中除了第一组分，以及常温、光照或溶液状态下不稳定的组分、或完整的动物活细胞、或高温高压灭菌时会发生变性的组分之外的其余组分混合配制成干粉或浓缩液，灭菌后单独封装或单独分装后高温高压灭菌，得到所述培养基组合物的第二组分；其中，上述两个步骤不分先后顺序，由此得到所述培养基组合物独立封装的两个组分。作为本专利技术的再一个方面，本专利技术还提供了一种培养基的制备方法，包括以下步骤：将如上所述的制备方法制备得到的培养基组合物中的第一组分配制成凝胶，加热至使其完全融化后，加入常温的第二组分，混合均匀；待上述混合液的温度降至45～55℃、优选50-55℃时，加入常温的第三组分后混合混匀，即得到所述的培养基。基于上述技术方案可知，本专利技术的培养基及其制备方法包括如下有益效果：a、由于本技术方案不再对培养基整体加热，而只对第一组分进行加热，大幅度减少了需加热体积，使得加热时间缩短，降低了能源消耗；降温过程中巧妙的利用不同温度的溶液进行混合这一方法进行降温，又大幅度减少了降温时间；此操作方案将原来实验室需要两、三小时方能完成的试验工作缩减到十几分钟即可完成，节省了实验前的准备时间，解放了检测人员的劳动生产力；b、易于工业化生产，提高了微生物检测的标准化程度；c、以液体混合模式替代了传统干粉培养基的固体混合模式，培养基组分更加均一，提高了微生物培养基的批内、批间稳定性和质量可靠性；d、仅对需要加热溶解的琼脂组分进行加热，避免了其他营养组分在高热下的成分损失，提高了培养基的质量水平。附图说明图1是本专利技术实施例1与对比例1的温度-时间曲线图；图2是本专利技术实施例2与对比例2的温度-时间曲线图。具体实施方式为使本专利技术的目的、技术方案和优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，并参照附表，对本专利技术作进一步的详细说明。培养基是医学卫生研究、医药工业生产、临床检验、流行病学调查及生物制品制造等行业的重要基础，广泛应用于医药卫生、食品化妆品检验、工农业、环境及疾病控制等众多领域中，是众多行业发展所必须依赖的基础性研究领域。固体及半固体培养基是微生物研究过程中最常用的一类培养基，其成分特征的共性是含琼脂成分作为凝固剂。琼脂融化点约为95℃，而凝固点为40～45℃，这一特性决定了琼脂能作为微生物培养基的凝固剂，在相对较低的温度下完成固体/半固体培养基的制备，避免高温对不稳定成分的损伤，并可以在不对微生物活性产生影响的情况下将微生物包埋于培养基内。本专利技术主要提供了一种快速稳定制备培养基组合物的方法，提高固体/半固体培养基配制的标准化程度，简化配制操作，节省配制时间。具体地，本专利技术根据培养基各成分的理化特性、室温下的状态及稳定性对组分进行分类，将需要加热溶解的琼脂成分单独分离出来，制备成琼脂凝胶(第一组分)；将不稳定成分单独分离包装，制备为添加剂(第三组分)，使用前培养基温度降低到适合状态时再行加入；其他稳定的营养组分组合配制第二组分，琼脂凝胶和稳定营养组分均可通过高压灭菌达到完全无菌，不稳定添加剂也可通过无菌灌装、无菌滤过等工艺达到无菌，保证了培养基在使用前的完全无菌状态。各组分依次混合后则实现了原培养基全部成分的定量组合，完成了培养基配制过程，方便使用。本专利技术公开的培养基组合物，包括：第一组分，为培养基中起到结构支撑作用的凝胶，可以干粉或配制成水合凝胶的形式提供；该第一组分灭菌后单独封装，或分装后高温灭菌；第一组分在常本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种培养基组合物，其特征在于，包括：第一组分，为所述培养基组合物中的结构支撑组分，所述第一组分为凝胶或干粉；所述第一组分灭菌后单独封装，或单独分装后高温灭菌；第二组分，为所述培养基组合物中除了第一组分、对常温、光照或溶液不稳定的组分、或完整的动物活细胞、或高温高压灭菌时会发生变性的组分之外的其余组分；所述第二组分灭菌后单独封装，或单独分装后高温高压灭菌。

【技术特征摘要】
1.一种培养基组合物，其特征在于，包括：第一组分，为所述培养基组合物中的结构支撑组分，所述第一组分为凝胶或干粉；所述第一组分灭菌后单独封装，或单独分装后高温灭菌；第二组分，为所述培养基组合物中除了第一组分、对常温、光照或溶液不稳定的组分、或完整的动物活细胞、或高温高压灭菌时会发生变性的组分之外的其余组分；所述第二组分灭菌后单独封装，或单独分装后高温高压灭菌。2.如权利要求1所述的培养基组合物，其特征在于，所述培养基组合物还包括第三组分，所述第三组分为常温、光照或溶液不稳定的组分、或完整的动物活细胞、或高温高压灭菌时会发生变性的组分；所述第三组分配制成无菌溶液和/或固体干粉后避光单独封装。3.如权利要求1所述的培养基组合物，其特征在于，所述第一组分为琼脂、明胶、多聚糖或其组合加水配制成的凝胶；作为优选，所述第一组分还包括所述培养基组合物中的部分或全部常温常压下性质稳定、在高温灭菌条件下性质稳定、且与包装容器无反应、无吸附的组分。4.如权利要求1所述的培养基组合物，其特征在于，所述第一组分、第二组分的封装容器为袋装或瓶装容器；作为优选，所述第一组分、第二组分的封装容器为塑料袋、铝塑袋、塑料软瓶、玻璃瓶或金属瓶；作为优选，所述第一组分的封装容器能够在100℃下保持正常形态。5.如权利要求2所述的培养基组合物，其特征在于，所述第一组分或第二组分的封装容器的容积能够容纳所有所述培养基组合物的各个组分。6.一种培养基组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将培养基中的结构支承组分配制成干粉或加水配制成凝胶，灭菌后单独封装或单独分装后高温灭菌，得到所述培养基组合物的第一组分；将所述培养基中除了第一组分，以及常温、光照或溶液状态下不稳定的组分、或完整的动物活细胞、或高温高压灭菌时会发生变性的组分之外的其余组分混合配制成干粉或浓缩液，灭菌后单独封装或单独分装后高温高压灭菌...

【专利技术属性】
技术研发人员：厉刚，
申请(专利权)人：北京君立康生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11