一种基因编辑系统及应用其对植物基因组进行编辑的方法技术方案

本发明专利技术公开了一种基因编辑系统及应用其对植物基因组进行编辑的方法。该基因编辑系统包括sgRNA转录单元，以及由顺次连接的来源于玉米的DMC1基因启动子和Cas9基因组成的DMC1p‑Cas9转录单元，其中，sgRNA识别的靶位点符合5’‑Nx‑NGG‑3’或者5’‑CCN‑Nx‑3’序列规则，N代表A、T、C和G中的任何一种，14≤X≤30，且X为整数，NX表示X个连续的脱氧核糖核苷酸。本发明专利技术的基因编辑系统将有望提高单子叶植物中的基因组编辑效率，促进作物遗传改良以及基础研究。

Gene editing system and method for editing plant genome by using it

The invention discloses a gene editing system and a method for editing plant genomes by using the gene editing system. The gene editing system including sgRNA transcription unit, and sequentially connected with the source by DMC1 gene in Maize Cas9 promoter DMC1p and Cas9 gene transcription unit, consisting of the target sites of sgRNA recognition with 5 'Nx NGG 3' or 5 'CCN Nx 3' sequence rules. N, T, C and A on behalf of G in any one, 14 = X = 30, and X is an integer, NX said X consecutive deoxyribotide. The gene editing system will hopefully improve genome editing efficiency, promote crop genetic improvement and basic research.

【技术实现步骤摘要】
一种基因编辑系统及应用其对植物基因组进行编辑的方法
本专利技术属于植物基因工程
，具体涉及一种基因编辑系统及应用其对植物基因组进行编辑的方法。
技术介绍
传统的育种技术主要依赖于自然界发生的遗传变异，通过杂交和回交等手段获得拥有优良性状的作物品种。但是自然的变异往往是随机的、有限的。最近几十年发展的转基因技术为作物育种提供了良好的机遇，基因工程育种也取得了巨大的成绩。转基因技术是通过将外源的目的DNA片段用人工的手段将其导入到植物的基因组从而获得某些优良性状如抗虫、抗除草剂等。转基因技术的特点使得获得的转基因植物含有外源的遗传物质，因此转基因食品的安全也为公众所担忧。近些年发展起来的基因组编辑(Genomeediting)技术为作物功能基因组研究以及育种提供了新的机遇。目前主要的基因组编辑技术包括三种，即：锌指核酸酶(Zincfingernuclease，ZFN)、类转录激活因子效应物核酸酶(Transcriptionactivatorlikeeffectornuclease，TALEN)和成簇的规律间隔的短回文重复序列及其相关系统(Clusteredregularlyinte本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种基因编辑系统，其包括sgRNA转录单元，以及由顺次连接的来源于玉米的DMC1基因启动子和Cas9基因组成的DMC1p‑Cas9转录单元，其中，sgRNA识别的靶位点符合5’‑Nx‑NGG‑3’或者5’‑CCN‑Nx‑3’序列规则，N代表A、T、C和G中的任何一种，14≤X≤30，且X为整数，NX表示X个连续的脱氧核糖核苷酸。

【技术特征摘要】
1.一种基因编辑系统，其包括sgRNA转录单元，以及由顺次连接的来源于玉米的DMC1基因启动子和Cas9基因组成的DMC1p-Cas9转录单元，其中，sgRNA识别的靶位点符合5’-Nx-NGG-3’或者5’-CCN-Nx-3’序列规则，N代表A、T、C和G中的任何一种，14≤X≤30，且X为整数，NX表示X个连续的脱氧核糖核苷酸。2.根据权利要求1所述的基因编辑系统，其中，所述DMC1基因启动子的序列如SEQIDNO.1所示。3.一种包括如权利要求1或2所述的基因编辑系统的重组载体。4.权利要求3所述重组载体的构建方法，其包括如下步骤：(1)克隆获得DMC1基因启动子并将其与Cas9基因顺次连接，组成DMC1p-Cas9转录单元；(2)构建识别靶位点的sgRNA转录单元，并将DMC1p-Cas9转录单元和sgRNA转录单元同时导入双元载体，得到重组载体，其中，sgRNA识别的靶位点符合5’-Nx-NGG-3’或者5’-CCN-Nx-3’序列规则，N代表A、T、C和G中的任何一种，14≤X≤30，且X为整数，NX表示X个连续的脱氧核糖核苷酸。5.根据权利要求4所述的构建方法，步骤(1)中，所述DMC1基因启动子的序列如SEQIDNO.1所示。6.根据权利要求5所述的构建方法，步骤(1)中，克隆获得DMC1基因启动子采用如下方法：以玉米B73的基因组DNA为模板，以序列如SEQIDNO.2和SEQIDNO.3所示的引物...

【专利技术属性】
技术研发人员：韩方普，冯超，王锐，柏晗，袁静，张晶，苏汉东，刘亚林，郭宪瑞，
申请(专利权)人：中国科学院遗传与发育生物学研究所，
类型：发明
国别省市：北京,11