高糖基化人生长激素融合蛋白及其制备方法与用途技术

本发明专利技术公开了一种高糖基化人生长激素融合蛋白。本发明专利技术的人生长激素融合蛋白所述融合蛋白从N端到C端依次含有人生长激素(hGH)、柔性肽接头(L)、至少一个人绒毛膜促性腺激素β‑亚基羧基末端刚性肽(CTP)和人免疫球蛋白Fc片段。本发明专利技术还公开了一种高效制备这类融合蛋白的方法。本发明专利技术构建的融合蛋白比重组hGH具有更优的体内药效，延长的体内循环半衰期，给药频率大大降低且生物利用度提高；同时其生产过程也更简单、高效。

High glucose human growth hormone fusion protein and its preparation method and Application

The present invention discloses a high glucose fusion protein of human growth hormone. The invention of the human growth hormone fusion protein of the fusion protein from the N to the C terminal sequence containing human growth hormone (hGH), flexible peptide linker (L), at least one chorionic gonadotropin beta subunit carboxy terminal peptide (CTP) and rigid Human Immunoglobulin Fc fragment. The present invention also discloses a method for efficiently preparing the fusion protein. The invention constructs a fusion protein with in vivo efficacy better than recombinant hGH, prolonged half-life, greatly reduce the frequency of administration and improve bioavailability; while the production process is more simple and efficient.

【技术实现步骤摘要】
高糖基化人生长激素融合蛋白及其制备方法与用途
本专利技术涉及融合蛋白领域，更具体地，本专利技术涉及一种高糖基化人生长激素融合蛋白及其制备方法和用途。
技术介绍
人生长激素(humangrowthhormone，hGH)是由脑垂体前叶嗜酸性细胞分泌的一种蛋白质激素，由191个氨基酸组成，其生理功能主要是促进物质代谢和生长发育。hGH通过促生长因子或胰岛素样生长因子介导作用于软骨组织，增加骨骼长度，从而达到促进人体的线性生长。最近几年hGH更多的功能被发现，包括促进骨骼肌和心肌细胞生长、促进蛋白质合成、调节免疫系统功能及增强免疫防御能力等作用。hGH的大规模临床应用也从最初的生长激素缺乏的儿童矮小症的预防和治疗，拓展到烧伤、急性胰腺炎、老年人延缓衰老等领域，其临床适应证还在不断扩展中。儿童和成人在生长激素缺乏的情况下，可以通过外源补充生长激素来进行治疗。天然hGH的体内清除半衰期约为0.3小时，目前商业化的重组人生长激素的体内清除半衰期约为2-3小时，注射后很快就会通过肝脏、肾脏清除，所以需要每天皮下注射给药，给患者带来很多痛苦。此外，长期注射重组人生长激素在少数病人体内产生抗体而影响疗本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种重组人生长激素融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白从N端至C端依次含有人生长激素、柔性肽接头、至少一个人绒毛膜促性腺激素β亚基的羧基末端刚性肽和人免疫球蛋白Fc片段；其中Fc片段优选人IgG Fc变体；更优选地，所述人IgG Fc变体包含位于野生型人IgG Fc中的至少一种氨基酸修饰，且变体具有降低的效应子功能和/或与新生儿受体FcRn的结合亲和力增强。

【技术特征摘要】
2016.08.19 CN 20161069487741.一种重组人生长激素融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白从N端至C端依次含有人生长激素、柔性肽接头、至少一个人绒毛膜促性腺激素β亚基的羧基末端刚性肽和人免疫球蛋白Fc片段；其中Fc片段优选人IgGFc变体；更优选地，所述人IgGFc变体包含位于野生型人IgGFc中的至少一种氨基酸修饰，且变体具有降低的效应子功能和/或与新生儿受体FcRn的结合亲和力增强。2.如权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述柔性肽接头含有两个或更多选自甘氨酸、丝氨酸、丙氨酸和苏氨酸的氨基酸，优选的，柔性肽接头氨基酸组成的结构通式为(GS)a(GGS)b(GGGS)c(GGGGS)d，其中a，b，c和d是大于或等于0的整数，且a+b+c+d≥1，更优选地，所述柔性肽接头的氨基酸选自如下序列：(a)GSGGGSGGGGSGGGGS；(b)GSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGS；(c)GSGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGS；(d)GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS。3.如权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述人绒毛膜促性腺激素β亚基的羧基末端刚性肽包含SEQIDNO：1或其截短的序列，其中所述截短的序列包含至少2个糖基化位点，优选的，所述人绒毛膜促性腺激素β亚基的羧基末端刚性肽选自如下序列单元：(i)SSSSKAPPPSLPSPSRLPGPSDTPILPQ；(ii)PRFQDSSSSKAPPPSLPSPSRLPGPSDTPILPQ；(iii)SSSSKAPPPS；(iv)SRLPGPSDTPILPQ。4.如权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述人绒毛膜促性腺激素β亚基的羧基末端肽刚性单元与权利要求3所述融合蛋白中的CTP氨基酸序列至少具有70％，80％，90％或95％的同一性。5.如权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合...

【专利技术属性】
技术研发人员：李强，陈思，郑云程，李子瑞，马心鲁，
申请(专利权)人：安源医药科技上海有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31