改进的细胞培养方法技术

本发明专利技术涉及用于在哺乳动物CHO细胞中产生多肽的细胞培养方法，其特征在于一次或多次温度变动和pH变动，就它们的时间选择和步长调整该变动，以减少细胞死亡、提高产物产率和改善产物质量。

Improved cell culture method

The present invention relates to a method for the cultivation of polypeptides produced in mammalian CHO cells, which is characterized in that one or more temperature change and pH change, time step selection and their adjustment of the changes, in order to reduce cell death and increase the yield and improve product quality.

【技术实现步骤摘要】
改进的细胞培养方法本申请是申请日为2011年4月25日、专利技术名称为“改进的细胞培养方法”的中国专利申请201180021050.2的分案申请。
本专利技术涉及生物技术的一般领域，尤其涉及细胞的培养及其在以工业规模生产多肽中的用途。本专利技术提供细胞培养方法，其特征在于至少一次温度变动和至少一次pH变动。这些方法适合用于培养具有高细胞存活率(viability)的细胞，优选如CHO细胞的哺乳动物细胞。在用于尤其是通过在哺乳动物细胞培养系统中重组表达多肽来尤其是以工业规模产生多肽时，本专利技术的细胞培养方法进一步允许获得高多肽生产力。
技术介绍
在过去二十年中，用重组技术制备多肽已发展为标准方法。通过克隆编码各多肽的基因、然后用该待表达的基因转化适宜的表达宿主、最后产生和纯化所获得的重组多肽产物来获得重组多肽提供了一类全新的通过生物学设计和产生的药物。在重组DNA技术后使用生物工程领域中发展的产生方法，制药产业中已制备了数目越来越多的药物活性化合物。这类生物产物包括单克隆抗体，其已发展为包括自身免疫病、炎性障碍、免疫抑制、肿瘤学等的多种医学领域中重要的治疗选择。这类生物来源药物的发展本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于产生重组多肽的方法，其包括在包含至少一次温度变动和至少一次pH变动的条件下在培养基中培养CHO细胞，并表达所述重组多肽，其中‑在第一温度下培养细胞至少3天，然后使温度变动至第二温度，该第二温度比第一温度低约1℃至约8℃之间，在所述第二温度下维持细胞至少另外两天的时间；‑在第一pH值下培养细胞至少2天，然后使pH变动至第二pH值，该第二pH值比第一pH低约0.05至约1个pH单位之间，在所述第二pH下维持细胞至少1天。

【技术特征摘要】
2010.04.26 US 61/327,8461.用于产生重组多肽的方法，其包括在包含至少一次温度变动和至少一次pH变动的条件下在培养基中培养CHO细胞，并表达所述重组多肽，其中-在第一温度下培养细胞至少3天，然后使温度变动至第二温度，该第二温度比第一温度低约1℃至约8℃之间，在所述第二温度下维持细胞至少另外两天的时间；-在第一pH值下培养细胞至少2天，然后使pH变动至第二pH值，该第二pH值比第一pH低约0.05至约1个pH单位之间，在所述第二pH下维持细胞至少1天。2.权利要求1的方法，其中pH在所述第一pH值和所述第二pH值之间主动改变。3.权利要求1的方法，其中pH在所述第一pH值和所述第二pH值之间被动改变。4.权利要求1-3中任一项的方法，其中所述第一温度在约33℃和约38℃之间的范围内。5.权利要求1-3中任一项的方法，其中所述第二温度在约30℃和约37℃之间的范围内。6.权利要求1-3中任一项的方法，其中所述第一pH值在约pH6.8和约pH7.5之间的范围内。7.权利要求1-3中任一项的方法，其中所述第二pH值在约pH6.0和约pH7.1之间的范围内。8.权利要求1-3中任一项的方法，其中主动维持所述第二pH至培养结束。9.权利要求1...

【专利技术属性】
技术研发人员：C·E·约斯腾，C·莱斯特，J·施密特，
申请(专利权)人：诺华股份有限公司，
类型：发明
国别省市：瑞士,CH