一种基于CD20的嵌合抗原受体及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种基于CD20的嵌合抗原受体及其应用，具体为以肿瘤特异靶点CD20为基础的嵌合抗原受体T(CAR‑T)细胞技术的构建方法及其在抗肿瘤治疗中的应用，所述嵌合抗原受体包括抗原结合结构域、跨膜结构域、共刺激信号传导区和CD3ζ信号传导结构域串联而成；其中，所述抗原结合结构域结合肿瘤表面抗原，所述肿瘤表面抗原为CD20。本发明专利技术的嵌合抗原受体通过对所述针对肿瘤表面抗原CD20的单链抗体进行特定的基因改造，改造后的抗体能够使抗原‑抗体结合力更强，不容易发生突变，且相比于其他嵌合抗原受体和其他肿瘤抗原有更好的效果，靶点的表达量高，使得CAR‑T细胞的免疫效果增强，增强了CAR‑T细胞的治疗效果。

A chimeric antigen receptor based on CD20 and its application

The invention relates to a chimeric antigen receptor CD20 and its application based on specific chimeric antigen receptor T in tumor specific target based on CD20 (CAR T) method to construct cell technology and its application in the treatment of cancer, the chimeric antigen receptor including the antigen binding domain, a transmembrane domain, costimulatory signal transduction and signal transduction domain CD3 zeta series; among them, the antigen binding domain with tumor surface antigen, the tumor surface antigen CD20. The invention of the chimeric antigen receptor by gene transformation of the specific scFv antibody against tumor surface antigen CD20, antibody modified antigen antibody binding to stronger, not prone to mutation, and compared to other chimeric antigen receptors and other tumor antigens have better effect, the expression of the target volume is high that makes the immune effect of CAR T cells increased, T cells increased CAR treatment effect.

【技术实现步骤摘要】
一种基于CD20的嵌合抗原受体及其应用
本专利技术涉及肿瘤的细胞免疫治疗领域，尤其涉及一种基于CD20的嵌合抗原受体及其应用，具体为以肿瘤特异靶点CD20为基础的嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞技术的构建方法及其在抗肿瘤治疗中的应用。
技术介绍
随着肿瘤免疫学理论和临床技术的发展，嵌合抗原受体T细胞疗法(ChimericantigenreceptorT-cellimmunotherapy，CAR-T)成为目前最有发展前景的肿瘤免疫疗法之一。一般，嵌合抗原受体CAR由一个肿瘤相关抗原结合区、胞外铰链区、跨膜区域以及胞内信号转导区组成。通常，CAR包含抗体的单链片段可变(Singlechainfragmentvariable，scFv)区或对肿瘤相关抗原(tumorassociatedantigen,TAA)具有特异性的结合结构域，其通过铰链和跨膜区与T细胞信号传导分子的胞质结构域偶联。最常见的淋巴细胞活化部分包括与T细胞效应物功能触发(例如CD3ζ)部分串联的T细胞共刺激结构域。CAR介导的过继性免疫疗法允许CAR-移植的T细胞以非HLA限制性方式直接识别靶肿瘤细胞上的TAA。大多数患本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种基于CD20嵌合抗原受体，其特征在于，所述嵌合抗原受体包括抗原结合结构域、跨膜结构域、共刺激信号传导区、CD3ζ信号传导结构域和可诱导自杀融合结构域串联而成；其中，所述抗原结合结构域结合肿瘤表面抗原，所述肿瘤表面抗原为CD20。

【技术特征摘要】
1.一种基于CD20嵌合抗原受体，其特征在于，所述嵌合抗原受体包括抗原结合结构域、跨膜结构域、共刺激信号传导区、CD3ζ信号传导结构域和可诱导自杀融合结构域串联而成；其中，所述抗原结合结构域结合肿瘤表面抗原，所述肿瘤表面抗原为CD20。2.根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述抗原结合结构域为针对肿瘤表面抗原CD20的单链抗体，所述针对肿瘤表面抗原CD20的单链抗体的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示；优选地，所述抗原结合结构域还包括针对肿瘤表面抗原CD20的突变体的单链抗体；优选地，所述针对肿瘤表面抗原CD20的突变体的单链抗体的氨基酸序列与SEQIDNO.1所示的氨基酸序列有90％以上的相似度。3.根据权利要求1或2所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述跨膜结构域为CD28跨膜结构域和/或CD8α跨膜结构域；优选地，所述共刺激信号传导区为CD28信号传导结构域、CD127信号传导结构域、IL-15Ra信号传导结构域或CD137信号传导结构域中的任意一种或至少两种的组合，优选为CD28信号传导结构域、CD127信号传导结构域、IL-15Ra信号传导结构域和CD137信号传导结构域的组合。4.根据权利要求1-3中任一项所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述可诱导自杀融合结构域为包含胱天蛋白酶9结构域；优选地，所述胱天蛋白酶9结构域的氨基酸序列如SEQIDNO.4所示；优选地，所述可诱导自杀融合结构域通过2A序列与CD3ζ信号传导结构域相串联。5.根据权利要求1-4中任一项所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述嵌合抗原受体包括信号肽、抗原结合结构域、跨膜结构域、共刺激信号传导区、CD3ζ信号传导结构域、2A序列和可诱导自杀融合结构域串联而成；优选地，所述嵌合抗原受体为Secretory信号肽、CD20抗原结合结构域，CD8α和/或CD28跨膜结构域，CD28信号传导结构域、CD127信号传导结构...

【专利技术属性】
技术研发人员：李昱琛，张政维，
申请(专利权)人：深圳市免疫基因治疗研究院，
类型：发明
国别省市：广东,44