包含白细胞凝集素的美容组合物的生产方法及其用途技术

本发明专利技术涉及包含从鲑科（Salmonidae）孵化液获得或可以从其获得的多肽的美容品组合物、生产所述组合物的方法以及它们在皮肤的各种美容应用中的用途，尤其是用于改善哺乳动物皮肤的美容外观。

Process for the production of a cosmetic composition comprising leukocytes and the use thereof

The present invention relates to include from salmonoid (Salmonidae) can be obtained from the production of hatching solution or cosmetic composition, the peptide obtained by the same method and their use in a variety of applications in cosmetic skin, especially for the improvement of mammalian skin cosmetic appearance.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】本专利技术涉及可源自于鲑科（Salmonidae）孵化液的多肽在用于皮肤的各种应用中的用途。具体来说，本文中所定义的多肽和包含所述多肽的组合物可用于改变、优选地改善皮肤的美容外观。皮肤是更易受攻击的人体器官之一。皮肤总是与外界刺激直接或间接地相互作用，并且常常暴露于环境因子并受其影响。事实上，皮肤可以被看做与外部世界接触的前线。这种持续的暴露能够引起皮肤、特别是皮肤美容外观的令人不快和/或不想要的物理和可见变化。尽管这样的变化可能不危及个体的健康，但这样的变化可能令人身体不适或看起来不舒服。事实上，由于皮肤清晰可见，因此皮肤外观的变化能够引起心理压力。因此，对维持、恢复或改善皮肤状况、特别是恢复皮肤的青春外观的有效治疗，存在着持续不断的需求。皮肤形成人体的最大器官，占个人重量的约12-16%。它作为外部世界和我们体内受控环境之间的屏障和调节势力两者，执行许多至关重要的作用。皮肤由3层构成，即表皮、真皮和皮下组织。表皮是皮肤最外部的上皮层。它充当物理屏障，防止从身体失水，并防止物质和有机体进入体内。它的厚度随身体部位而变。表皮由分层的鳞状上皮构成，即它由扁平细胞层构成。皮肤、毛发和指甲是角质化的，意味着它们具有由被称为角蛋白的蛋白质构成的死亡的、硬化的疏水表面。由于表皮的与角化细胞相关的细胞外脂类的含量，使表皮不具有渗透性，尤其是在表皮的中间层（透明层）中。粘膜（例如食道、口咽腔、生殖器官等的粘膜）主要是非角质化且潮湿的。表皮具有三种主要细胞类型，即角化细胞（皮肤细胞）、黑素细胞（产色素细胞）和朗氏细胞（免疫细胞）。梅克尔细胞是第四种不占优势的表皮细胞。角化细胞随着向外移动而成熟和分化，并伴有角蛋白的累积。它们最终脱落或擦落。它们形成四个或五个明显不同的层，从最浅表到最深处为：（i）具有无细胞核的死亡干透的坚硬细胞的角质层；（ii）具有含有嗜碱性颗粒的细胞并通过薄的透明层而与角质层向外隔开的颗粒层；（iii）刺状层（多刺、刺状或棘细胞层），其中细胞随着向上移动变得越来越扁平，以及（iv）具有柱状（长）再生细胞的基底层。紧靠表皮下方的是基膜，其是位于表皮与真皮之间的特化结构。真皮是皮肤的纤维结缔组织或支持层。主要纤维是交织的胶原蛋白纤维和弹性蛋白。皮下组织是紧靠真皮和表皮下方的脂肪层。它也被称为下皮或膜。皮下组织主要由脂肪细胞、神经和血管构成。在皮肤的下层颗粒层中产生新的上皮皮肤细胞。细胞随时间向皮肤表面迁移并变得更加酸性。在其30天的迁移期间，它们死亡并被角蛋白饱和。角蛋白和相关的脂类是重要的，因为它们保护皮肤抵御外部因素。许多因素可能造成皮肤美容外观劣化，这些因素包括疾病、受伤、环境因素、年龄、激素水平、药物、外部施加或摄入的材料、遗传状况或这些与其他因素的组合。与衰老相关的皮肤美容外观劣化是普遍的因素，特别是光老化即皮肤日射病。这种劣化可以在皮肤中的不规则或异常处看到，其可能表现为例如皮肤干燥、皱纹、细纹、松弛加重（松垂）或色素沉着改变。光老化是用于由长期UVA和UVB暴露引起的特征性变化的术语。生物功能和管控代谢应激的能力的降低，是所述老化过程的主要结果之一。老化是复杂的渐进性过程，其也引起皮肤的功能和美观变化。光老化是归因于皮肤连续长期暴露于约245-290nm的紫外（UV）辐射的皮肤老化过程，所述紫外辐射可以来自于自然光或合成光。因此，光老化也被称为由UVA和UVB射线引起的皮肤老化，特别是面部、耳、颈部和手的皮肤老化。皮肤干燥和/或脱落是老化皮肤的最常见征兆之一。尽管某些个体更易于发生皮肤干燥和/或脱落，但皮肤干燥和/或脱落现象能够影响任何人，而与年龄、性别或皮肤类型无关。当皮肤外层（具有透明层的角质层）的水通过例如经表皮水分丢失（TEWL）而耗尽时，发生皮肤干燥。当这一层被良好保湿时，它通过皮肤的失水最小并有助于抵御刺激物、过敏原和病菌。然而，当角质层干透时，其保护功能下降。这使得失水更多，导致皮肤易于受到环境因素的影响。理想情况下，角质层具有10%至30%的水含量。这种水使得皮肤柔软、平滑并具有柔性质地，即与皮肤的青春外观相关的特征。所述水来自大气、皮肤的下层和汗。由皮肤腺产生的油和由皮肤细胞产生的脂肪物质充当天然保湿剂，将角质层密封在水中。身体通过蒸发从皮肤表面连续损失水（TEWL）。在正常条件下，损失速率缓慢，且水可充分更替。当失水超过水的更替且角质层的水含量降低至低于10%时，出现皮肤干燥的特征性迹象和症状。改善或消除皮肤干燥和/或脱落，从而改善皮肤的美容外观的保湿剂，是非常合乎需要的。尽管在本领域内已知许多保湿剂，但对有效且温和的天然产品仍存在需求。表现出不想要或过量色素沉着、即色素沉着过度的表皮细胞，例如黄褐斑，是老化皮肤的另一种常见征兆。传统上，可以使用去角质处理来除去对皮肤的美容外观不利的表皮细胞。去角质处理移除表皮的外层以露出下面更新的皮肤细胞。去角质可以通过物理手段（例如磨皮）或通过化学手段来实现。化学去角质剂包括含有水杨酸、乙醇酸、水果酶、柠檬酸或苹果酸的磨砂剂，并且可由皮肤科医生以高浓度使用，或在非处方产品中以较低浓度应用。化学去角质可涉及使用含有α-羟基酸（AHA）或β-羟基酸（BHA）或起到使在细胞连接处将细胞保持在一起的胶状物质松散而使其渐渐松开的作用的酶的产品。这种类型的去角质被推荐用于人们治疗痤疮。去角质处理的最大缺点是用于实现所述去角质处理的一些产品和方法的高价格。去角质在开始时将导致皮肤有些变红。在化学脱皮接近结束时，皮肤将磨砂，在皮肤表面上颜色从亮白色变为灰色。因此，与去角质处理相比对皮肤更加温和的减少皮肤色素沉着过度的有效方法，是合乎需要的。除了老化之外，身体损伤可能降低皮肤的美容/美学外观。例如，由例如少量刮、擦等对皮肤上部（表面）层、即表皮和/或真皮的浅表损伤，可能在皮肤上造成不想要的瑕疵。由例如创伤、切割、感染、痤疮等引起的皮肤的身体损伤可能造成疤痕。创伤是尤其由机械、化学、热或病原性手段引起的外部或内部损伤，其造成结构性组织完整性的物理破坏。疤痕是在损伤后代替正常皮肤的纤维组织（纤维化）区域。疤痕由皮肤和身体其他组织中创伤修复的生物过程造成。因此，疤痕形成是愈合过程的天然部分。除了非常少的病损之外，每个创伤（例如事故、疾病或手术后）产生一定程度的疤痕形成本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于改善哺乳动物皮肤的美容外观的方法，在所述方法中，向所述动物给药：（i）多肽，其包含在SEQ ID No.1‑4任一个中所示的氨基酸序列或与所述序列有至少90%同一性的序列或任何所述序列的一部分；或（ii）包含（i）和一种或多种可药用赋形剂和/或稀释剂的美容组合物。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.06.24 GB 1110777.81.一种用于改善哺乳动物皮肤的美容外观的方法，在所述方法
中，向所述动物给药：
（i）多肽，其包含在SEQIDNo.1-4任一个中所示的氨基酸序列
或与所述序列有至少90%同一性的序列或任何所述序列的一部分；或
（ii）包含（i）和一种或多种可药用赋形剂和/或稀释剂的美容组
合物。
2.权利要求1的方法，其中所述多肽或组合物通过或可以通过至
少包含下列步骤的方法来获得：
a）将鱼卵、优选地鲑鱼卵悬浮在极小体积的水中；
b）诱导所述卵的同步快速孵化，优选地使对于超过95%的胚胎来
说，孵化在不到2小时内完成；
c）对所述孵化的卵进行过滤以获得孵化液；以及
d）对所述孵化液进行过滤以获得所述多肽和/或组合物，其中过
滤所述孵化液的步骤至少包括下列步骤：
（i）使用孔眼尺寸为至少5μm的滤器过滤所述孵化液，并收集
滤液；
（ii）使用孔眼尺寸为0.30-0.60μm的滤器过滤来自于步骤（i）
的滤液，并收集滤液；
（iii）用可药用缓冲液交换来自于步骤（ii）的滤液中的水；
（iv）使用排除尺寸为至少80kDa的滤器过滤从步骤（iii）获得
的溶液，并收集滤液；以及
（v）使用孔眼尺寸为0.15-0.30μm的滤器过滤来自于步骤（iv）
的滤液，并收集滤液，其中所述滤液提供包含所述多肽的组合物。
3.权利要求1的方法，其中所述多肽或组合物通过或可以通过至
少包含下述步骤的方法来获得：
a′）将鱼卵、优选地鲑鱼卵悬浮在极小体积的水中；
b′）诱导所述卵的同步快速孵化，优选地使对于超过95%的胚胎
来说，孵化在不到2小时内完成；
c′）对所述孵化的卵进行过滤以获得孵化液；以及
d′）对所述孵化液进行过滤以获得所述多肽和/或组合物，其中过
滤所述孵化液的步骤至少包括下列步骤：
（i′）使用孔眼尺寸为至少5μm的滤器过滤所述孵化液，并收集
滤液；
（ii′）对来自于步骤（i′）的滤液进行离子交换层析并收集洗脱液；
（iii′）用可药用缓冲液交换来自于步骤（ii′）的洗脱液中的水；
以及
（iv′）使用孔眼尺寸为0.15-0.30μm的滤器过滤从步骤（iii′）获
得的溶液并收集滤液，其中所述滤液提供包含所述多肽或其部分的组
合物。
4.权利要求3的方法，其包括使用孔眼尺寸为0.30-0.60μm的滤
器过滤来自于步骤（i′）的滤液并收集滤液的其他步骤。
5.权利要求3或4的方法，其中所述步骤（ii′）包括：
（a）将所述滤液装载到离子交换柱、优选地DEAE（二乙基氨基
乙基）柱上；
（b）用适合的缓冲液，优选地包含pH8.5的20mMTris-HCl的
清洗液清洗所述柱子；
（c）使用洗脱缓冲液或溶剂从所述柱子洗脱所述多肽，优选其中
所述洗脱缓冲液包含另外含有50mMNaCl的所述清洗液；以及
（d）收集来自于步骤（c）的洗脱液。
6.权利要求2的方法，其中：
a）步骤（i）中的滤器的孔眼尺寸为5-15μm，其中所述孔眼尺寸
优选地为7μm；
b）...

【专利技术属性】
技术研发人员：贝恩特·斯·沃瑟尔，汉斯·克里斯蒂安·莱伦，法妮·法戈，
申请(专利权)人：阿克生物科技公司，
类型：发明
国别省市：挪威;NO