一种桑叶提取物中1‑脱氧野尻霉素含量的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种桑叶提取物中1‑脱氧野尻霉素含量的检测方法，采用反相高效液相色谱‑蒸发光散射检测方法进行，选取氨基柱来对桑叶提取物中的1‑脱氧野尻霉素进行分离，采用蒸发光散射检测器配合检测，并采用外标两点法计算其中1‑脱氧野尻霉素的含量。本发明专利技术的检测方法，操作简单方便、具有良好的精密度、重现性和稳定性，使用前无需对1‑脱氧野尻霉素进行柱前衍生化和标记且检测仪器价格适中，普及推广性好且加样回收率高，用于桑叶提取物中1‑脱氧野尻霉素含量含量的检测，对于桑叶提取物的质量控制提供了有效方法。

【技术实现步骤摘要】
一种桑叶提取物中1-脱氧野尻霉素含量的检测方法
本专利技术涉及提取物的检测
，尤其涉及一种桑叶提取物中1-脱氧野尻霉素含量的检测方法。
技术介绍
桑叶为桑科植物桑的干燥叶，栽培或野生，对土壤适应性强，全国大部分地区多有种植。桑叶味苦、甘，性寒。经研究发现，桑叶在药理上具有抗炎、降血糖作用，并能够降血脂、利尿。1-脱氧野尻霉素(DNJ)是一种强的α-葡萄糖苷酶抑制剂，抑制小肠中的α-葡萄糖苷酶将人体从淀粉类食物中所分解来的蔗糖、麦芽糖等二糖分解成葡萄糖，能明显抑制食后血糖急剧上升；1-脱氧野尻霉素(DNJ)和桑叶黄酮协同作用能更有效抑制血糖上升，防治糖尿病及其并发的心脑血管疾病。目前最常用的DNJ的检测方法为从甘草提取物中分离制备出天然存在的高纯度的24-羟基甘草酸，在此基础上以9-芴基氯甲酸甲酯(FMOC-Cl)对DNJ进行柱前衍生化，再使用反相高效液相-紫外检测器测定或者以9-芴基氯甲酸甲酯(FMOC-Cl)标记DNJ后反相高效液相-荧光检测器检测。中国专利CN201310015381.6和中国专利CN201410108293.5公开的就是上述两种方法，存在两个方面缺点：一方本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种桑叶提取物中1‑脱氧野尻霉素含量的检测方法，其特征在于采用反相高效液相色谱‑蒸发光散射检测方法进行，具体包括如下步骤：(1)液相色谱条件及系统适应性试验：以氨基键合硅胶为填充剂，色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)；以以乙腈溶液为流动相A，以6.5mmol乙酸铵溶液为流动相B；室温20℃，相对湿度为25％‑40％，柱温25‑40℃，流速0.8‑1.2mL/min，进样量20μL；以Chromachem蒸发光散射器进行检测，衰减设为5，灵敏度为中，雾化温度30‑40℃，蒸发温度45‑55℃；流动相梯度为：在0.01min，乙腈和6.5mmol乙酸铵溶液体积比为32‑35:65‑68；在0...

【技术特征摘要】
1.一种桑叶提取物中1-脱氧野尻霉素含量的检测方法，其特征在于采用反相高效液相色谱-蒸发光散射检测方法进行，具体包括如下步骤：(1)液相色谱条件及系统适应性试验：以氨基键合硅胶为填充剂，色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)；以以乙腈溶液为流动相A，以6.5mmol乙酸铵溶液为流动相B；室温20℃，相对湿度为25％-40％，柱温25-40℃，流速0.8-1.2mL/min，进样量20μL；以Chromachem蒸发光散射器进行检测，衰减设为5，灵敏度为中，雾化温度30-40℃，蒸发温度45-55℃；流动相梯度为：在0.01min，乙腈和6.5mmol乙酸铵溶液体积比为32-35:65-68；在0.01至10-15min段，乙腈和6.5mmol乙酸铵溶液体积比从32-35:65-68线性变化为35-45:55-65；在10-15至15-25min段，乙腈和6.5mmol乙酸铵溶液体积比从35-45:55-65线性变化为45-55:45-55；在15-25min至25-35min段，乙腈和6.5mmol乙酸铵溶液体积比从45-55:45-55线性变化为55-65:35-45；(2)对照品溶液的制备：精密称取1-脱氧野尻霉素对照品，加乙腈溶液和6.5mmol乙酸铵溶液溶解制成不同浓度的对照品溶液I和对照品溶液II，其中对照品溶液I的浓度为0.2-0.6mg/mL，对照品溶液II的浓度为0.8-1.2mg/mL；(3)供试品溶液的制备：称取桑叶提取物，加入乙腈和6.5mmol乙酸铵溶液配制成浓度为0.5-2mg/mL的供试品溶液，超声溶解5-20min，放置至室温，摇匀，即得；(4)测定法：将按照步骤(2)和(3)制得的对照品溶液I、对照品溶液II和供试品溶液在步骤(1)的色谱检测条件下注入高效液相色谱仪进行检测，记录色谱图，然后计算桑叶提取物样品中1-脱氧野尻霉素的含量。2.根据权利要求1所述的桑...

【专利技术属性】
技术研发人员：易铭，钟慧，李晔，金显友，魏元刚，杨永安，
申请(专利权)人：江苏耐雀生物工程技术有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32