一种利用生物分析仪检测肠炎沙门氏菌的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用生物分析仪检测肠炎沙门氏菌的方法，包括以下步骤：(1)提取待测肠炎沙门氏菌菌株的DNA；(2)以提取的肠炎沙门氏菌菌株的DNA作为模板进行PCR反应；(3)将凝胶基质与染料混合物按照一定质量比混合均匀，过滤；(4)将凝胶染料混合物注入分离芯片中，将marker加入样品孔中；(5)将步骤(2)中的PCR产物加入样品孔中，将ladder加入指定的ladder孔中；(6)将芯片涡旋混匀后放入生物分析仪中进行自动检测分析。本发明专利技术利用生物分析仪对肠炎沙门氏菌进行快速检测，操作简单快捷，具有较高的灵敏度和准确度，适用性强，有利于大范围的应用推广，对食品安全监测监管具有重大意义。

Method for detecting Salmonella enteritidis by using biological analyzer

The invention discloses a method for using the biological analyzer to detect Salmonella enteritidis, which comprises the following steps: (1) extracted from Salmonella enteritidis strain DNA; (2) to Salmonella enteritidis isolates extracted DNA as template for PCR reaction; (3) the gel matrix and dye mixture according to the a certain ratio of mixing, filtering; (4) the gel dye mixture injection separation chip, marker will be added to the sample hole; (5) the steps of (2) PCR in the products are added to the sample hole, add ladder to the specified ladder Kong Zhong; (6) the chip vortexmixing into biological analyzer in the automatic detection and analysis. The present invention uses biological analyzer for rapid detection of Salmonella enteritidis, simple and quick operation, high accuracy and high sensitivity, strong applicability, application to a wide range, is of great significance for food safety monitoring and supervision.

【技术实现步骤摘要】
一种利用生物分析仪检测肠炎沙门氏菌的方法
本专利技术涉及微生物检测领域，具体涉及一种利用生物分析仪检测肠炎沙门氏菌的方法。
技术介绍
致病菌(Pathogenicbacteria)能引起疾病的微生物称为病原微生物或致病菌。病原微生物包括细菌、病毒、螺旋体、立克次氏体、衣原体、支原体、真菌及放线菌等。一般所说的致病菌指的是病原微生物中的细菌。细菌的致病性与其毒力、侵入数量及侵入门户有关。虽然绝大多数细菌是无害甚至有益的，但是相当大一部分可以致病。条件致病菌只在特定条件下致病，如有伤口可以允许细菌进入血液，或者免疫力降低时。例如，金黄色葡萄球菌和链球菌也是正常菌群，常可以存在于体表皮肤，鼻腔而不引起疾病，但可以潜在引起皮肤感染，如肺炎(pneumonia)、脑膜炎(meningitis)和败血症(sepsis)等。沙门氏菌是一种革兰氏阴性短杆菌，不形成芽胞，临床上可表现为胃肠炎、肠热病、菌血症综合征或局灶性疾病。受此菌威胁最大的是婴幼儿、老人及免疫缺陷个体。据统计在世界各国的种类细菌性食物中毒中，沙门氏菌引起的食物中毒常列榜首。我国内陆地区也以沙门氏菌为首位。当前，各国政府和学术研究机构本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用生物分析仪检测肠炎沙门氏菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)提取待测肠炎沙门氏菌菌株的DNA；(2)以提取的肠炎沙门氏菌菌株的DNA作为模板进行PCR反应；(3)将凝胶基质与染料混合物按照一定质量比混合均匀，过滤；(4)将凝胶染料混合物注入分离芯片中，将marker加入样品孔中；(5)将步骤(2)中的PCR产物加入样品孔中，将ladder加入指定的ladder孔中；(6)将芯片涡旋混匀后放入生物分析仪中进行自动检测分析。

【技术特征摘要】
1.一种利用生物分析仪检测肠炎沙门氏菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)提取待测肠炎沙门氏菌菌株的DNA；(2)以提取的肠炎沙门氏菌菌株的DNA作为模板进行PCR反应；(3)将凝胶基质与染料混合物按照一定质量比混合均匀，过滤；(4)将凝胶染料混合物注入分离芯片中，将marker加入样品孔中；(5)将步骤(2)中的PCR产物加入样品孔中，将ladder加入指定的ladder孔中；(6)将芯片涡旋混匀后放入生物分析仪中进行自动检测分析。2.根据权利要求1所述的利用生物分析仪检测肠炎沙门氏菌的方法，其特征在于，步骤(2)中PCR反应所用的引物序列为：Sal-3a：5’-TATCGCCACGTTCGGGCAA-3’；Sal-4a：5’-TCGCACCGTCAAAGGAACC-3’。3.根据权利要求1所述的利用生物分析仪检测肠炎沙门氏菌的方法，其特征在于，步骤(2)中PCR反应条件为：首先，94℃变性3min，之后进行25～30个扩增循环，扩增循环程式设定为9...

【专利技术属性】
技术研发人员：董秋月，
申请(专利权)人：杭州更蓝生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33