The invention discloses a primer probe combination for detecting Bordetella pertussis. Including for the detection of Bordetella pertussis upstream primer and downstream primer and probe, the upstream primer sequence such as SEQ ID NO.1 list is shown; the downstream primers as shown in the sequence list SEQ ID NO.2; the probe as shown in the sequence list SEQ ID NO.3. The present invention also provides a kit comprising a primer probe combination for detecting Bordetella pertussis and its use. The present invention provides for the detection of Bordetella pertussis primer combination and Probe Kit according to the gene sequence of Bordetella pertussis, designed primers for the high sensitivity of the probe and kit, provide only able to detect Bordetella pertussis, kit specific.
【技术实现步骤摘要】
用于检测百日咳鲍特氏菌的引物探针组合、试剂盒及应用
本专利技术涉及生物检测
,具体涉及一种用于检测百日咳鲍特氏菌的引物探针组合、PCR反应液、试剂盒及其应用。
技术介绍
百日咳鲍特氏杆菌(BordetellaPertussis)是革兰氏阴性杆菌,其为百日咳的致病菌,仅对人类致病。典型的百日咳病程持续数周并可分为3期。卡他期(1-2周):流涕,低热,鼻炎和轻微的咳嗽(婴儿可出现呼吸暂停/呼吸衰竭)。痉咳期(2-6周):阵发性痉咳,多为干咳,继之深长吸气,发出“鸡鸣样”哮吼声和咳嗽声后呕吐。恢复期(≥2周):咳嗽发作的频率和严重程度逐渐减轻。百日咳鲍特氏杆菌潜伏期为5-21天,平均为7天。患者从出现卡他等前驱症状至出现症状后3周有传染性。百日咳的临床诊断标准为:咳嗽≥2周并伴有以下症状之一:阵发性痉咳,吸气时“鸡鸣样”哮吼声或无其他病因的咳嗽后呕吐。鲍特氏菌属下的其他种如副百日咳鲍特氏菌(BordetellaParapertussis)和霍氏鲍特氏菌(Bordetellaholmesii)也能感染人类并导致类似百日咳的哮吼声症状。6个月以下的婴儿患百日咳 ...
【技术保护点】
一种用于检测百日咳鲍特氏菌的引物探针组合,其特征在于,包括用于检测百日咳鲍特氏菌的上游引物、下游引物及探针,所述上游引物如序列表中SEQ ID NO.1所示;所述下游引物如序列表中SEQ ID NO.2所示;所述探针如序列表中SEQ ID NO.3所示;其中所述探针的5'端连接有FAM荧光基团,其3'端连接有TAMRA淬灭基团。
【技术特征摘要】
1.一种用于检测百日咳鲍特氏菌的引物探针组合,其特征在于,包括用于检测百日咳鲍特氏菌的上游引物、下游引物及探针,所述上游引物如序列表中SEQIDNO.1所示;所述下游引物如序列表中SEQIDNO.2所示;所述探针如序列表中SEQIDNO.3所示;其中所述探针的5'端连接有FAM荧光基团,其3'端连接有TAMRA淬灭基团。2.一种试剂盒,其特征在于,包括PCR反应液,所述PCR反应液包括如权利要求1所述的用于检测百日咳鲍特氏菌的引物探针组合。3.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述上游引物和所述下游引物的终浓度均为0.8μM,所述探针的终浓度为0.4μM。4.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述PCR反应液还包括荧光定量PCR扩增试剂、内标质粒、用于扩增内标质粒中内标片段的内标引物和用于检测内标片段的内标探针,所述内标引物包括内标上游引物和内标下游引物,所述内标上游引物如序列表中SEQIDNO.4所示;所述内标下游引物如序列表中SEQIDNO.5所示;所述内标探针如序列表中SEQIDNO.6所示;其中,所述内标探针的5'端连接有HEX荧光基团,其3'端连接有TAMRA淬灭基团。5.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于,所述内标上游引物和所述内标下游引物的终浓度均为0.8μM,所述内标探针的终浓度为0.4μM。6.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于,所述内标质粒为以pUC57为载体的内标...
【专利技术属性】
技术研发人员:李俊,农文燕,马东礼,姜含芳,刘孝荣,陈虹宇,蔡德丰,朱纯青,
申请(专利权)人:深圳市泰尔迪恩生物信息科技有限公司,深圳市儿童医院,
类型:发明
国别省市:广东,44
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